观察磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）特异性抑制剂LY294002对CD3单克隆抗体（CD3 mAb ）活化的T细胞及结核杆菌低分子多肽抗原（Mtb-Ag）激活γδΤ细胞的影响，探讨PI3K在CD3 mAb活化的T细胞及Mtb-Ag启动的γδΤ细胞TCR途径信号转导中作用。

分离获取健康人外周血单个核细胞（PBMC ），用CD3 mAb、佛波醇酯＋离子霉素（PMA+IM）、Mtb-Ag刺激PBMC，采用流式细胞术检测CD3⁺ T细胞和γδΤ细胞0、6、12、24、48 h和72 h的CD69分子的表达情况。PBMC经LY294002(0、0.4、2、10 μmol/L）处理后再刺激培养，用EIA试剂盒检测CD3 mAb和PMA+IM刺激组CD3⁺ T细胞白细胞介素（IL）-2的含量；经CD3 PE和CD69 FITC、γδ PE和CD69 FITC双染后，检测LY294002对CD3 mAb活化T细胞和Mtb-Ag活化的γδΤ细胞增殖的影响，并计数培养扩增10 d的细胞数量。

用CD3 mAb刺激24 h CD3⁺ T细胞和γδΤ细胞CD69的表达均达高峰（均在56％左右），用PMA+IM刺激6 h，均达高峰（均在99％左右），用Mtb-Ag刺激24 h，亦均达高峰，但CD3⁺ T细胞和γδΤ细胞CD69的表达分别为（16.0±0.0）％和（75.2±0.7）%，3组同时间点CD3⁺ T细胞CD69的表达之间差异均有统计学意义（均P<0.05 ），而γδΤ细胞CD69的表达在PMA+IM刺激组高于CD3 mAb刺激组和Mtb-Ag刺激组（均P< 0.05），后两组差异则没有统计学意义（均P>0.05）。用LY294002终浓度分别为0、0.4、2、10 μmol/L处理的样本，CD3 mAb刺激组CD3⁺ T细胞CD69的表达分别为（52.0±0.5）%、（46.3±0.4）%、（33.2±0.4）%和（19.1±0.0）%；Mtb-Ag刺激组γδΤ细胞CD69的表达分别为（66.2±0.6）%、（58.4±0.5）%、（38.1±0.3）%和（19.3±0.1）%。0、0.4、2、10 μmol/L LY294002处理CD3⁺ T细胞后，CD3 mAb刺激组IL-2的含量分别为（561.1±86.2）、（477.0±75.5）、（280.3±53.9）、（36.0±8.7 ）ng/L，PMA+IM刺激组为（1 922.2±371.3）、（1 928.3±381.7）、（1 938.1±262.1）、（1 915.4±201.6) ng/L。CD3⁺ T细胞的总数由培养前的1.5×10⁶分别增殖到（35.6±8.4）×10⁶、（31.1±7.3 ）×10⁶、（18.7±5.0）×10⁶和（7.0±2.0）×10⁶；γδΤ细胞的总数由培养前的1.5×10⁶分别增殖到（7.0±1.1）×10⁶、（4.7±1.0）×10⁶、（1.3±0.8）×10⁶和（0.2±0.1）×10⁶。

Mtb-Ag可特异性的激活γδΤ细胞，其活化信号转导需通过TCR通路，LY294002对CD3 mAb活化的T细胞及Mtb-Ag启动的γδΤ细胞具有明显的抑制作用。