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【摘要】“观察植物细胞的有丝分裂”是高中《生物》重要实验之一，难度大。多数学生在自制的临时装片中难以观察到处于不同分裂期的细胞，实验效果不够理想。笔者经过多次实验和探索，发现实验中有几个步骤非常重要，它直接关系到学生能否在显微镜下找到处于有丝分裂各期的细胞。
【关键词】植物细胞有丝分裂 根尖材料的选取 洋葱根尖的准备
Several steps of the experiment for observing the karyokinesis of vegetal cell
Zhao Juan
【Abstract】The experiment, observing the karyokinesis of vegetal cell, is one of important experiments with a big difficulty in senior Biology. It is not easy to become conscious of the cells which are in different cleavage period for most students in the home-made casual film and the effect of the experiment is not satisfied. Through many times’ experiment and research, the writer finds that there are several steps which are very important in the experiment, because they will have a direct influence on whether students can find the cell which is in different period of the karyokinesis under the microscope.
【Keywords】Karyokinesis of vegetal cell Selection of root-point material Preparation of the root point of the onion
“观察植物细胞的有丝分裂”是高中《生物》重要实验之一，难度大。多数学生在自制的临时装片中难以观察到处于不同分裂期的细胞，实验效果不够理想。我经过多次实验和探索，发现实验的几个步骤非常重要，它直接关系到学生能否在显微镜下找到处于有丝分裂各期的细胞。
1．根尖材料的选取。洋葱根尖是典型、较为理想的观察植物细胞有丝分裂的实验材料。但是许多学校受季节因素和学生人数多等教学条件限制，培养的洋葱根尖不能满足学生实验的需要，影响了实验进行。针对上述情况，可用大蒜根、小麦根和蚕豆根等材料代替洋葱根尖。这些材料来源方便，具有培养期短、易生根、根尖数目多和观察清晰等优点。
2．洋葱根尖的准备。
2．1 洋葱根尖的培养。在室温为10－25℃条件下，实验前3－5天将洋葱鳞茎剥去一层外皮，用刀片切去鳞茎底部陈根或削去一薄层，露出新的细胞，有利于洋葱鳞茎尽早生根。将鳞茎放在盛满水的烧杯上，使其底部接触水面，放在温暖、向阳处，每天换水，以免氧气不足导致根尖腐烂，细胞生长缓慢，影响细胞有丝分裂的观察。
洋葱的生根与周围环境温度关系密切。在室温15－25℃范围内洋葱鳞茎易生根，且数目多，生长速度快。在低温和高温条件下，洋葱生根少且缓慢，特别是经冷藏处理过，处于休眠期的洋葱鳞茎更是不易生根。近几年来，市场上供应的洋葱多数是经冷藏处理过的，如果先用刀片切去这些处于休眠状态下的洋葱鳞茎陈根后，让它们在15－25℃的室温下放置几周，待根部周围长出许多白色小突起后再培养就能提高生根率。此外，洋葱的生根率还与它们的形状有关，体形扁圆、底部面积较大的洋葱鳞茎生根数较多。
2．2 根尖的取材。根尖的取材时间非常重要。各种不同植物根尖细胞在一天24小时内分裂时间不同，分裂高峰期也不尽相同，所以根尖的取材时间应根据不同植物种类、温度条件来确定。洋葱根尖细胞在室温30℃左右时，上午10时下午4时根尖细胞分裂较旺盛，而在其它时间剪取根尖，则不易观察到不同分理裂期的细胞。当洋葱根尖长至1－2厘米时，在中午10－11时左右剪取1厘米左右长的根尖放入固定液中，固定几小时后，取出放入70%酒精保存液中保存，这时根尖细胞分裂相最多，学生在显微镜下较易找到处于不同分裂期的细胞。
2．3 根尖的解离。正确处理根尖解离的时间也很重要。若解离时间太短则无法进行压片。解离时间太长根尖完全酥软，无法进行有丝分裂各期细胞的观察。将根尖从固定液中取出，用清水冲洗干净后放入盛有15%盐酸解离液的培养皿里解离5分钟左右。只要根尖色泽变白、略带透明即可，此时根尖压片效果最佳。用15%解离液代替10%解离液能缩短实验时间，使学生有充足的时间观察有丝分裂装片及自制临时装片。
2．4 根尖的染色和压片。洋葱根尖染色剂常使用龙胆紫和醋酸洋红。由于醋酸洋红价格贵而且气味较大，配制复杂，所以选取龙胆紫为佳。它的染色效果比醋酸洋红好。如果用1%龙胆紫溶液对根尖进行染色，细胞核内都被染成深紫色，显微镜下难以清晰地观察到有丝分裂各期细胞和染色体行为的变化，在1%龙胆紫溶液中滴加少量10%醋酸至溶液呈鲜亮的紫色为最佳。加入10%醋酸的目的是加强对细胞核和染色体的选择性着色，以避免核内都被染成一片深紫色。用这种方法配制的染色剂可长久保存，溶液不易产生沉淀。
清水冲洗净根尖上的解离液后，用镊子将洋葱根尖放在载玻片上，为了使其染色均匀，可用镊子将圆柱状根尖压扁后加2滴1%龙胆紫染液进行染色，染色时间为3分钟左右。如果用酒精灯加热可缩短染色时间。方法是用试管夹夹住载玻片一端，放在酒精灯火外焰上方来回移动几次可促使根尖尽快着色。
染色完毕后，将盖玻片放在根尖上，再盖上2－3层吸水纸，用拇指轻压一下，根尖细胞均匀地扩散成云雾状。显微镜下镜检，用低倍镜在生长点附近可观察到已被染成淡紫色的、单层、排列紧密的呈正方形的细胞。换上高倍镜进行观察，即可找到处于细胞分裂间期和有丝分裂前期、中期、后期、末期的细胞，可清晰地辨认出有丝分裂各时期染色体行为的变化。
【关键词】植物细胞有丝分裂 根尖材料的选取 洋葱根尖的准备
Several steps of the experiment for observing the karyokinesis of vegetal cell
Zhao Juan
【Abstract】The experiment, observing the karyokinesis of vegetal cell, is one of important experiments with a big difficulty in senior Biology. It is not easy to become conscious of the cells which are in different cleavage period for most students in the home-made casual film and the effect of the experiment is not satisfied. Through many times’ experiment and research, the writer finds that there are several steps which are very important in the experiment, because they will have a direct influence on whether students can find the cell which is in different period of the karyokinesis under the microscope.
【Keywords】Karyokinesis of vegetal cell Selection of root-point material Preparation of the root point of the onion
“观察植物细胞的有丝分裂”是高中《生物》重要实验之一，难度大。多数学生在自制的临时装片中难以观察到处于不同分裂期的细胞，实验效果不够理想。我经过多次实验和探索，发现实验的几个步骤非常重要，它直接关系到学生能否在显微镜下找到处于有丝分裂各期的细胞。
1．根尖材料的选取。洋葱根尖是典型、较为理想的观察植物细胞有丝分裂的实验材料。但是许多学校受季节因素和学生人数多等教学条件限制，培养的洋葱根尖不能满足学生实验的需要，影响了实验进行。针对上述情况，可用大蒜根、小麦根和蚕豆根等材料代替洋葱根尖。这些材料来源方便，具有培养期短、易生根、根尖数目多和观察清晰等优点。
2．洋葱根尖的准备。
2．1 洋葱根尖的培养。在室温为10－25℃条件下，实验前3－5天将洋葱鳞茎剥去一层外皮，用刀片切去鳞茎底部陈根或削去一薄层，露出新的细胞，有利于洋葱鳞茎尽早生根。将鳞茎放在盛满水的烧杯上，使其底部接触水面，放在温暖、向阳处，每天换水，以免氧气不足导致根尖腐烂，细胞生长缓慢，影响细胞有丝分裂的观察。
洋葱的生根与周围环境温度关系密切。在室温15－25℃范围内洋葱鳞茎易生根，且数目多，生长速度快。在低温和高温条件下，洋葱生根少且缓慢，特别是经冷藏处理过，处于休眠期的洋葱鳞茎更是不易生根。近几年来，市场上供应的洋葱多数是经冷藏处理过的，如果先用刀片切去这些处于休眠状态下的洋葱鳞茎陈根后，让它们在15－25℃的室温下放置几周，待根部周围长出许多白色小突起后再培养就能提高生根率。此外，洋葱的生根率还与它们的形状有关，体形扁圆、底部面积较大的洋葱鳞茎生根数较多。
2．2 根尖的取材。根尖的取材时间非常重要。各种不同植物根尖细胞在一天24小时内分裂时间不同，分裂高峰期也不尽相同，所以根尖的取材时间应根据不同植物种类、温度条件来确定。洋葱根尖细胞在室温30℃左右时，上午10时下午4时根尖细胞分裂较旺盛，而在其它时间剪取根尖，则不易观察到不同分理裂期的细胞。当洋葱根尖长至1－2厘米时，在中午10－11时左右剪取1厘米左右长的根尖放入固定液中，固定几小时后，取出放入70%酒精保存液中保存，这时根尖细胞分裂相最多，学生在显微镜下较易找到处于不同分裂期的细胞。
2．3 根尖的解离。正确处理根尖解离的时间也很重要。若解离时间太短则无法进行压片。解离时间太长根尖完全酥软，无法进行有丝分裂各期细胞的观察。将根尖从固定液中取出，用清水冲洗干净后放入盛有15%盐酸解离液的培养皿里解离5分钟左右。只要根尖色泽变白、略带透明即可，此时根尖压片效果最佳。用15%解离液代替10%解离液能缩短实验时间，使学生有充足的时间观察有丝分裂装片及自制临时装片。
2．4 根尖的染色和压片。洋葱根尖染色剂常使用龙胆紫和醋酸洋红。由于醋酸洋红价格贵而且气味较大，配制复杂，所以选取龙胆紫为佳。它的染色效果比醋酸洋红好。如果用1%龙胆紫溶液对根尖进行染色，细胞核内都被染成深紫色，显微镜下难以清晰地观察到有丝分裂各期细胞和染色体行为的变化，在1%龙胆紫溶液中滴加少量10%醋酸至溶液呈鲜亮的紫色为最佳。加入10%醋酸的目的是加强对细胞核和染色体的选择性着色，以避免核内都被染成一片深紫色。用这种方法配制的染色剂可长久保存，溶液不易产生沉淀。
清水冲洗净根尖上的解离液后，用镊子将洋葱根尖放在载玻片上，为了使其染色均匀，可用镊子将圆柱状根尖压扁后加2滴1%龙胆紫染液进行染色，染色时间为3分钟左右。如果用酒精灯加热可缩短染色时间。方法是用试管夹夹住载玻片一端，放在酒精灯火外焰上方来回移动几次可促使根尖尽快着色。
染色完毕后，将盖玻片放在根尖上，再盖上2－3层吸水纸，用拇指轻压一下，根尖细胞均匀地扩散成云雾状。显微镜下镜检，用低倍镜在生长点附近可观察到已被染成淡紫色的、单层、排列紧密的呈正方形的细胞。换上高倍镜进行观察，即可找到处于细胞分裂间期和有丝分裂前期、中期、后期、末期的细胞，可清晰地辨认出有丝分裂各时期染色体行为的变化。