【摘 要】
：
目的分析不同试剂和方法制备脊髓灰质炎假病毒的包装效果,并比较不同检测方法的有效性。方法比较转染试剂(PEI、polyfect、jet PRIME、Effectene)、骨架质粒转染形式(pc DNA3
【机 构】
：
中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所;
【基金项目】
：
中国医学科学院医学科技创新团队课题(2016-12M-3-026);云南省创新团队课题(2015HC027)
论文部分内容阅读
目的分析不同试剂和方法制备脊髓灰质炎假病毒的包装效果,并比较不同检测方法的有效性。方法比较转染试剂(PEI、polyfect、jet PRIME、Effectene)、骨架质粒转染形式(pc DNA3.1-P1与Replicon共转染;pc DNA3.1-P1转染表达24 h后,转染Replicon;pc DNA3.1-P1与线性化的p Repluc共转染;pc DNA3.1-P1转染表达24 h后,转染线性化的p Repluc)、衣壳蛋白质粒与骨架质粒的质量(μg)比(分别为1∶1、1∶2、1∶3、2∶1、2∶2和2∶3)对制备假病毒效率的影响。获得的假病毒颗粒分别用报告基因荧光素酶活性检测法、荧光定量RT-PCR法、ELISA方法检测效价,并进行相关性分析。结果单独转染衣壳蛋白质粒或骨架质粒时,转染效果最佳试剂分别为jet PRIME和Effectene,当转染体系为共转染,转染试剂以Effectene为准;骨架质粒以RNA形式在衣壳蛋白转录后24 h转染,或以线性化质粒形式与衣壳蛋白共转染,效果差异无统计学意义(P>0.05);衣壳蛋白质粒与骨架质粒的比值为1∶2和1∶3时均可得到效价较高的假病毒。检测假病毒效价时,报告基因萤光素酶活性与核酸拷贝数具有一致性,病毒的核酸拷贝数与效价在0.01水平上显著相关,病毒颗粒的D抗原含量与效价在0.05水平上显著相关。结论建立了制备Sabin株假病毒的方法,并验证了荧光素酶检测假病毒效价的有效性。
其他文献
许多微生物在糖酵解过程中能够将糖类转化为乙偶姻来避免过度酸化。乙偶姻能够调节NAD+/NADH的比率并存储碳源。此外,乙偶姻作为一种具有特殊奶油香气的食用香料,广泛应用于
通过炼钢增碳试验表明:煤基增碳剂的增碳效率与沥青基增碳剂相当,用其代替目前普遍使用的沥青基增碳剂炼钢增碳不影响钢的质量,同时可提高企业经济效益。
感叹句的委婉否定 (EuphemisticNegative)是指在表达层面上不具备否定的形式、但却具有否定意思的语言现象 ,其表达的意思是隐含的、模糊的和间接的。本文从若干例证出发 ,对
本文通过我国会计准则、国际会计准则和英美国家对资产定义的比较,就资产定义中的三个基本特征和两个确认条件阐述了自己的一些认识和观点。
目的分析肾综合征出血热10年前后流行病学及临床特点,比较该病10年前后临床特点的变化,为肾综合征出血热临床诊治提供依据。材料与方法1、研究对象:为吉林大学第一医院感染科
以挥发油的保存率作为研究方法的评价指标，从生产角度研究挥发油β－ＣＤ包结物在颗粒剂生产中的应用，并采用正交法考察不同喷雾干燥条件对挥发油保存率的影响，挥发油保存率达８６．６％。
目前对云的观测检测研究颇多,但关于对云的垂直结构(云底高、云厚、叠加云层等)的观测尚缺乏直接有效的手段。采用信息数字化方法之一的V-3θ结构图方法与风云二号卫星在云分
装配式钢筋混凝土结构是我国建筑结构发展的重要方向之一,预制装配式结构楼盖基本采用的是叠合板的结构形式,与现浇楼盖相比省去了大量的模板和人力消耗。然而实际施工中,在
背景有研究显示,侵袭性念珠菌病(invasive candidiasis,IC)早期,病人体内与侵袭性感染有关的优势抗原Ig G抗体水平升高,可能适用于IC的早期诊断。本研究组前期工作也发现,80%
几乎所有的历史学家、经济学家都认为，中国社会发展到了明代中叶才出现了手工业、商业的繁荣，商品经济在社会生活中地位有了较高的地位。但是，从文学发展史来分析，中国商业经济的