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人工底物偶氮酪蛋白（azocasein）在酶的作用下释放发色团，通过分光光度法可以定量嗜冷菌蛋白酶活性。经波长扫描，确定发色物质最大吸收波长为345nm。通过单因素试验，表明试验的最佳参数为：底物与酶反应时间2h，TCA质量分数为12％，TCA终止反应后溶液静止时间30min；该方法在一定浓度范围内线形关系良好（R2=0．9913），样本标准差为8．3×10^4-1．4×10^-3，变异系数为0．21％～0．54％。检测限为1．33U／mL；通过对UHT中嗜冷菌蛋白酶活性测定，表明酶活