摘 要：为什么实验总做不成功，没有那样明显染色效果。为解开这个谜，努力做实验，上网借鉴行家的实验方法，动手动脑，查阅资料，采用“延迟”的方法，使核中RNA分解，补充吡罗红染色液等方法，提高实验效果，解开了这个“谜”。
　　关键词：洋葱内表皮；角质层向上；延迟；RNA分解；补充吡罗红染液
　　1.做实验3《观察DNA和RNA在细胞中的分布》时，采用洋葱鳞片叶内表皮细胞做实验材料，用吡罗红甲基绿染色，其配制的浓度适当降低，0.8g溶于100mL蒸馏水中（再按教材的配比加缓冲液），还有另一种配制染液的方法（甲基绿2g溶于98ml蒸馏水，取吡罗红5g溶于95ml蒸馏水。取6ml甲基绿溶液和2ml吡罗红溶液加入16ml蒸馏水即为A液[1]），可以参考，也要现配现用。染色时间为3～5min，了解到甲基绿易被氧化，而活细胞的细胞核是厌氧状态的，有利于甲基绿的染色，因此在制作内表皮细胞装片时，内表皮的角质层向上（新撕出的表面向下），载玻片上不滴加生理盐水（加热过程中浓度变化也比较大），防止温度过高破坏细胞核的厌氧状态，或细胞中的蛋白质等变性被破坏，结果细胞核染成深紫色、黑色。用盐酸水解时，可适当加热可以提高至35℃，但不要太热，防止烫手，或盐酸挥发出来。然后滴水洗去盐酸，制作装片进行观察，如果观察到细胞变红了，可能是酸性强（甲基绿遇强酸性变红），或者内表皮的方向放错了（新表面向上了），需要反转过来（借助盖玻片），并加醋酸钠溶液或pH为8左右的清水（效果会更好一些），中和、缓冲一下，再染色。如果细胞都是浅紫色的，则清洗过度，偏碱性，用盐酸水解程度不够，或用新配制的染液再染色。如果细胞核及周围部分细胞质为绿色，则可能是核中或某些细胞器（叶绿体、线粒体）中的DNA 分解并释放到细胞质中；较少数的核染成蓝绿色。多数细胞核染为紫色（偏蓝绿色），生活的细胞核的核仁会产生很多RNA的，核仁自身RNA的含量不少，水解后的洋葱表皮细胞用吡罗红染液单独染色时，细胞核的红色比细胞质的红色还深，因此核被染为蓝紫色比较普遍。实验结果没有“唯一答案”的。
　　2.因为RNA容易被RNase分解，就再设计以下一个实验：先把内表皮撕下来，放入湿润的培养皿保存，不要马上实验，过四、五小时再水解，漂洗、染色、制作装片，结果观察到细胞核染为蓝绿色，一些细胞的细胞质为红色。再补充吡罗红染液，则细胞质为红色，细胞核仍为蓝绿色，这说明核及细胞质中的RNA经过一段时间，发生分解，特别是细胞核。这时才出现与课本相同的实验结果。其实这也是一种比较特别的形式。也可以先把内表皮水解、漂洗后，延迟30min后染色、制作装片，也有相同染色效果。
　　通过多次实验，结果都是“失败”（实际上也反映出一定的实验事实）。再经过努力，上网，查资料，动手动脑，终于做出与教材一样的结果，弄清实验原理。虽然走了不少弯路，总算弄清实验的来龙去脉，值得宽慰。
　　参考文献
　　[1] 梁强.2009.实验“观察DNA和RNA在细胞中的分布”的改进.生物学通报，44（8）：2.
　　[2] 俞如旺、林陈、康思婷.2011.“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验的改进研究.生物学教学，36（6）：36.37.