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【摘要】目的：研究西南远志的化学成分。方法：采用HPD100大孔树脂、硅胶柱层析、Rp-18反相柱层析方法分离纯化。结果：从西南远志（Polygala crotalarioides Buch. Ham.）乙醇提取液中分离得到5个糖脂类化合物，通过光谱学方法鉴定，确定为：Fallaxose C（1）、Fallaxose D（2）、Senegose H（3）、β-D-（3-O-sinapoyl）-fructofuranosyl-α-D-（6-O-sinapoyl）- glucopyranoside（4）、Tenuifoliside C（5）。结论：这五个化合物均为在西南远志中首次分离得到。
【关键词】西南远志；提取分离；化学成分；糖脂
【中图分类号】R2842【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2015）16-0013-04
西南远志（Polygala crotalarioides Buch. Ham.）为远志科远志属植物，别名地花生、翻转红、猪大肠、娘母良，生于山坡灌丛中或草地中，是云南民间传统中药，具有理气化痰、安神补心、活血止痛等功效。药理研究表明，西南远志具有抗疲劳、抗低温、抗缺氧、提高机体应激能力，提高机体对不良环境的适应能力等活性。为寻求其有效成分，对该植物的化学成分进行分离鉴定，从云南省云县的西南远志中分离得到5个糖脂类化合物，分别为Fallaxose C（1）、Fallaxose D（2）、Senegose H（3）、β-D-（3-O-sinapoyl）- fructofuranosyl-α-D- （6-O-sinapoyl）-glucopyranoside（4）、Tenuifoliside C（5）。结构式见图1。
1仪器与材料
11仪器Bio-Rad FTS-135型红外光谱测定仪（KBr压片）；UV2401 PC紫外可见分光光度计；VG AUTO Spec3000质谱仪；Finnigan MAT90质谱仪；BrukerAM-400核磁共振仪；DRX-500核磁共振仪。TMS作内标，化学位移δ用ppm表示，偶合常数J用Hz表示。
1.2材料柱层析硅胶（200-300目、300-400目，青海海洋化工）；薄层层析硅胶（青海海洋化工）；反相填充材料Rp-18（40-60μm，Merk）；MCI-gel（70-150μm，Mitsubishi chemical Corporation，Japan）；Sephadex LH-20（Amersham Pharmacia Biotech AB SE-751 84 Uppsala Sweden）；HPD100大孔树脂（山东鲁抗医药股份有限公司）；HPLC分析柱（Agilent，ZORBAXSB-C18，46×150mm）；HPLC半制备柱（Agilent，ZORBAXSB-C18， 94×250mm）；显色剂：5%H2SO4乙醇溶液。
西南远志1kg，采自云南省云县，由昆明植物所陈书坤研究员鉴定为Polygala crotalarioides Buch. Ham.，标本保存与昆明植物所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室。
2提取与分离
西南远志根1kg，粉碎后用75%乙醇提取4次，第一次4h，之后三次各2h，合并提取液，减压浓缩回收乙醇。浸膏通过HPD100树脂，用水、75%乙醇、95%乙醇依次洗脱。减压浓缩得浸膏。
75%洗脱部分浸膏96g，以200g硅胶（80～100目）拌样，1.5kg硅胶（200～300目）干柱柱层析，用氯仿-甲醇-水（7∶4∶1）洗脱，得到10个组分（Ⅰ-ⅹ）。
组分Ⅴ-Ⅵ（71g），经硅胶（氯仿-甲醇-水8∶2∶01→7∶3∶05），Rp-18反相柱（甲醇-水4∶6→6∶4）反复柱层析，Sephadex LH-20（甲醇）纯化，得到化合物1（10mg）、2（15mg）、3（22mg）、4（12mg）、5（25mg）。
3结构鉴定
化合物1：无定形粉末，negative-ion FABMS m/z （%）：1103[M-H]-（100），957（45），结合13C NMR确定该化合物分子式为C51H60O27。1H NMR（400MHz， CD3DO）：δ 582（1H， d， J=35Hz， H-1），356 （1H，dd， J=12， 5Hz， H-6），369（1H，dd， J=12， 2Hz， H-6），459（1H，d，J=8Hz， H-1′），371*（1H， H-6′），393*（1H， H-6′），447（1H， d， J=8Hz， H-1″），379*（1H， H-6″），405*（1H， H-6″），163（3H，s， H-6″Ac），421（1H，d，J=12Hz， H-1），471（1H，d，J=12Hz， H-1），385*（1H， H-6），390*（1H， H-6），742（1H，d，J=85Hz， H-2″″），681（1H，d，J=85Hz， H-3），681（1H，d，J=85Hz， H-5″″），742（1H，d，J=85Hz， H-6″″），768（1H，d，J=16Hz， H-7″″），636（1H，d，J=16Hz， H-8″″），819（1H，dd，J=8， 1Hz， H-2″″），758（1H，t，J=8Hz， H-3″″′），769（1H，tt，J=8， 1Hz， H-4″″′），758（1H，t， J=8Hz， H-3″″′），819（1H，dd，J=8， 1Hz， H-2″″′）。13C NMR见表1。结合波谱数据与文献可确定化合物为Fallaxose C。（*表示数据与其他信号峰重叠）。
化合物2：无定形粉末，negative-ion FABMS m/z （%）：1133[M-H]-（100），987（23），957（35），结合13C NMR确定该化合物分子式为C52H62O28。1H NMR（400MHz， CD3DO）：δ 584（1H，d，J=35Hz， H-1），356（1H，dd，J=12， 5Hz， H-6），368（1H，dd，J=12， 2Hz， H-6），459（1H，d，J=8Hz， H-1′），372*（2H， H-6′），393*（1H， H-6′），447（1H，d，J=8Hz， H-1′），399（1H，dd，J=12， 2Hz， H-6″），406（1H，dd，J=12， 4Hz， H-6″），1.59（3H，s， H-6″Ac），421（1H，d，J=12Hz， H-1），472（1H，d，J=12Hz， H-1），384（1H，dd，J=12， 3Hz， H-6），389*（1H， H-6），743（1H，d，J=85 Hz， H-2″″），680（1H，d，J=85Hz， H-3″″），680（1H，d，J=85Hz， H-5″″），743（1H，d，J=85 Hz， H-6″″），768（1H，d，J=16Hz， H-7″″），637（1H，d，J=16Hz， H-8″″），820（1H，dd，J=8Hz， 1.5， H-2″″′），760（1H，t，J=8Hz， H-3″″），768（1H，tt，J=8， 1.5Hz， H-4″″′），760（1H，t，J=8Hz， H-3″″′），820（1H，dd，J=8， 1Hz， H-2″″′）。13C NMR见表1。结合波谱数据与文献可确定化合物为Fallaxose D。 化合物3：无定形粉末，negative-ion FABMS m/z （%）：1164[M-H]-（100），1133（40），987（35），957（12），797（10），结合13C NMR确定该化合物分子式为C53H64O29。1H NMR（400MHz， CD3DO）：δ 586（1H，d，J=35Hz， H-1），414（1H，dd，J=12， 5Hz， H-6），460（1H，d，J=8Hz， H-6），207（3H，s， H-4Ac），460（1H，d，J=8Hz， H-1′），446（1H，d，J=8Hz， H-1″），344（1H，dd，J=12， 5Hz， H-6″），361（1H，dd，J=12， 3Hz， H-6″），418（1H，d，J=12Hz， H-1），473（1H，d，J=12Hz， H-1），390（1H，dd，J=12， 7Hz， H-6），384（1H，dd，J=12， 3Hz， H-6），816（1H，dd，J=8， 1Hz， H-2″″），758（1H，t，J=8Hz， H-3″″），763（1H，tt，J=8， 1Hz， H-4″″），816（1H，dd，J=8， 1Hz， H-6″″），758（1H，t，J=8Hz， H-5″″）。13C NMR见表1。结合波谱数据与文献确定其化合物结构为Senegose H。
化合物4：白色无定形粉末，negative-ion FABMS m/z （%）：753[M-H]-（100），691（25），629（12），547（70），结合13C NMR确定该化合物分子式为C34H42O19。1H NMR（400MHz， CD3DO）：δ 359（1H，d，J=12.1Hz， H-1），363（1H，d，J=12.1Hz， H-1），383（1H，dd，J=12.1， 33Hz， H-6），390（1H，dd，J=12.1， 69Hz， H-6），551（1H，d，J=38Hz， H-1′），348（1H，dd，J=97， 38Hz， H-1′），421（1H，dd，J=117， 72Hz， H-6′），468（1H，dd，J=117， 16Hz， H-6′），694（1H， s， H-2″），694（1H， s， H-6″），796（1H，d，J=159Hz， H-7″），654（1H，d，J=159Hz， H-8″），387（3H，s， H-3″），387（3H，s， H-5″），689（1H，s， H-2），689（1H，s， H-6），759（1H，d，J=158， H-7），656（1H，d，J=158， H-8），358（3H，s， H-3），358（3H，s， H-5）。13C NMR见表1。以上数据与文献进行对比，确定该化合物为β-D-（3-O-sinapoyl）-fructofuranosyl- α-D-（6-O-sinapoyl）-glucopyranoside。
化合物5：白色无定形粉末，negative-ion FABMS m/z （%）：767[M-H]-（85），547（100），385（10），341（12），结合13C NMR确定该化合物分子式为C35H44O19。1H NMR（400MHz， CD3DO）：δ 361（1H，d，J=12.2Hz， H-1），365（1H，d，J=12.2Hz， H-1），386（1H，dd，J=12.1， 33Hz， H-6），391（1H，dd，J=12.1， 69Hz， H-6），553（1H，d，J=38Hz， H-1′），553（1H，d，J=38Hz， H-1′），423（1H，dd，J=116， 72Hz， H-6′），468（1H，dd，J=116， 1.5Hz， H-6″），690（1H， s， H-2″），690（1H，s， H-6″），797（1H，d，J=158Hz， H-7″），644（1H，d，J=158Hz， H-8″），386（3H，s， H-3″），386（3H，s， H-5），688（1H，s， H-2），688（1H，s， H-6），759（1H，d，J=158Hz， H-7），642（1H，d，J=158Hz， H-8），384（3H，s， H-3），384（3H，s， H-5）。13C NMR见表1。以上数据与文献进行对比，确定该化合物为Tenuifoliside C。
4结论与讨论
查阅文献可知，糖脂类化合物在该属中广泛存在，故该类化合物可能与西南远志的生物活性具有一定的相关性，后期将对化合物单体进行活性研究。本实验提取的5个化合物在该植物中均为首次分离得到，通过理化性质和波谱鉴定，均为糖脂类化合物，为该植物的研究提供了一定的实验基础。
参考文献
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[7] Saitoh H， Miyase T， Ueno A. Senegoses F-I Oligosaccharide Multi-Esters from the root of Polygala senega var. latifolia Toor. et.Gray[J]. Chem. Pharm. Bull， 1993， 41（12）： 2125-2128.
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[10] 吴志军，欧阳明安，杨崇仁.黄花远志茎皮的寡糖酯和酚类成分[J].云南植物研究，2000，22（4）：482-494.
[11] Li Chuang-Jun， Yang Jing-Zhi， Zhang Dong-Ming， et al. Chinese Journal of natural Medicines， 2011，9（5）：321-328.
（收稿日期：20150430）
【关键词】西南远志；提取分离；化学成分；糖脂
【中图分类号】R2842【文献标志码】 A【文章编号】1007-8517（2015）16-0013-04
西南远志（Polygala crotalarioides Buch. Ham.）为远志科远志属植物，别名地花生、翻转红、猪大肠、娘母良，生于山坡灌丛中或草地中，是云南民间传统中药，具有理气化痰、安神补心、活血止痛等功效。药理研究表明，西南远志具有抗疲劳、抗低温、抗缺氧、提高机体应激能力，提高机体对不良环境的适应能力等活性。为寻求其有效成分，对该植物的化学成分进行分离鉴定，从云南省云县的西南远志中分离得到5个糖脂类化合物，分别为Fallaxose C（1）、Fallaxose D（2）、Senegose H（3）、β-D-（3-O-sinapoyl）- fructofuranosyl-α-D- （6-O-sinapoyl）-glucopyranoside（4）、Tenuifoliside C（5）。结构式见图1。
1仪器与材料
11仪器Bio-Rad FTS-135型红外光谱测定仪（KBr压片）；UV2401 PC紫外可见分光光度计；VG AUTO Spec3000质谱仪；Finnigan MAT90质谱仪；BrukerAM-400核磁共振仪；DRX-500核磁共振仪。TMS作内标，化学位移δ用ppm表示，偶合常数J用Hz表示。
1.2材料柱层析硅胶（200-300目、300-400目，青海海洋化工）；薄层层析硅胶（青海海洋化工）；反相填充材料Rp-18（40-60μm，Merk）；MCI-gel（70-150μm，Mitsubishi chemical Corporation，Japan）；Sephadex LH-20（Amersham Pharmacia Biotech AB SE-751 84 Uppsala Sweden）；HPD100大孔树脂（山东鲁抗医药股份有限公司）；HPLC分析柱（Agilent，ZORBAXSB-C18，46×150mm）；HPLC半制备柱（Agilent，ZORBAXSB-C18， 94×250mm）；显色剂：5%H2SO4乙醇溶液。
西南远志1kg，采自云南省云县，由昆明植物所陈书坤研究员鉴定为Polygala crotalarioides Buch. Ham.，标本保存与昆明植物所植物化学与西部植物资源持续利用国家重点实验室。
2提取与分离
西南远志根1kg，粉碎后用75%乙醇提取4次，第一次4h，之后三次各2h，合并提取液，减压浓缩回收乙醇。浸膏通过HPD100树脂，用水、75%乙醇、95%乙醇依次洗脱。减压浓缩得浸膏。
75%洗脱部分浸膏96g，以200g硅胶（80～100目）拌样，1.5kg硅胶（200～300目）干柱柱层析，用氯仿-甲醇-水（7∶4∶1）洗脱，得到10个组分（Ⅰ-ⅹ）。
组分Ⅴ-Ⅵ（71g），经硅胶（氯仿-甲醇-水8∶2∶01→7∶3∶05），Rp-18反相柱（甲醇-水4∶6→6∶4）反复柱层析，Sephadex LH-20（甲醇）纯化，得到化合物1（10mg）、2（15mg）、3（22mg）、4（12mg）、5（25mg）。
3结构鉴定
化合物1：无定形粉末，negative-ion FABMS m/z （%）：1103[M-H]-（100），957（45），结合13C NMR确定该化合物分子式为C51H60O27。1H NMR（400MHz， CD3DO）：δ 582（1H， d， J=35Hz， H-1），356 （1H，dd， J=12， 5Hz， H-6），369（1H，dd， J=12， 2Hz， H-6），459（1H，d，J=8Hz， H-1′），371*（1H， H-6′），393*（1H， H-6′），447（1H， d， J=8Hz， H-1″），379*（1H， H-6″），405*（1H， H-6″），163（3H，s， H-6″Ac），421（1H，d，J=12Hz， H-1），471（1H，d，J=12Hz， H-1），385*（1H， H-6），390*（1H， H-6），742（1H，d，J=85Hz， H-2″″），681（1H，d，J=85Hz， H-3），681（1H，d，J=85Hz， H-5″″），742（1H，d，J=85Hz， H-6″″），768（1H，d，J=16Hz， H-7″″），636（1H，d，J=16Hz， H-8″″），819（1H，dd，J=8， 1Hz， H-2″″），758（1H，t，J=8Hz， H-3″″′），769（1H，tt，J=8， 1Hz， H-4″″′），758（1H，t， J=8Hz， H-3″″′），819（1H，dd，J=8， 1Hz， H-2″″′）。13C NMR见表1。结合波谱数据与文献可确定化合物为Fallaxose C。（*表示数据与其他信号峰重叠）。
化合物2：无定形粉末，negative-ion FABMS m/z （%）：1133[M-H]-（100），987（23），957（35），结合13C NMR确定该化合物分子式为C52H62O28。1H NMR（400MHz， CD3DO）：δ 584（1H，d，J=35Hz， H-1），356（1H，dd，J=12， 5Hz， H-6），368（1H，dd，J=12， 2Hz， H-6），459（1H，d，J=8Hz， H-1′），372*（2H， H-6′），393*（1H， H-6′），447（1H，d，J=8Hz， H-1′），399（1H，dd，J=12， 2Hz， H-6″），406（1H，dd，J=12， 4Hz， H-6″），1.59（3H，s， H-6″Ac），421（1H，d，J=12Hz， H-1），472（1H，d，J=12Hz， H-1），384（1H，dd，J=12， 3Hz， H-6），389*（1H， H-6），743（1H，d，J=85 Hz， H-2″″），680（1H，d，J=85Hz， H-3″″），680（1H，d，J=85Hz， H-5″″），743（1H，d，J=85 Hz， H-6″″），768（1H，d，J=16Hz， H-7″″），637（1H，d，J=16Hz， H-8″″），820（1H，dd，J=8Hz， 1.5， H-2″″′），760（1H，t，J=8Hz， H-3″″），768（1H，tt，J=8， 1.5Hz， H-4″″′），760（1H，t，J=8Hz， H-3″″′），820（1H，dd，J=8， 1Hz， H-2″″′）。13C NMR见表1。结合波谱数据与文献可确定化合物为Fallaxose D。 化合物3：无定形粉末，negative-ion FABMS m/z （%）：1164[M-H]-（100），1133（40），987（35），957（12），797（10），结合13C NMR确定该化合物分子式为C53H64O29。1H NMR（400MHz， CD3DO）：δ 586（1H，d，J=35Hz， H-1），414（1H，dd，J=12， 5Hz， H-6），460（1H，d，J=8Hz， H-6），207（3H，s， H-4Ac），460（1H，d，J=8Hz， H-1′），446（1H，d，J=8Hz， H-1″），344（1H，dd，J=12， 5Hz， H-6″），361（1H，dd，J=12， 3Hz， H-6″），418（1H，d，J=12Hz， H-1），473（1H，d，J=12Hz， H-1），390（1H，dd，J=12， 7Hz， H-6），384（1H，dd，J=12， 3Hz， H-6），816（1H，dd，J=8， 1Hz， H-2″″），758（1H，t，J=8Hz， H-3″″），763（1H，tt，J=8， 1Hz， H-4″″），816（1H，dd，J=8， 1Hz， H-6″″），758（1H，t，J=8Hz， H-5″″）。13C NMR见表1。结合波谱数据与文献确定其化合物结构为Senegose H。
化合物4：白色无定形粉末，negative-ion FABMS m/z （%）：753[M-H]-（100），691（25），629（12），547（70），结合13C NMR确定该化合物分子式为C34H42O19。1H NMR（400MHz， CD3DO）：δ 359（1H，d，J=12.1Hz， H-1），363（1H，d，J=12.1Hz， H-1），383（1H，dd，J=12.1， 33Hz， H-6），390（1H，dd，J=12.1， 69Hz， H-6），551（1H，d，J=38Hz， H-1′），348（1H，dd，J=97， 38Hz， H-1′），421（1H，dd，J=117， 72Hz， H-6′），468（1H，dd，J=117， 16Hz， H-6′），694（1H， s， H-2″），694（1H， s， H-6″），796（1H，d，J=159Hz， H-7″），654（1H，d，J=159Hz， H-8″），387（3H，s， H-3″），387（3H，s， H-5″），689（1H，s， H-2），689（1H，s， H-6），759（1H，d，J=158， H-7），656（1H，d，J=158， H-8），358（3H，s， H-3），358（3H，s， H-5）。13C NMR见表1。以上数据与文献进行对比，确定该化合物为β-D-（3-O-sinapoyl）-fructofuranosyl- α-D-（6-O-sinapoyl）-glucopyranoside。
化合物5：白色无定形粉末，negative-ion FABMS m/z （%）：767[M-H]-（85），547（100），385（10），341（12），结合13C NMR确定该化合物分子式为C35H44O19。1H NMR（400MHz， CD3DO）：δ 361（1H，d，J=12.2Hz， H-1），365（1H，d，J=12.2Hz， H-1），386（1H，dd，J=12.1， 33Hz， H-6），391（1H，dd，J=12.1， 69Hz， H-6），553（1H，d，J=38Hz， H-1′），553（1H，d，J=38Hz， H-1′），423（1H，dd，J=116， 72Hz， H-6′），468（1H，dd，J=116， 1.5Hz， H-6″），690（1H， s， H-2″），690（1H，s， H-6″），797（1H，d，J=158Hz， H-7″），644（1H，d，J=158Hz， H-8″），386（3H，s， H-3″），386（3H，s， H-5），688（1H，s， H-2），688（1H，s， H-6），759（1H，d，J=158Hz， H-7），642（1H，d，J=158Hz， H-8），384（3H，s， H-3），384（3H，s， H-5）。13C NMR见表1。以上数据与文献进行对比，确定该化合物为Tenuifoliside C。
4结论与讨论
查阅文献可知，糖脂类化合物在该属中广泛存在，故该类化合物可能与西南远志的生物活性具有一定的相关性，后期将对化合物单体进行活性研究。本实验提取的5个化合物在该植物中均为首次分离得到，通过理化性质和波谱鉴定，均为糖脂类化合物，为该植物的研究提供了一定的实验基础。
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（收稿日期：20150430）