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论文摘要：文章对西替利嗪的两种制剂进行了生物等效性评价。
主题词：西替利嗪 生物等效性
中图分类号：O622.4
西替利嗪（cetirizine）是一种长效、强选择性、无中枢抑制作用的H1受体拮抗剂，临床上主要用于治疗季节性过敏性鼻炎和急、慢性荨麻疹等过敏性疾病。有关西替利嗪的片剂、胶囊等普通剂型的体内动力学研究已有报道，但国内仍没有西替利嗪口腔崩解片的体内动力学研究有关报道。本试验对鲁南贝特制药有限公司的盐酸西替利嗪口腔崩解片（受试制剂）与盐酸西替利嗪片（参比制剂）进行单剂量人体生物等效性试验，对两种制剂进行生物等效性评价。
1 仪器与试药
HP1100系列高效液相色谱仪（美国安捷伦科技公司）。西替利嗪对照品（山东新华制药股份有限公司，质量分数99.7%）；普罗帕酮（内标，中国药品生物制品检定所）；乙腈为色谱纯（天津四友生物医学技术有限公司）；磷酸二氢胺为分析纯（沈阳化学试剂一厂）；空白人血浆（中国医科大学附属盛京医院输血科）。
受试制剂：盐酸西替利嗪口腔崩解片由鲁南贝特制药有限公司研制，规格：每片含盐酸西替利嗪10 mg，批号060717。参比制剂：贝分（盐酸西替利嗪片）为鲁南贝特制药有限公司产品，规格：每片含盐酸西替利嗪10 mg，批号050919。
2 方法与结果
2.1 研究对象
选择健康男性志愿者20名，平均年龄（24.4±1.05）岁，平均身高（1.73±0.05） m，平均体质量（67.8±6.33） kg，试验前经体格检查，心电图、肝、肾功能等各项指标均为正常，由本人签署知情同意书，经医学伦理委员会批准。
2.2 给药及样本采集
采用两制剂随机交叉试验设计。20名健康受试者以自身为对照，随机交叉，分别口服受试制剂和参比制剂。服用受试制剂和参比制剂的间隔周期为1周。20名受试者禁食12 h，试验日晨空腹服用受试制剂2片（相当于西替利嗪20 mg）和参比制剂2片（相当于西替利嗪20 mg），将受试制剂（口腔崩解片）置于舌上，无需咀嚼，待崩解无砂砾感后随唾沫咽下，不需用水或只需用少量水送服，参比制剂用200 mL温水送服。服药4 h后进食统一的标准餐。于服药前和服药后的15、30 min和1.0、1.5、2.0、3.0、5.0、7.0、9.0、13.0、24.0、34.0 h，取前臂静脉血4.0 mL，置肝素化试管中，离心10 min，分离血浆于塑料试管中，保存于-20 ℃冰箱中待测。
2.3 色谱条件
Hypersil BDS C18色谱柱（5.0 mm×150 mm，5 μm，大连依利特公司）；流动相为乙腈0.05 mol·L-1磷酸铵缓冲液（体积比37∶70）；流速 1.5 mL·min-1；检测波长231 nm；柱温30 ℃；进样量50 μL。
2.4 血浆样品的处理
取血浆样品0.5 mL置10 mL具塞试管中，加入内标溶液（普罗帕酮21 μg· mL-1的甲醇溶液）50 μL，补加甲醇50 μL后混匀，加入1 mL 枸橼酸缓冲液（1 mol·L-1，pH 6.0），再加入二氯甲烷4 mL后混匀，往复振摇20 min，3.5×103 r·min-1离心10 min。吸取上清液置另一具塞试管内，在50 ℃恒温水浴下氮气吹干，于残渣中加入500 μL甲基叔丁基醚，加入0.25 mol·L-1磷酸溶液300 μL，涡悬混合10 s，3.5×103 r·min-1离心5 min，取下层水相进样50 μL。
2.5 分析方法确证
2.5.1 方法专属性 在“2.3”项色谱条件下，空白血浆、空白血浆加对照品及受试者服药后血浆的色谱图。
2.5.2 标准曲线的制备 取空白血浆0.5 mL置10 mL具塞试管中，依次加入西替利嗪标准系列溶液50 μL，配制相当于血浆药物浓度为25，50，100，250，500，1 000，2 000 ng·mL-1的血浆样品，加入50 μL内标溶液（普罗帕酮21 μg· mL-1的甲醇溶液），按“2.4”项下操作，以血浆中西替利嗪的浓度为横坐标，以西替利嗪与内标的峰面积比为纵坐标，用加权最小二乘法进行回归计算，求得标准曲线方程为：y=0.0021x-0.0109（r=0.9975）；线性范围为25～2 000 ng· mL-1；最低检测浓度为25 ng· mL-1。
2.5.3 回收率试验 取空白血浆0.5 mL，按照“2.5.2”项下操作，分别配制高、中、低3种不同浓度的血浆样品（50、250、1 000 ng· mL-1），按“2.4”项下操作，测定出各样品浓度，与配制的浓度对照，计算相对回收率。结果平均相对回收率为（99.1±4.67）%；3种不同浓度的血浆样品中西替利嗪与相同量的西替利嗪标准溶液的峰面积对照，计算绝对回收率，结果平均绝对回收率为（80.5±3.95）%。
2.5.4 精密度试验 取空白血浆0.5 mL，按照“2.5.2”项下操作，分别配制高、中、低3种不同浓度的质量控制样品 （50、250、1 000 ng· mL-1），按“2.4”项下操作，测定各样品中西替利嗪的浓度，进行日内精密度和日间（3 d）精密度考察。结果测得西替利嗪（高、中、低3种不同浓度）的日内、日间精密度分别为4.94%、4.30%、4.45%和3.78%、8.93%、1.21%（n=6）。
2.6 药动学
2.6.1 血浆药物浓度经时过程 按“血浆样品的处理”项下测定受试者血浆样品，并以当日的标准曲线计算各时刻样品中西替利嗪的浓度。
2.6.2 药动学参数 根据血药浓度的数据，最高血药浓度（Cmax）及达峰时间（Tmax）采用实测值，曲线下面积（AUC0～t）值、半衰期（t1/2）等药代动力学参数采用DAS软件计算。
2.6.3 统计分析结果 将主要的药代动力学参数经对数转换后，采用DAS软件进行方差分析，及单双侧t检验和（1-2α）置信区间法分析，结果显示在两种制剂间不呈显著性差异（P>0.05），受试制剂AUC0～t、AUC0～∞、Cmax的90%置信区间为参比制剂相应参数的91.4%～103.0%、88.7%～103.3%、92.0%～104.8%。表明西替利嗪两种制剂生物等效。对西替利嗪的Tmax采用非参数检验（配对Wilcoxon），结果显示两种制剂间Tmax呈显著性差异。
3 讨论
口腔崩解片是近几年发展起来的一种新剂型，该剂型可在口腔内迅速崩解并分散成细微的无砂砾感的颗粒，使药物通过口腔粘膜及上消化道粘膜吸收，不但有利于吸收，而且减小药物对胃肠道的局部刺激。该剂型在给药时不需用水，为饮水不便、吞咽困难等情况下服药提供了方便。
本试验表明盐酸西替利嗪口腔崩解片与普通剂型的体内动力学性质基本一致，AUC0～t、AUC0～∞、Cmax、t1/2等主要的药代动力学参数与文献报道一致。经方差和单双侧t检验和（1-2α）置信区间法分析，表明盐酸西替利嗪口腔崩解片和普通片剂具有生物等效性。采用非参数检验（配对Wilcoxon），显示两种制剂间Tmax呈显著性差异，口腔崩解片吸收快，达峰时间短。
参考文献：
1、邱枫，肇丽梅，孙亚欣，何晓静，盐酸西替利嗪口腔崩解片和普通片剂的生物等效性研究，论文网，2009
主题词：西替利嗪 生物等效性
中图分类号：O622.4
西替利嗪（cetirizine）是一种长效、强选择性、无中枢抑制作用的H1受体拮抗剂，临床上主要用于治疗季节性过敏性鼻炎和急、慢性荨麻疹等过敏性疾病。有关西替利嗪的片剂、胶囊等普通剂型的体内动力学研究已有报道，但国内仍没有西替利嗪口腔崩解片的体内动力学研究有关报道。本试验对鲁南贝特制药有限公司的盐酸西替利嗪口腔崩解片（受试制剂）与盐酸西替利嗪片（参比制剂）进行单剂量人体生物等效性试验，对两种制剂进行生物等效性评价。
1 仪器与试药
HP1100系列高效液相色谱仪（美国安捷伦科技公司）。西替利嗪对照品（山东新华制药股份有限公司，质量分数99.7%）；普罗帕酮（内标，中国药品生物制品检定所）；乙腈为色谱纯（天津四友生物医学技术有限公司）；磷酸二氢胺为分析纯（沈阳化学试剂一厂）；空白人血浆（中国医科大学附属盛京医院输血科）。
受试制剂：盐酸西替利嗪口腔崩解片由鲁南贝特制药有限公司研制，规格：每片含盐酸西替利嗪10 mg，批号060717。参比制剂：贝分（盐酸西替利嗪片）为鲁南贝特制药有限公司产品，规格：每片含盐酸西替利嗪10 mg，批号050919。
2 方法与结果
2.1 研究对象
选择健康男性志愿者20名，平均年龄（24.4±1.05）岁，平均身高（1.73±0.05） m，平均体质量（67.8±6.33） kg，试验前经体格检查，心电图、肝、肾功能等各项指标均为正常，由本人签署知情同意书，经医学伦理委员会批准。
2.2 给药及样本采集
采用两制剂随机交叉试验设计。20名健康受试者以自身为对照，随机交叉，分别口服受试制剂和参比制剂。服用受试制剂和参比制剂的间隔周期为1周。20名受试者禁食12 h，试验日晨空腹服用受试制剂2片（相当于西替利嗪20 mg）和参比制剂2片（相当于西替利嗪20 mg），将受试制剂（口腔崩解片）置于舌上，无需咀嚼，待崩解无砂砾感后随唾沫咽下，不需用水或只需用少量水送服，参比制剂用200 mL温水送服。服药4 h后进食统一的标准餐。于服药前和服药后的15、30 min和1.0、1.5、2.0、3.0、5.0、7.0、9.0、13.0、24.0、34.0 h，取前臂静脉血4.0 mL，置肝素化试管中，离心10 min，分离血浆于塑料试管中，保存于-20 ℃冰箱中待测。
2.3 色谱条件
Hypersil BDS C18色谱柱（5.0 mm×150 mm，5 μm，大连依利特公司）；流动相为乙腈0.05 mol·L-1磷酸铵缓冲液（体积比37∶70）；流速 1.5 mL·min-1；检测波长231 nm；柱温30 ℃；进样量50 μL。
2.4 血浆样品的处理
取血浆样品0.5 mL置10 mL具塞试管中，加入内标溶液（普罗帕酮21 μg· mL-1的甲醇溶液）50 μL，补加甲醇50 μL后混匀，加入1 mL 枸橼酸缓冲液（1 mol·L-1，pH 6.0），再加入二氯甲烷4 mL后混匀，往复振摇20 min，3.5×103 r·min-1离心10 min。吸取上清液置另一具塞试管内，在50 ℃恒温水浴下氮气吹干，于残渣中加入500 μL甲基叔丁基醚，加入0.25 mol·L-1磷酸溶液300 μL，涡悬混合10 s，3.5×103 r·min-1离心5 min，取下层水相进样50 μL。
2.5 分析方法确证
2.5.1 方法专属性 在“2.3”项色谱条件下，空白血浆、空白血浆加对照品及受试者服药后血浆的色谱图。
2.5.2 标准曲线的制备 取空白血浆0.5 mL置10 mL具塞试管中，依次加入西替利嗪标准系列溶液50 μL，配制相当于血浆药物浓度为25，50，100，250，500，1 000，2 000 ng·mL-1的血浆样品，加入50 μL内标溶液（普罗帕酮21 μg· mL-1的甲醇溶液），按“2.4”项下操作，以血浆中西替利嗪的浓度为横坐标，以西替利嗪与内标的峰面积比为纵坐标，用加权最小二乘法进行回归计算，求得标准曲线方程为：y=0.0021x-0.0109（r=0.9975）；线性范围为25～2 000 ng· mL-1；最低检测浓度为25 ng· mL-1。
2.5.3 回收率试验 取空白血浆0.5 mL，按照“2.5.2”项下操作，分别配制高、中、低3种不同浓度的血浆样品（50、250、1 000 ng· mL-1），按“2.4”项下操作，测定出各样品浓度，与配制的浓度对照，计算相对回收率。结果平均相对回收率为（99.1±4.67）%；3种不同浓度的血浆样品中西替利嗪与相同量的西替利嗪标准溶液的峰面积对照，计算绝对回收率，结果平均绝对回收率为（80.5±3.95）%。
2.5.4 精密度试验 取空白血浆0.5 mL，按照“2.5.2”项下操作，分别配制高、中、低3种不同浓度的质量控制样品 （50、250、1 000 ng· mL-1），按“2.4”项下操作，测定各样品中西替利嗪的浓度，进行日内精密度和日间（3 d）精密度考察。结果测得西替利嗪（高、中、低3种不同浓度）的日内、日间精密度分别为4.94%、4.30%、4.45%和3.78%、8.93%、1.21%（n=6）。
2.6 药动学
2.6.1 血浆药物浓度经时过程 按“血浆样品的处理”项下测定受试者血浆样品，并以当日的标准曲线计算各时刻样品中西替利嗪的浓度。
2.6.2 药动学参数 根据血药浓度的数据，最高血药浓度（Cmax）及达峰时间（Tmax）采用实测值，曲线下面积（AUC0～t）值、半衰期（t1/2）等药代动力学参数采用DAS软件计算。
2.6.3 统计分析结果 将主要的药代动力学参数经对数转换后，采用DAS软件进行方差分析，及单双侧t检验和（1-2α）置信区间法分析，结果显示在两种制剂间不呈显著性差异（P>0.05），受试制剂AUC0～t、AUC0～∞、Cmax的90%置信区间为参比制剂相应参数的91.4%～103.0%、88.7%～103.3%、92.0%～104.8%。表明西替利嗪两种制剂生物等效。对西替利嗪的Tmax采用非参数检验（配对Wilcoxon），结果显示两种制剂间Tmax呈显著性差异。
3 讨论
口腔崩解片是近几年发展起来的一种新剂型，该剂型可在口腔内迅速崩解并分散成细微的无砂砾感的颗粒，使药物通过口腔粘膜及上消化道粘膜吸收，不但有利于吸收，而且减小药物对胃肠道的局部刺激。该剂型在给药时不需用水，为饮水不便、吞咽困难等情况下服药提供了方便。
本试验表明盐酸西替利嗪口腔崩解片与普通剂型的体内动力学性质基本一致，AUC0～t、AUC0～∞、Cmax、t1/2等主要的药代动力学参数与文献报道一致。经方差和单双侧t检验和（1-2α）置信区间法分析，表明盐酸西替利嗪口腔崩解片和普通片剂具有生物等效性。采用非参数检验（配对Wilcoxon），显示两种制剂间Tmax呈显著性差异，口腔崩解片吸收快，达峰时间短。
参考文献：
1、邱枫，肇丽梅，孙亚欣，何晓静，盐酸西替利嗪口腔崩解片和普通片剂的生物等效性研究，论文网，2009