大鼠烫伤创面感染模型的研制

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目的 拟建立稳定的大鼠烫伤创面感染模型,以便于进行相关防治研究.方法 (1)取50只SD大鼠,使用恒温恒压烫伤仪,以底面积4.5 cm2、质量0.5kg的80℃圆柱形烫头垂直接触大鼠脊柱左右两侧皮肤,致伤4、6、8、10、12 s(每种致伤时间10只大鼠,左右侧烫伤时间相同)制作烫伤模型.伤后24 h,观察创面大体情况,记录左侧创面愈合时间,取右侧创面组织行组织学观察,根据结果筛选浅Ⅱ度、深Ⅱ度创面致伤时间.(2)另取36只SD大鼠,按随机数字表法分为浅Ⅱ度组、深Ⅱ度组,每组18只,按照前述方法与选定的致伤时间分别制成浅Ⅱ度、深Ⅱ度烫伤创面.伤后即刻在2组大鼠一侧创面分别接种0.1 mL含1×109、1×107、1×105CFU铜绿假单胞菌标准菌株ATCC 27853的菌液(每种菌量6只大鼠),在另一侧创面涂抹等体积生理盐水作为对照.接种细菌后24 h HE染色观察创面炎症反应情况;接种细菌后1、2、3、5、7、14 d进行革兰染色及生化反应鉴定菌种,检测并计算痂下细菌含量;记录2组大鼠创面愈合时间.对数据行t检验.结果 (1)根据大鼠创面愈合时间及组织学检查结果,筛选出烫伤6 s和8 s分别为浅Ⅱ度和深Ⅱ度创面的致伤时间.(2)浅Ⅱ度组大鼠仅接种1×109CFU细菌的创面有少许炎性细胞浸润;深Ⅱ度组接种1×109、1×107CFU细菌创面均有炎性细胞浸润,前者浸润更明显.(3)创面细菌鉴定结果为铜绿假单胞菌.浅Ⅱ度组创面接种各种菌量后14 d内,痂下细菌含量绝大多数低于1×105CFU/g;深Ⅱ度组创面接种1×109 CFU细菌后14 d内,痂下细菌含量均高于1×105CFU/g并呈持续上升趋势.(4)浅Ⅱ度组接种1×109、1×107、1×105 CFU细菌的创面与生理盐水对照创面愈合时间相近(t值分别为1.26、0.29、1.07,P值均大于0.05);深Ⅱ度组接种1×109CFU细菌创面愈合时间[(22.5±1.0)d]较生理盐水对照创面[(19.4±1.6)d]明显延长(t=2.73,P<0.05).结论 大鼠深Ⅱ度烫伤创面接种1×109 CFU铜绿假单胞菌标准菌株ATCC 27853,可作为感染创面防治研究的实验模型,该模型稳定、重复性较高.
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