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摘 要：目的：研究大鼠急性切割痛是否伴有焦虑样情绪反应，探讨吗啡与加巴喷丁对焦虑样情绪反应的作用。方法：采用纵行切割大鼠后足作为疼痛模型，以高架十字迷宫实验评估大鼠的焦虑样行为，在手术后腹腔注射不同剂量吗啡（2.5、10mg·kg-1），或在手术前0.5h腹腔注射不同剂量加巴喷丁（30、300mg·kg-1），然后在不同时间点（1h、3h、6h、24h、72h），观察大鼠焦虑样行为的变化。结果：1、高架十字迷宫结果显示在术后1h，大鼠在开放臂停留的时间百分比明显低于正常对照组（P﹤0.01），即呈现焦虑样行为，并且这种焦虑样行为在术后72h依然存在。2、术后吗啡10mg·kg-1腹腔注射可明显增加大鼠术后3h、6h时在开放臂的时间百分比（P﹤0.01），术前加巴喷丁300mg·kg-1腹腔注射可明显增加大鼠术后1h、3h时在开放臂的时间百分比（P﹤0.01）。结论：急性切割痛可引起大鼠焦虑样情绪反应，且术后大鼠焦虑样行为持续长时间。大剂量的吗啡及加巴喷丁都可减轻急性切割痛引起的焦虑样情绪反应。
关键词：急性切割痛 焦虑样情绪 吗啡 加巴喷丁
近年来大量的研究显示，在慢性疼痛进展过程中，伴随着厌恶、焦虑等负面情绪；而情绪紊乱反过来可加重慢性疼痛的进程 [1]。但是对于手术后疼痛情绪变化的研究，鲜有报道。因此，本研究将对切割痛是否伴随负面情绪反应，以及吗啡及加巴喷丁药物对情绪反应的作用进行探讨。
1.材料与方法：
1.1 实验动物：实验动物为雄性Sprague-Dawley（SD)大鼠，均由动物实验中心提供，进入实验室的体重为180-220g。
1.2 实验动物模型建立：在1.5%异氟醚麻醉下，将大鼠右后爪消毒，Brennan法[2]从足底近端0.5cm处向趾部作长约1cm的切口，用5-0尼龙细线缝合皮肤共2针，局部涂抹抗生素药膏。整个手术过程约为5分钟。
1.3 实验动物分组：雄性大鼠49只，随机分为7组，每组7只：1）正常对照组：麻醉、消毒、不手术；2）手术未用药组：手术后不用任何药；3）吗啡1组：手术后腹腔注射吗啡 10 mg·kg-1 ；4）吗啡2组：手术后腹腔注射吗啡2.5 mg·kg-1；5)加巴喷丁1组：手术前0.5h腹腔注射加巴喷丁300 mg·kg-1；6)加巴喷丁2组：手术前0.5h腹腔注射加巴喷丁30 mg·kg-1；7)小剂量药物联合应用组：手术前0.5小时腹腔注射加巴喷丁30 mg·kg-1+手术后腹腔注射吗啡2.5 mg·kg-1。研究的时间点为：手术后1h、 3h、6h、24h、72h。
1.4 高架十字迷宫实验：实验装置由两条相对开放臂和两条相对闭合臂及中央区连接而成，距离地面50cm。将大鼠从中央格面向闭合臂放入，记录5分钟内的活动情况。观察指标：开放臂进入次数及停留时间，闭合臂进入次数及停留时间。开放臂进入次数及停留时间与大鼠的焦虑情绪成负相关，进入开放臂次数越少，停留时间越短，说明大鼠的焦虑样情绪越重。
1.5 药物：盐酸吗啡注射液（沈阳第一制药厂），加巴喷丁原料药（徐州恩华），用无菌生理盐水溶解后应用。
1.6 统计学处理：所有的试验结果，均以均数±标准差表示。多组间均数的比较，采用方差分析（ANVOA），采用Levene检验进行方差一致性检验，若方差齐时，用Least-significant difference (LSD)方法，若方差不齐时用Tamhane’T2方法。P﹤0.05，认为差异有显著性；P﹤0.01，认为差异有极显著性。所有的统计分析均采用SPSS11.5软件包完成。
2.结果：
2.1 手术后大鼠开放臂时间百分比变化：高架十字迷宫结果显示在术后1h(4.31±5.58)、3h(1.69±3.18)、6h(1.39±2.47)、24h(2.01±3.14)，手术未给药组大鼠在开放臂停留的时间百分比明显低于正常对照组（12.7±10.8）（P﹤0.01），即呈现焦虑样行为，并且这种焦虑样行为在术后72h(4.53±2.67)依然存在。
2.2 吗啡与加巴喷丁对开放臂时间百分比的变化：1)术后吗啡10mg·kg-1腹腔注射可明显增加大鼠术后3h（18.9±16.71）（P﹤0.01）、6h(14.47±13.12) （P﹤0.05）时在开放臂的时间百分比，术前加巴喷丁300mg·kg-1腹腔注射可明显增加大鼠术后1h（22.03±14.01）、3h（20.44±21.16）时在开放臂的时间百分比（P﹤0.01）。2)小剂量吗啡2.5mg·kg-1与小剂量加巴喷丁30mg·kg-1联合应用并不能增加术后大鼠在开放臂的时间百分比（P>0.05）。
3.讨论：
在疼痛与情绪关系的研究中，大量的研究是针对神经病理性疼痛和炎性疼痛的，Takahiro Suzuki等[3]，通过高十字迷宫试验证实了脊神经结扎的动物疼痛模型在出现疼痛躯体感觉的同时会出现负面情绪反应。本实验中通过经典高架十字迷宫试验，大鼠足底切割后更多地在闭合臂进行停留和探索，在开放臂的时间明显减少，说明急性疼痛伴随了焦虑的情绪反应，且持续时间长。
我们选择两个不同剂量的吗啡在手术后腹腔注射，发现吗啡10mg·kg-1组，逆转了焦虑样情绪反应，而且在手术后3h大鼠停留在开放臂时间百分比大于正常对照组。所以我们可以认为吗啡在止痛的作用中间接的发挥其抗焦虑的作用，其具体机制有待于进一步研究。现在有大量的研究中，加巴喷丁用于手术后疼痛的治疗，被认为可以减轻术后疼痛的痛觉过敏[4]。在本实验中，我们选择了两个剂量的加巴喷丁在大鼠足底切割前0.5h腹腔注射，大剂量的加巴喷丁可逆转大鼠术后的焦虑样情绪反应，并使大鼠在开放臂停留时间百分比明显大于正常对照组。
在本研究中，我们发现吗啡与加巴喷丁都具有抗焦虑的作用，吗啡抗焦虑作用不如加巴喷丁，并通过小剂量药物的观察发现在抗焦虑方面，两种药物没有协同作用。
参考文献：
[1] Price DD. Psychological and neuralmechanisms of the affective dimension of pain. Science, 2000, 288: 176921772.
[2]Brennan TJ, Vandermeulen EP, Gebhart GF. Characterization of a rat model of incisional pain. Pain, 1996; 64(3):493-501.
[3]Suzuki T, Amata M, Sakaue G. Experimental neuropathy in mice is associated with delayed behavioral changes related to anxiety and depression. Anesth Analg ,2007;104:1570 –7.
[4]Hayashida K, Goes SD,Curry R. Gabapentin Activates Spinal Noradrenergic Activity in Rats and Humans and Reduces Hypersensitivity after Surgery.Anesthesiology 2007; 106:557–62.
关键词：急性切割痛 焦虑样情绪 吗啡 加巴喷丁
近年来大量的研究显示，在慢性疼痛进展过程中，伴随着厌恶、焦虑等负面情绪；而情绪紊乱反过来可加重慢性疼痛的进程 [1]。但是对于手术后疼痛情绪变化的研究，鲜有报道。因此，本研究将对切割痛是否伴随负面情绪反应，以及吗啡及加巴喷丁药物对情绪反应的作用进行探讨。
1.材料与方法：
1.1 实验动物：实验动物为雄性Sprague-Dawley（SD)大鼠，均由动物实验中心提供，进入实验室的体重为180-220g。
1.2 实验动物模型建立：在1.5%异氟醚麻醉下，将大鼠右后爪消毒，Brennan法[2]从足底近端0.5cm处向趾部作长约1cm的切口，用5-0尼龙细线缝合皮肤共2针，局部涂抹抗生素药膏。整个手术过程约为5分钟。
1.3 实验动物分组：雄性大鼠49只，随机分为7组，每组7只：1）正常对照组：麻醉、消毒、不手术；2）手术未用药组：手术后不用任何药；3）吗啡1组：手术后腹腔注射吗啡 10 mg·kg-1 ；4）吗啡2组：手术后腹腔注射吗啡2.5 mg·kg-1；5)加巴喷丁1组：手术前0.5h腹腔注射加巴喷丁300 mg·kg-1；6)加巴喷丁2组：手术前0.5h腹腔注射加巴喷丁30 mg·kg-1；7)小剂量药物联合应用组：手术前0.5小时腹腔注射加巴喷丁30 mg·kg-1+手术后腹腔注射吗啡2.5 mg·kg-1。研究的时间点为：手术后1h、 3h、6h、24h、72h。
1.4 高架十字迷宫实验：实验装置由两条相对开放臂和两条相对闭合臂及中央区连接而成，距离地面50cm。将大鼠从中央格面向闭合臂放入，记录5分钟内的活动情况。观察指标：开放臂进入次数及停留时间，闭合臂进入次数及停留时间。开放臂进入次数及停留时间与大鼠的焦虑情绪成负相关，进入开放臂次数越少，停留时间越短，说明大鼠的焦虑样情绪越重。
1.5 药物：盐酸吗啡注射液（沈阳第一制药厂），加巴喷丁原料药（徐州恩华），用无菌生理盐水溶解后应用。
1.6 统计学处理：所有的试验结果，均以均数±标准差表示。多组间均数的比较，采用方差分析（ANVOA），采用Levene检验进行方差一致性检验，若方差齐时，用Least-significant difference (LSD)方法，若方差不齐时用Tamhane’T2方法。P﹤0.05，认为差异有显著性；P﹤0.01，认为差异有极显著性。所有的统计分析均采用SPSS11.5软件包完成。
2.结果：
2.1 手术后大鼠开放臂时间百分比变化：高架十字迷宫结果显示在术后1h(4.31±5.58)、3h(1.69±3.18)、6h(1.39±2.47)、24h(2.01±3.14)，手术未给药组大鼠在开放臂停留的时间百分比明显低于正常对照组（12.7±10.8）（P﹤0.01），即呈现焦虑样行为，并且这种焦虑样行为在术后72h(4.53±2.67)依然存在。
2.2 吗啡与加巴喷丁对开放臂时间百分比的变化：1)术后吗啡10mg·kg-1腹腔注射可明显增加大鼠术后3h（18.9±16.71）（P﹤0.01）、6h(14.47±13.12) （P﹤0.05）时在开放臂的时间百分比，术前加巴喷丁300mg·kg-1腹腔注射可明显增加大鼠术后1h（22.03±14.01）、3h（20.44±21.16）时在开放臂的时间百分比（P﹤0.01）。2)小剂量吗啡2.5mg·kg-1与小剂量加巴喷丁30mg·kg-1联合应用并不能增加术后大鼠在开放臂的时间百分比（P>0.05）。
3.讨论：
在疼痛与情绪关系的研究中，大量的研究是针对神经病理性疼痛和炎性疼痛的，Takahiro Suzuki等[3]，通过高十字迷宫试验证实了脊神经结扎的动物疼痛模型在出现疼痛躯体感觉的同时会出现负面情绪反应。本实验中通过经典高架十字迷宫试验，大鼠足底切割后更多地在闭合臂进行停留和探索，在开放臂的时间明显减少，说明急性疼痛伴随了焦虑的情绪反应，且持续时间长。
我们选择两个不同剂量的吗啡在手术后腹腔注射，发现吗啡10mg·kg-1组，逆转了焦虑样情绪反应，而且在手术后3h大鼠停留在开放臂时间百分比大于正常对照组。所以我们可以认为吗啡在止痛的作用中间接的发挥其抗焦虑的作用，其具体机制有待于进一步研究。现在有大量的研究中，加巴喷丁用于手术后疼痛的治疗，被认为可以减轻术后疼痛的痛觉过敏[4]。在本实验中，我们选择了两个剂量的加巴喷丁在大鼠足底切割前0.5h腹腔注射，大剂量的加巴喷丁可逆转大鼠术后的焦虑样情绪反应，并使大鼠在开放臂停留时间百分比明显大于正常对照组。
在本研究中，我们发现吗啡与加巴喷丁都具有抗焦虑的作用，吗啡抗焦虑作用不如加巴喷丁，并通过小剂量药物的观察发现在抗焦虑方面，两种药物没有协同作用。
参考文献：
[1] Price DD. Psychological and neuralmechanisms of the affective dimension of pain. Science, 2000, 288: 176921772.
[2]Brennan TJ, Vandermeulen EP, Gebhart GF. Characterization of a rat model of incisional pain. Pain, 1996; 64(3):493-501.
[3]Suzuki T, Amata M, Sakaue G. Experimental neuropathy in mice is associated with delayed behavioral changes related to anxiety and depression. Anesth Analg ,2007;104:1570 –7.
[4]Hayashida K, Goes SD,Curry R. Gabapentin Activates Spinal Noradrenergic Activity in Rats and Humans and Reduces Hypersensitivity after Surgery.Anesthesiology 2007; 106:557–62.