【摘 要】
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目的：本研究从病毒富集和核酸提取两方面进行探索,旨在建立一个反转录（RT）PCR技术检测贝类中诺沃克样病毒（NLVs）的方法。方法：利用脊髓灰质炎病毒作为参照毒株,优化了甘氨酸缓冲液-
【机 构】
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中国环境管理干部学院生态学系,河北农业大学农村发展学院
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目的：本研究从病毒富集和核酸提取两方面进行探索,旨在建立一个反转录（RT）PCR技术检测贝类中诺沃克样病毒（NLVs）的方法。方法：利用脊髓灰质炎病毒作为参照毒株,优化了甘氨酸缓冲液-聚乙二醇（PEG）病毒浓缩方法;同时比较了异硫氰酸胍法、SDS-蛋白酶K法、Trizol-异丙醇法、试剂盒法四种RNA提取方法;对市售贝类样品进行了检测,并利用基因测序对阳性样品进行验证。结果：本研究采用的pH9.5甘氨酸缓冲液-16%聚乙二醇病毒浓缩法,病毒的回收率为16.8%,利用Trizol-异丙醇法提取RNA,检出限
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