观察维生素B12(VB12)联合鼠神经生长因子(MNGF)对脑瘫幼鼠智力的改善作用,并探讨其机制。
方法选取14 d日龄Wistar大鼠60只,随机分为5组,即对照组、模型组、VB12组、MNGF组、VB12+MNGF组,各12只。除对照组外均建立脑瘫幼鼠模型。VB12组给予VB12注射液(以无菌生理盐水配置,终浓度为70 mg/100 ml)10 ml/kg腹腔注射,每天1次;MNGF组给予MNGF注射液0.2 ml腹腔注射,每天1次;VB12+MNGF组干预方法与VB12组和MNGF组相同,对照组和模型组均给予等量无菌生理盐水。各组幼鼠均干预21 d,对比各组一般情况变化,Y迷宫实验结果,大脑皮质神经细胞凋亡指数(AI),脑皮质中央前回区组织天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白基因(Bax)mRNA及蛋白表达。
结果对照组大鼠饮食、转圈、行走、日常活动、睡眠、大小便等均正常,且体质量呈正常增长趋势,对照组状态最佳,VB12+MNGF组次之,MNGF组稍差,VB12组更差,模型组最差;各组幼鼠Y迷宫实验正确次数、平均开灯至逃至安全区所用时间、大脑皮质神经细胞AI、脑皮质中央前回区组织Caspase-3、Bcl-2、Bax mRNA及蛋白对比差异均有统计学意义(P<0.05),且每2组间比较差异均有统计学意义(P<0.05),其中对照组正确次数最多,VB12+MNGF组次之,MNGF组稍少,VB12组更少,模型组最少;模型组平均开灯至逃至安全区所用时间最长,VB12组次之,MNGF组稍短,VB12+MNGF组更短,对照组最短;模型组大脑皮质神经细胞AI、脑皮质中央前回区组织Caspase-3、Bax mRNA及蛋白均最高,VB12组均次之,MNGF组均稍低,VB12+MNGF组均更低,对照组均最低;对照组Bcl-2 mRNA及蛋白均最高,VB12+MNGF组均次之,MNGF组均稍低,VB12组均更低,模型组均最低。
结论对脑瘫幼鼠实施VB12联合MNGF干预能够显著改善一般状况和智力,减少大脑皮质神经细胞凋亡,推测很可能是通过下调Caspase-3、Bax mRNA及蛋白、上调Bcl-2 mRNA及蛋白实现的。