论文部分内容阅读
【摘要】目的探讨果味汽水中5种合成色素的高效液相色谱检测方法。方法进行高效液相色谱分离条件的试验，得出最佳色谱条件。结果在选定的分离条件下5种色素在测定范围内线性关系良好，相关系数均大于0.9995；5种色素相对标准偏差均小于2%，回收率在94.2%-99.5%之间。结论方法快速简便、灵敏度较高，克服梯度洗脱时造成的基线漂移，提高定量准确性，适用于果味汽水的测定。
【关键词】高效液相色谱；果味汽水；合成色素
人工合成色素在食品中应用十分广泛，国家对其用量也做了严格规定。其本身无营养价值，但由于其成本低廉，色泽鲜艳，着色力强，性质稳定，配色方便，可以增加食品的感官美和提高人们的食欲，在食品生产加工行业中被广泛应用。研究表明，过量摄入合成色素将会在体内蓄积，对肾脏、肝脏产生一定的伤害。《食品中合成着色剂的测定》GB/T5009.35-2003中推荐了高效液相色谱法、薄层色谱法和示波极谱法。由于第一法具有灵敏度高，混合色素分离好，快速等优点，现已被广泛应用。本文就该法的检测条件加以讨论。
1材料与方法
1.1仪器美国安捷伦1100液相色谱仪，带紫外检测器；微量进样器；真空泵；超声波清洗器；G3垂融漏斗；抽滤器；0.45μm滤膜。
1.2试剂甲醇（色谱醇）；乙酸铵溶液（0.02mol/L）；甲醇-甲酸混合溶液（6+4）；无水乙醇-2%氨水-水混合溶液（7+2+1）；聚酰胺粉（过200目）；乙酸溶液（20%）；柠檬酸溶液（20%）；二级水（电导率<0.10mS/m，25℃）；柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝标准溶液（0.5mg/mL，国家标准物质研究中心）。
1.3分析方法
1.3.1样品处理试样溶液加柠檬酸溶液调pH值到6，加热至60℃，将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入试样溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用60℃pH=4的水洗涤3-5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤，3-5次，再用水洗至中性，用无水乙醇-2%氨水-水混合溶液解吸3-5次，每次5mL，收集解吸液，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL，经0.45μm滤膜过滤，待测。
1.3.2色谱分析条件色谱柱：Hypersil-C184.6×250mm，C18预柱，柱温为40℃，流动相：A为甲醇，B为乙酸铵溶液（0.02mol/L），梯度洗脱，流速：1.0ml/min，进样量10μl，检测波长254nm。
1.3.3测定
1.3.3.2样品测定取10μl样液在同样条件下进行分析，以保留时间定性，根据样品峰面积计算含量。
2.5干扰实验因苯甲酸、山梨酸、糖精钠为水溶液，在此条件下可出峰，为检查其干扰性，于标准中分别加入100μg/mL苯甲酸、山梨酸、糖精钠，按上述色谱条件进行HPLC分析后，发现以上3种物质均无干扰。
3小结
综上所述，本方法灵敏度高，精密度和准确度好，且操作简单，分析速度快，能广泛地应用于各种果味汽水中合成色素的测定，值得推广。
参考文献
[1]GB/T5009.35.食品卫生检验方法理化部分（一）.
[2]刘红梅.高效液相色谱法测定畜禽制品中合成色素.中国卫生检验杂志，2008，18（6）：1097-1098.
[3]李敏，朱杰民，黄湘东，等.高效液相色谱法测定化妆品中苏丹红染料的方法研究.中国卫生检验杂志，2007，17（10）：1735-1736.
[4]邹学贤.高效液相色谱法.分析化学，2006，19：310-324.
【关键词】高效液相色谱；果味汽水；合成色素
人工合成色素在食品中应用十分广泛，国家对其用量也做了严格规定。其本身无营养价值，但由于其成本低廉，色泽鲜艳，着色力强，性质稳定，配色方便，可以增加食品的感官美和提高人们的食欲，在食品生产加工行业中被广泛应用。研究表明，过量摄入合成色素将会在体内蓄积，对肾脏、肝脏产生一定的伤害。《食品中合成着色剂的测定》GB/T5009.35-2003中推荐了高效液相色谱法、薄层色谱法和示波极谱法。由于第一法具有灵敏度高，混合色素分离好，快速等优点，现已被广泛应用。本文就该法的检测条件加以讨论。
1材料与方法
1.1仪器美国安捷伦1100液相色谱仪，带紫外检测器；微量进样器；真空泵；超声波清洗器；G3垂融漏斗；抽滤器；0.45μm滤膜。
1.2试剂甲醇（色谱醇）；乙酸铵溶液（0.02mol/L）；甲醇-甲酸混合溶液（6+4）；无水乙醇-2%氨水-水混合溶液（7+2+1）；聚酰胺粉（过200目）；乙酸溶液（20%）；柠檬酸溶液（20%）；二级水（电导率<0.10mS/m，25℃）；柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、亮蓝标准溶液（0.5mg/mL，国家标准物质研究中心）。
1.3分析方法
1.3.1样品处理试样溶液加柠檬酸溶液调pH值到6，加热至60℃，将1g聚酰胺粉加少许水调成粥状，倒入试样溶液中，搅拌片刻，以G3垂融漏斗抽滤，用60℃pH=4的水洗涤3-5次，然后用甲醇-甲酸混合溶液洗涤，3-5次，再用水洗至中性，用无水乙醇-2%氨水-水混合溶液解吸3-5次，每次5mL，收集解吸液，加乙酸中和，蒸发至近干，加水溶解，定容至5mL，经0.45μm滤膜过滤，待测。
1.3.2色谱分析条件色谱柱：Hypersil-C184.6×250mm，C18预柱，柱温为40℃，流动相：A为甲醇，B为乙酸铵溶液（0.02mol/L），梯度洗脱，流速：1.0ml/min，进样量10μl，检测波长254nm。
1.3.3测定
1.3.3.2样品测定取10μl样液在同样条件下进行分析，以保留时间定性，根据样品峰面积计算含量。
2.5干扰实验因苯甲酸、山梨酸、糖精钠为水溶液，在此条件下可出峰，为检查其干扰性，于标准中分别加入100μg/mL苯甲酸、山梨酸、糖精钠，按上述色谱条件进行HPLC分析后，发现以上3种物质均无干扰。
3小结
综上所述，本方法灵敏度高，精密度和准确度好，且操作简单，分析速度快，能广泛地应用于各种果味汽水中合成色素的测定，值得推广。
参考文献
[1]GB/T5009.35.食品卫生检验方法理化部分（一）.
[2]刘红梅.高效液相色谱法测定畜禽制品中合成色素.中国卫生检验杂志，2008，18（6）：1097-1098.
[3]李敏，朱杰民，黄湘东，等.高效液相色谱法测定化妆品中苏丹红染料的方法研究.中国卫生检验杂志，2007，17（10）：1735-1736.
[4]邹学贤.高效液相色谱法.分析化学，2006，19：310-324.