双单抗夹心ELISA方法检测EPF活性

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目的建立双单抗夹心酶联免疫吸附试验法用于测定早孕因子(EPF).方法筛选可稳定分泌抗EPF单克隆抗体的细胞株,制备腹水型单抗(McAb)并分离纯化,用改良碘化钠法进行辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗,分析McAb的结合位点,通过抗体配对试验选择合适的捕获和检测McAb,建立双McAb-ELISA检测方法.结果筛选出二株稳定分泌抗EPF抗体的单克隆细胞株;两株单抗识别不同的抗原表位;双McAb夹心ELISA法测EPF活性灵敏度可达0.01 ug/ml,线性测定范围在0.01~10 ug/ml,2份同批血清标
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