【摘 要】
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利用多重PCR建立转基因棉花中棉41外源基因的检测体系。多重PCR技术的关键在于多重PCR反应条件的优化,本文从多重引物组合、PCR反应体系、PCR反应条件这三个方面对转基因棉花
【机 构】
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浙江理工大学生物工程研究所,南京工业大学大丰海洋产业研究院,南京工业大学生物与制药工程学院
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利用多重PCR建立转基因棉花中棉41外源基因的检测体系。多重PCR技术的关键在于多重PCR反应条件的优化,本文从多重引物组合、PCR反应体系、PCR反应条件这三个方面对转基因棉花多重PCR反应进行优化,建立了扩增效率较高的中棉41的六重PCR反应体系,优化后的体系为HotstarTaq DNA聚合酶用量为1.25 U/50μL,镁离子的终浓度为3.5 mM,dNTP的终浓度为400μM,BSA（10mg/mL）的加入量为2μL,选取58℃为反应扩增的退火温度。利用优化的多重PCR体系特异性地检测到转基因棉
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