本研究基于网络药理学和蛋白组学技术探究地龙抗血栓的物质基础及作用机制。首先通过网络药理学方法对地龙小分子活性成分进行研究，基于文献检索收集地龙化学成分101个，包括核苷酸、有机酸、氨基酸及寡肽、脂类及其他，构建成分数据库，预测成分作用靶标共798个；以课题组前期已验证的地龙抗血栓靶点（纤维蛋白原、纤维蛋白、纤溶酶原）为基础，通过BioGRID数据库挖掘与其具直接作用的靶点1 046个，为潜在抗血栓靶点库，二者共有靶点81个；根据核心靶点蛋白互作网络及成分-靶点-通路网络分析，发现脂类、氨基酸和寡肽类成分为主要抗血栓成分，纤连蛋白、纤溶酶原、促分裂原活化蛋白激酶-14、基质金属蛋白酶-9、表皮生长因子受体、凝血酶原、纤维蛋白原等为地龙抗血栓核心靶点，通过调控黏着斑、白细胞跨内膜转移、补体与凝血、细胞周期及坏死性凋亡等发挥作用。继而采用TMT同位素标记法进行定量蛋白组学研究，以斑马鱼为模式生物，以课题组前期分离纯化地龙抗血栓活性蛋白DPf3为研究对象，预测地龙大分子活性成分抗血栓的作用机制，其潜在调控通路包括结氨基酸代谢、紧密连接、坏死性凋亡、吞噬、甘油磷酸代谢等。反映了地龙多成分、多靶点、多功效的特性，为其临床使用提供依据，为其抗血栓机制的进一步验证提供方向，并为采用现代药理学技术研究中药动物药提供参考。