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摘要：目的：探讨人体血清中梅毒螺旋体抗体检测及临床意义。方法：收集临床上100例梅毒患者用酶联免疫法进行血清标本检测。结果：用酶联免疫法检测梅毒螺旋体抗体具有灵敏度高、特异性好。结论：酶联免疫法检测人血清中梅毒螺旋体抗体。适用于血液的筛查及临床梅毒螺旋体抗感染的辅助诊断。
关键词：梅毒；酶联免疫法；临床意义
Abstract： Objective： To study the detection of human serum Treponema pallidum antibody and its clinical significance. Methods： 100 clinical cases of syphilis patients with enzyme linked immunosorbent assay for serum samples. Results： the detection of Treponema pallidum antibody has the advantages of high sensitivity， good specificity by enzyme linked immunosorbent assay. Conclusion： the detection of human body antibody enzyme linked immunosorbent assay in the serum of syphilis. Auxiliary diagnostic screening for blood and clinical anti infection of Treponema pallidum.
Key words： Syphilis； ELISA； Clinical significance
【中图分类号】R446.11 【文献标识码】B 【文章编号】1672-8602（2014）01-0201-01
梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病。可分为后天性梅毒和先天性梅毒。前者主要通过性接触感染，后者从母体通过胎盘传给胎儿，偶然可经输血感染。其主要通过性途径传播，在我国的传播出现上升趋势。当今实验室诊断梅毒常用酶联免疫法。酶联免疫法（ELISA）是将抗原（或抗体）吸附在聚苯乙烯反应板上后，加入酶标抗体（或酶标抗原）与相应抗原（或抗体）特异结合，使酶也结合到载体上，洗去游离酶标抗体（或酶标抗原），加入底物显色，根据颜色有无和深浅进行定性或定量分析。现结合临床报告分析如下。
1临床资料
1.1一般资料：收集临床上本组100例感染梅毒患者，其中男性64例，女性36例。
1.2方法
1.2.1检验原理：采用双抗原夹心法酶联免疫吸附试验原理。用已知的梅毒螺旋体抗体的基因重组抗原，配以酶标记抗原及TMB显色剂等其他试剂，检测人血清中的梅毒螺旋体抗体。
1.2.2检验试剂：重组抗原ELISA（双抗原夹心）试剂盒。阴、阳性对照试剂，酶标试剂，浓缩洗涤液，显色剂A、B液，终止液。
1.2.3检验方法：（1）配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释。（2）编号：将待测血清编号后，相应加入微孔板中，每板应设阴性对照3孔，阳性对照2孔和空白对照1孔。（3）加样：分别在相应孔中加入待测血清和阴、阳性对照100μl。（4）温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。（5）洗板：小心揭掉封板膜，洗板5遍，最后一次扣干。（6）加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。（7）温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育30±1分钟。（8）洗板：小心揭掉封板膜，洗板5遍，最后一次扣干。（9）显色：每孔加入显色剂A、B液各50μl，轻轻振荡混匀，37±1℃避光显色30±1分钟。（10）测定：每孔加终止液50μl，轻轻振荡混匀，10分钟内测定结果。设定酶标仪波长于450nm处，用空白孔调零点后测定各孔值。
2结果
参考值：临界值=阴性对照孔均值±0.18。（1）阴性对照孔值≤0.10，阳性对照孔值≥0.80。否则实验无效。（2）若有1孔阴性对照值大于0.1应舍弃，若两孔或两孔以上阴性对照值大于0.1，应重复实验。（3）阴性判定：测定的值<临界值为阴性。（4）阳性判定：测定的值>临界值为阳性。
3讨论
梅毒螺旋体（TP）属于密螺旋体属苍白螺旋体的苍白亚种，是引起人类梅毒的病原体。梅毒是性传播疾病，是一种严重危害人类健康的传播疾病。检测梅毒螺旋体抗体的临床意义：梅毒螺旋体有很强的侵袭力，但未发现内毒素和外毒素，其致病主要通过荚膜样物质、外膜蛋白、透明质酸酶等物质的作用。有毒株尚能以宿主细胞的纤维粘连蛋白覆盖于其表面，以保护菌体勿受宿主吞噬细胞的攻击。梅毒中出现的组织破坏和病灶，主要是该螺旋体感染患者后的免疫损伤所致。梅毒螺旋体引起梅毒。人是梅毒的唯一传染源。临床上可表现为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒和先天梅毒（胎传梅毒）等。①一期梅毒。感染后三周左右局部出现无痛性硬下疳。多见外生殖器，主要症状为外阴部出现暗红色丘疹，其后丘疹表面糜烂，形成溃疡。一般硬下疳不经治疗4～8周后，症状消失，但并不意味着梅毒已经痊愈，而是经过一段时间后进入二期梅毒。②二期梅毒。发生于硬下疳出现后2～8周。此时梅毒螺旋体通过血液扩撒到尽乎全身，出现全身性梅毒疹。主要发生在皮肤黏膜上，也可伴发皮肤附件损害。初次出现梅毒疹经过一段时间后会自行消退，但隐伏一定时间后重新又出现新的皮疹。一、二期传染性强，但破坏性较小。③三期梅毒。又称为晚期梅毒。多是早期梅毒未经治疗或治疗不彻底发展而成的。发生于感染2年后，也可长达10～15年。病变可波及全身组织和器官，严重者可危及生命。三期也常出现进展和消退交替进行。病损部位螺旋体少但是破坏性大。
为更好的治疗和预防梅毒。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）将梅毒基因重组抗原包被在微孔测定板上，结合ELISA双抗原夹心法，使重组抗原ELISA双抗原夹心法具有敏感性高、特异性好等优点，是一种集筛查和确诊为一体的检测梅毒的好方法，是目前梅毒诊断和治疗监测的主要指标之一。
参考文献
[1]王兰兰. 临床免疫学与检验.第4版.北京：人民卫生出版社，2011，103-106.
[2]杨文林，杨健，刘丹莹，等.早期梅毒治疗前后血清学分析[J].临床皮肤科杂志，1998，27（5）：314.
关键词：梅毒；酶联免疫法；临床意义
Abstract： Objective： To study the detection of human serum Treponema pallidum antibody and its clinical significance. Methods： 100 clinical cases of syphilis patients with enzyme linked immunosorbent assay for serum samples. Results： the detection of Treponema pallidum antibody has the advantages of high sensitivity， good specificity by enzyme linked immunosorbent assay. Conclusion： the detection of human body antibody enzyme linked immunosorbent assay in the serum of syphilis. Auxiliary diagnostic screening for blood and clinical anti infection of Treponema pallidum.
Key words： Syphilis； ELISA； Clinical significance
【中图分类号】R446.11 【文献标识码】B 【文章编号】1672-8602（2014）01-0201-01
梅毒是由梅毒螺旋体引起的慢性、系统性性传播疾病。可分为后天性梅毒和先天性梅毒。前者主要通过性接触感染，后者从母体通过胎盘传给胎儿，偶然可经输血感染。其主要通过性途径传播，在我国的传播出现上升趋势。当今实验室诊断梅毒常用酶联免疫法。酶联免疫法（ELISA）是将抗原（或抗体）吸附在聚苯乙烯反应板上后，加入酶标抗体（或酶标抗原）与相应抗原（或抗体）特异结合，使酶也结合到载体上，洗去游离酶标抗体（或酶标抗原），加入底物显色，根据颜色有无和深浅进行定性或定量分析。现结合临床报告分析如下。
1临床资料
1.1一般资料：收集临床上本组100例感染梅毒患者，其中男性64例，女性36例。
1.2方法
1.2.1检验原理：采用双抗原夹心法酶联免疫吸附试验原理。用已知的梅毒螺旋体抗体的基因重组抗原，配以酶标记抗原及TMB显色剂等其他试剂，检测人血清中的梅毒螺旋体抗体。
1.2.2检验试剂：重组抗原ELISA（双抗原夹心）试剂盒。阴、阳性对照试剂，酶标试剂，浓缩洗涤液，显色剂A、B液，终止液。
1.2.3检验方法：（1）配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释。（2）编号：将待测血清编号后，相应加入微孔板中，每板应设阴性对照3孔，阳性对照2孔和空白对照1孔。（3）加样：分别在相应孔中加入待测血清和阴、阳性对照100μl。（4）温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。（5）洗板：小心揭掉封板膜，洗板5遍，最后一次扣干。（6）加酶：每孔加入酶标试剂100μl，空白孔除外。（7）温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育30±1分钟。（8）洗板：小心揭掉封板膜，洗板5遍，最后一次扣干。（9）显色：每孔加入显色剂A、B液各50μl，轻轻振荡混匀，37±1℃避光显色30±1分钟。（10）测定：每孔加终止液50μl，轻轻振荡混匀，10分钟内测定结果。设定酶标仪波长于450nm处，用空白孔调零点后测定各孔值。
2结果
参考值：临界值=阴性对照孔均值±0.18。（1）阴性对照孔值≤0.10，阳性对照孔值≥0.80。否则实验无效。（2）若有1孔阴性对照值大于0.1应舍弃，若两孔或两孔以上阴性对照值大于0.1，应重复实验。（3）阴性判定：测定的值<临界值为阴性。（4）阳性判定：测定的值>临界值为阳性。
3讨论
梅毒螺旋体（TP）属于密螺旋体属苍白螺旋体的苍白亚种，是引起人类梅毒的病原体。梅毒是性传播疾病，是一种严重危害人类健康的传播疾病。检测梅毒螺旋体抗体的临床意义：梅毒螺旋体有很强的侵袭力，但未发现内毒素和外毒素，其致病主要通过荚膜样物质、外膜蛋白、透明质酸酶等物质的作用。有毒株尚能以宿主细胞的纤维粘连蛋白覆盖于其表面，以保护菌体勿受宿主吞噬细胞的攻击。梅毒中出现的组织破坏和病灶，主要是该螺旋体感染患者后的免疫损伤所致。梅毒螺旋体引起梅毒。人是梅毒的唯一传染源。临床上可表现为一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潜伏梅毒和先天梅毒（胎传梅毒）等。①一期梅毒。感染后三周左右局部出现无痛性硬下疳。多见外生殖器，主要症状为外阴部出现暗红色丘疹，其后丘疹表面糜烂，形成溃疡。一般硬下疳不经治疗4～8周后，症状消失，但并不意味着梅毒已经痊愈，而是经过一段时间后进入二期梅毒。②二期梅毒。发生于硬下疳出现后2～8周。此时梅毒螺旋体通过血液扩撒到尽乎全身，出现全身性梅毒疹。主要发生在皮肤黏膜上，也可伴发皮肤附件损害。初次出现梅毒疹经过一段时间后会自行消退，但隐伏一定时间后重新又出现新的皮疹。一、二期传染性强，但破坏性较小。③三期梅毒。又称为晚期梅毒。多是早期梅毒未经治疗或治疗不彻底发展而成的。发生于感染2年后，也可长达10～15年。病变可波及全身组织和器官，严重者可危及生命。三期也常出现进展和消退交替进行。病损部位螺旋体少但是破坏性大。
为更好的治疗和预防梅毒。采用酶联免疫吸附试验（ELISA）将梅毒基因重组抗原包被在微孔测定板上，结合ELISA双抗原夹心法，使重组抗原ELISA双抗原夹心法具有敏感性高、特异性好等优点，是一种集筛查和确诊为一体的检测梅毒的好方法，是目前梅毒诊断和治疗监测的主要指标之一。
参考文献
[1]王兰兰. 临床免疫学与检验.第4版.北京：人民卫生出版社，2011，103-106.
[2]杨文林，杨健，刘丹莹，等.早期梅毒治疗前后血清学分析[J].临床皮肤科杂志，1998，27（5）：314.