【摘 要】
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摘要:以木聚糖为唯一碳源,从长期堆放枯枝败叶的土壤中筛选能够高效降解木聚糖的菌株,并对该菌的产酶条件和酶学性质进行研究。分离得到1株酶活性较高且产酶相对稳定的菌株,鉴定为尖孢镰刀菌,命名为Fusarium oxysporum MJ23。研究表明,木聚糖、酵母粉是该菌的最适培养底物,在最适培养条件下,该菌株所产木聚糖酶活力可达186 U/mL;木聚糖酶的最适作用温度、pH值分别为55 ℃、6,55
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摘要:以木聚糖为唯一碳源,从长期堆放枯枝败叶的土壤中筛选能够高效降解木聚糖的菌株,并对该菌的产酶条件和酶学性质进行研究。分离得到1株酶活性较高且产酶相对稳定的菌株,鉴定为尖孢镰刀菌,命名为Fusarium oxysporum MJ23。研究表明,木聚糖、酵母粉是该菌的最适培养底物,在最适培养条件下,该菌株所产木聚糖酶活力可达186 U/mL;木聚糖酶的最适作用温度、pH值分别为55 ℃、6,55 ℃保温3 h,EDTA、尿素和SDS则会抑制酶活,其中SDS的抑制作用最强。模拟动物体内对饲料中半纤维素组分的消化,木聚糖酶的添加可使猪饲料中木糖生成量提高28%,鸡饲料中木糖生成量提高16%,表明该菌株所产木聚糖酶具有用作饲料添加剂的可能性。
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1.4.4木聚糖酶的发酵培养及酶活力的测定从固体培养基上挑取直径0.6 cm的菌苔加入装有50 mL发酵液体的培养瓶中,于37 ℃、170 r/min的恒温摇床中培养72 h;再将发酵液于4 000 r/min离心5 min,所得上清即为粗酶液。木聚糖酶酶活力的测定参照GB/T 23874—2009《饲料添加剂木聚糖酶活力的测定分光光度法》[6],酶活力单位定义为1 min释放 1 μmol 还原糖(以木糖计)所需要的酶量。
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2.3.2木聚糖酶最适反应pH值pH值是影响木聚糖酶活力的重要因素,过高或过低的pH值均会改变木聚糖酶蛋白的构象,使酶活力降低,甚至会导致木聚糖酶变性失活。生物来源不同的木聚糖酶所能耐受的pH值范围一般不同[13],真菌来源的木聚糖酶多在酸性条件下具有最大活力,最适pH值范围一般为4.0~6.0[14]。由图6木聚糖酶的最适反应pH值试验结果看出:pH值=6时,该酶活力最高,并且在pH值
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[4]Cubero O F,Crespo A,Fatehi J,et al. DNA extraction and PCR amplification method suitable for fresh,herbarium-stored,lichenized,and other fungi[J]. Plant Systematics and Evolution,1999,216(3/4):243-249.
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