春兰ISSR-PCR反应体系的优化

来源 :华中农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:rfy68213919
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以春兰为材料,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如模板DNA、dNTPs、MgCl2、primer、Taq DNA聚合酶的浓度及引物退火温度、反应循环数进行了探讨,确立了适合春兰ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数:在15μL反应体系中含1×buffer,O.2mmol/L dNTPs,2.0mmol/LMgCl2,0.2μmoll/L引物,0.3UTaq DNA聚合酶,20ng模板DNA。PCR扩增程序:94℃预变性2.5min ;94℃变性45S,48-58℃退火(退火温度随
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