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1.1动物实验目的:通过动物实验,建立反复呼吸道感染肺脾气虚型大鼠的动物实验模型,经分组治疗后,观测肺、肠淋巴细胞归巢计数以及肺、肠淋巴组织ICAM-1、VCAM-1的相对表达量,探究参苓白术散对反复呼吸道感染肺脾气虚型大鼠相关黏膜免疫的作用机理。方法:随机分配30只实验大鼠,分为正常对照组、模型组、西药组、中低组(中低组)、中中组(中中组)、中药高剂量组(中高组),通过对大鼠进行细菌脂多糖滴鼻、肺炎链球菌滴鼻、大黄法、游泳力竭法、烟熏法、饥饿法来复制大鼠反复呼吸道感染肺脾气虚模型,造模成功后,分别给药,正常对照组和模型组对应给予7.5ml·kg-1·d-1的生理盐水,西药组给予7.5ml·kg-1·d-1转移因子口服溶液,中低组、中中组、中高组分别给予相对应浓度的7.5ml·kg-1·d-1参苓白术散颗粒剂,连续7天。疗程结束后,处死大鼠,采用流式细胞术检测大鼠肺、肠淋巴细胞归巢计数;采用PT-PCR对大鼠肺、肠淋巴组织ICAM-1、VCAM-1的相对表达量进行检测。结果:(1)对比模型组与正常对照组,模型组的肺淋巴细胞归巢计数、肠淋巴细胞归巢计数较正常对照组的数量显著减少,模型组的肺、肠淋巴组织ICAM-1、VCAM-1的相对表达量均较正常对照组减少(P<0.05),证明经造模后,大鼠的免疫水平下调,造模成功。(2)肺、肠淋巴归巢计数:肺淋巴细胞归巢计数西药组数量显著少于模型组(P<0.01),中低组与中中组两组的淋巴归巢计数没有差异(P>0.05)且均高于正常对照组的计数(P<0.05),而中高组的淋巴归巢计数高于其他五组(P<0.05)。肠淋巴细胞归巢计数中低组与中中组的数量没有差异(P>0.05)都高于正常对照组(P<0.05),西药组的淋巴归巢计数高于中低组和中中组这两组的计数(P<0.05),中高组的淋巴归巢计数高于西药组的计数(P<0.05)。(3)肺、肠淋巴组织ICAM-1的相对表达量:西药组的肺淋巴组织ICAM-1的相对表达量少于模型组的相对表达量(P<0.01),中低组的肺淋巴组织ICAM-1的相对表达量与中中组的相对表达量没有差异(P>0.05)且都高于正常对照组(P<0.05),中高组的肺淋巴组织ICAM-1的相对表达量高于其他五组的相对表达量(P<0.05)。中低组的肠淋巴组织ICAM-1的相对表达量与中中组的相对表达量没有差异(P>0.05)且均高于正常对照组(P<0.01),西药组的肺淋巴组织ICAM-1的相对表达量高于中低组与中中组的相对表达量(P<0.05),中高组的肺淋巴组织ICAM-1的相对表达量高于西药组(P<0.05)。(4)肺、肠淋巴组织VCAM-1的相对表达量:西药组的肺淋巴组织VCAM-1的相对表达量少于模型组的相对表达量(P<0.05),中低组的肺淋巴组织VCAM-1的相对表达量与中中组的相对表达量没有差异(P>0.05)且均高于正常对照组的相对表达量(P<0.05),中高组的肺淋巴组织VCAM-1的相对表达量高于其他五组的相对表达量(P<0.01)。中低组的肠淋巴组织VCAM-1的相对表达量与中中组的相对表达量没有差异(P>0.05)且均高于正常对照组的相对表达量(P<0.01),西药组的肠淋巴组织VCAM-1的相对表达量高于中低组与中中组的相对表达量(P<0.01),中高组的肠淋巴组织VCAM-1的相对表达量高于西药组的相对表达量(P<0.05)。结论:参苓白术散可以促进呼吸道黏膜免疫和肠道黏膜免疫,通过增加黏膜内皮细胞上的ICAM-1、VCAM-1的表达,从而上调淋巴细胞归巢,增强免疫。1.2临床实验目的:临床观察反复呼吸感染肺脾气虚型患儿治疗前后总有效率,临床症状积分,血清炎性因子IL-2和IL-4水平,分析参苓白术散的疗效以及探寻作用机制。方法:临床筛选符合纳排标准的40例患儿,利用随机分配法,分为西药组和中药组两组,西药组予以转移因子口服溶液,中药组予以参苓白术散治疗,30天为1疗程,一共服药2个疗程。完成治疗周期后,运用中医症候积分量表计算治疗前后的积分,总有效率,进行疗效比较,同时比较IL-2和IL-4水平。结果:(1)对比治疗前两组患儿的年岁,性别,中医症候积分以及血清中IL-2和IL-4水平均无差异(P>0.05),表示可以进行对比。(2)治疗后,对比两组患儿总有效率情况,西药组为55%,中药组为80%,参苓白术散组和转移因子口服液组对比无统计学差异(P>0.05)。(3)中医症候积分进行比较,疗前疗后参苓白术散组和转移因子口服液组的中医症候积分存在差异(P<0.01),但疗后对比两组无差异(P>0.05)。(4)比较治疗前后患儿血清中IL-2的水平和IL-4水平,参苓白术散组和转移因子口服液组均有差异(P<0.01),治疗后两组对比无差异(P>0.05)。结论:参苓白术散可以纠正反复呼吸道感染儿童机体中Th1细胞和Th2细胞的免疫偏倚,而促进免疫平衡的重建。