论文部分内容阅读
目的:从血清及胸腺相关细胞因子水平失衡特点探讨EAMG大鼠发病的免疫机制并观察益气解毒复方干预作用,为益气解毒复方治疗MG提供理论及实验依据。
方法:从100只Lewis大鼠中随机选取10只为正常组,其余采用对Lewis大鼠皮下注射鼠源性AchR-α亚基97~116肽段建立EAMG大鼠模型,经评估造模成功的大鼠随机分为益气解毒高、中、低剂量组、泼尼松组、模型组,连续灌胃给药30天。采用ELISA法检测EAMG大鼠血清中AchR-Ab、IFN-γ、TNF-α、IL4、IL17、IL21、TGF-β1、IL35水平,免疫组化法检测益气解毒复方对EAMG大鼠胸腺中IFN-γ、IL17、IL21、CXCL13蛋白表达的影响。
结果:1.皮下注射R97-116复制EAMG大鼠模型的方法有效,总造模成功率54.4%。
2.与模型组相比,益气解毒复方各剂量组和泼尼松组Lennon评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。
3.与正常组比较,模型组大鼠血清AchR-Ab、IFN-γ、TNF-α、IL4、IL17、IL21水平均明显增高(P<0.01),而TGF-β1、IL35水平均明显降低(P<0.01);与模型组比较,泼尼松组、益气解毒复方各剂量组大鼠血清中AchR-Ab、IFN-γ、TNF-α、IL4、IL17、IL21水平均明显下降(P<0.01或P<0.05),而TGF-β1、IL35水平均明显升高(P<0.01)。
4.与正常组比较,模型组大鼠胸腺细胞IFN-γ、IL17、IL21、CXCL13蛋白阳性表达均显著增高(P<0.01);与模型组比较,泼尼松组、益气解毒复方各剂量组EAMG大鼠胸腺细胞中IFN-γ、IL17、IL21、CXCL13蛋白阳性表达显著下降(P<0.01)。
结论:1.益气解毒复方对EAMG有较好治疗作用。
2.EAMG大鼠血清中Th1细胞因子(IFN-γ、TNF-α)、Th2细胞因子(IL4)、Th17细胞因子(IL17、IL21)升高,Th3细胞因子(TGF-β1)、Treg细胞因子(IL35)降低,提示EAMG大鼠存在血清Th1/Th2/Th3/Th17/Treg细胞因子水平失衡的变化,益气解毒复方降低IFN-γ、TNF-α、IL4、IL17、IL21表达,升高TGF-β1、IL35表达水平,提示本方有纠正EAMG血清Th1/Th2/Th3/Th17/Treg细胞因子水平失衡作用,这可能是其治疗EAMG的机制之一。
3.EAMG大鼠胸腺组织中IFN-γ、IL17、IL21以及CXCL13表达水平升高,提示EAMG存在胸腺异常免疫反应,益气解毒复方降低EAMG胸腺组织中IFN-γ、IL17、IL21以及CXCL13表达水平,说明本方具有纠正胸腺异常免疫反应作用,这可能是其治疗EAMG大鼠的又一重要机制。
方法:从100只Lewis大鼠中随机选取10只为正常组,其余采用对Lewis大鼠皮下注射鼠源性AchR-α亚基97~116肽段建立EAMG大鼠模型,经评估造模成功的大鼠随机分为益气解毒高、中、低剂量组、泼尼松组、模型组,连续灌胃给药30天。采用ELISA法检测EAMG大鼠血清中AchR-Ab、IFN-γ、TNF-α、IL4、IL17、IL21、TGF-β1、IL35水平,免疫组化法检测益气解毒复方对EAMG大鼠胸腺中IFN-γ、IL17、IL21、CXCL13蛋白表达的影响。
结果:1.皮下注射R97-116复制EAMG大鼠模型的方法有效,总造模成功率54.4%。
2.与模型组相比,益气解毒复方各剂量组和泼尼松组Lennon评分显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。
3.与正常组比较,模型组大鼠血清AchR-Ab、IFN-γ、TNF-α、IL4、IL17、IL21水平均明显增高(P<0.01),而TGF-β1、IL35水平均明显降低(P<0.01);与模型组比较,泼尼松组、益气解毒复方各剂量组大鼠血清中AchR-Ab、IFN-γ、TNF-α、IL4、IL17、IL21水平均明显下降(P<0.01或P<0.05),而TGF-β1、IL35水平均明显升高(P<0.01)。
4.与正常组比较,模型组大鼠胸腺细胞IFN-γ、IL17、IL21、CXCL13蛋白阳性表达均显著增高(P<0.01);与模型组比较,泼尼松组、益气解毒复方各剂量组EAMG大鼠胸腺细胞中IFN-γ、IL17、IL21、CXCL13蛋白阳性表达显著下降(P<0.01)。
结论:1.益气解毒复方对EAMG有较好治疗作用。
2.EAMG大鼠血清中Th1细胞因子(IFN-γ、TNF-α)、Th2细胞因子(IL4)、Th17细胞因子(IL17、IL21)升高,Th3细胞因子(TGF-β1)、Treg细胞因子(IL35)降低,提示EAMG大鼠存在血清Th1/Th2/Th3/Th17/Treg细胞因子水平失衡的变化,益气解毒复方降低IFN-γ、TNF-α、IL4、IL17、IL21表达,升高TGF-β1、IL35表达水平,提示本方有纠正EAMG血清Th1/Th2/Th3/Th17/Treg细胞因子水平失衡作用,这可能是其治疗EAMG的机制之一。
3.EAMG大鼠胸腺组织中IFN-γ、IL17、IL21以及CXCL13表达水平升高,提示EAMG存在胸腺异常免疫反应,益气解毒复方降低EAMG胸腺组织中IFN-γ、IL17、IL21以及CXCL13表达水平,说明本方具有纠正胸腺异常免疫反应作用,这可能是其治疗EAMG大鼠的又一重要机制。