【摘 要】
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随着人们生活水平的提高,高脂肪和高热量的食物越来越受到消费者的喜爱,高纤维和高维生素的食物逐渐被替代,导致患心血管疾病的人数越来越多,其最主要是因为血脂代谢异常,导致胆固醇形成堆积,同时造成肥胖、高血脂等疾病,这些疾病不仅会危害自身的健康,也会影响其子代的身体健康。本实验致力于分离筛选出一株有益身体健康的乳酸菌,研究其体内降脂效果,推动其产业化发展,生产出一款能够降低血清胆固醇水平、改善血脂和肥胖
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随着人们生活水平的提高,高脂肪和高热量的食物越来越受到消费者的喜爱,高纤维和高维生素的食物逐渐被替代,导致患心血管疾病的人数越来越多,其最主要是因为血脂代谢异常,导致胆固醇形成堆积,同时造成肥胖、高血脂等疾病,这些疾病不仅会危害自身的健康,也会影响其子代的身体健康。本实验致力于分离筛选出一株有益身体健康的乳酸菌,研究其体内降脂效果,推动其产业化发展,生产出一款能够降低血清胆固醇水平、改善血脂和肥胖体质的益生菌产品,降低患心血管疾病的风险。本文从18-22周岁健康未婚女运动员阴道和10-11周岁健康儿童粪便取样,使用MRS基础培养基对样品里的菌株进行活化纯化培养,分离出八株革兰氏阳性菌,对这八株菌进行生理生化反应鉴定,初步筛选出A3、ETK2、ETD5、ET12（均为菌株编号）四株乳酸菌。对这四株乳酸菌进行人工胃液耐受实验,结果显示:在p H 2.0环境下,A3菌株的存活率为71.25%,在p H 2.5环境下,A3菌株的存活率为83.12%,其他三株菌在酸性条件下的存活率均明显低于A3菌株。人工肠液耐受实验结果显示:在0.15%牛胆酸钠的条件下,A3菌株的存活率为66.31%,在0.30%牛胆酸钠的条件下,A3菌株的存活率为51.17%,其他三株菌在含有胆盐的条件下的存活率均明显低于A3菌株。抑菌实验结果显示:A3菌株的代谢产物对致病菌的生长有明显的抑制作用,其产生的抑菌圈直径均超过20.0 mm,其余三株菌产生的抑菌圈直径均小于A3菌株。模拟肠黏膜黏附性实验,结果显示:Caco-2细胞上黏附的A3菌株数量最多为18.5±1.6个/细胞,其余三株菌黏附Caco-2细胞的能力均差于A3菌株。胆盐水解酶活性实验,结果显示只有A3菌株的上清液在滤纸上产生明显的白色沉淀,说明其具有胆盐水解酶活性,具有降低胆固醇含量的潜力。根据A3菌株的16SrDNA测序比对分析,最终确定A3菌株为植物乳杆菌,命名其为LP-A3。利用单因素及正交实验对LP-A3进行优化培养实验,最终得出最佳培养条件为:接种量2.00%,p H 6.0,培养48 h,其活菌数达到1.1x1010 cfu/m L。动物实验将雌性SD大鼠分为模型组,对照组和益生菌组,益生菌组大鼠根据3.0 m L/100.0 g的灌胃量给其灌服LP-A3菌液（1.0x10~7 cfu/m L）并使其受孕生子,喂养至56 d时益生菌组母鼠的体重比模型组母鼠的体重平均降低84.5 g,至77 d时母鼠的肾周脂肪的重量平均减少3.6 g,益生菌组母鼠的子代鼠体重比模型组母鼠的子代鼠体重平均减轻18.7 g。动物体内降脂实验结果显示益生菌组母鼠TC含量减少26.49%,TG含量减少16.87%,LDL-C含量减少28.87%,HDL-C含量增加4.88%。子代鼠TC含量减少32.35%,TG含量减少16.67%,LDL-C减少52.17%。由此可见LP-A3可以明显改善肥胖和血脂水平,减小血脂代谢异常的母鼠对其子代鼠的影响,降低患心血管疾病的风险。
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