不结球白菜遗传图谱的构建及Vc性状的QTL定位

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不结球白菜(Brassica campestris ssp. chinensis Makino)原产中国,是东亚地区重要的蔬菜作物之一,在日常生活中占有重要地位。本研究优化了不结球白菜SRAP反应体系,构建了ISSR、RAPD、SSR、SRAP分子标记连锁遗传图谱,并在此基础上进行了不结球白菜Vc性状QTL定位。主要研究结果如下:1.通过单因素试验确定了Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶和引物4种因素在不结球白菜SRAP反应体系中的适宜浓度范围,并在此基础上利用正交试验设计,从4种因素3个水平对不结球白菜SRAP反应体系进行了优化,确立了适合不结球白菜的SRAP反应体系,25μL反应体系中,含Mg2+2 mmol/L、dNTP 0.2mmol/L、TaqDNA聚合酶1.5U、引物0.36μmol/L、1×PCR buffer、模板DNA 30ng。2.以不结球白菜高Vc含量品种‘常州乌塌菜’和低Vc含量品种‘二青’杂交产生的181株F2代分离材料为作图群体,利用ISSR、RAPD、SSR、SRAP四种分子标记来构建不结球白菜分子遗传连锁图谱。结果表明,构建的连锁图谱包含11个连锁组群,由138个标记组成的连锁图谱,其中包括4个ISSR标记、19个RAPD标记、22个SSR标记和93个SRAP标记。其中偏分离标记36个,占26.1%。每条连锁群上的标记数在4~33个之间,连锁群长度在53~164cM的范围,覆盖基因组945cM,总平均图距6.8cM。3.利用已构建的包括138个分子标记的不结球白菜分子遗传图谱,采用复合区间作图法(CIM)对不结球白菜叶片Vc性状进行了QTL定位和遗传效应分析。取LOD临界值为2.5,得到控制Vc性状的QTL 2个,分别位于第3和第4连锁群上,单个QTL贡献率分别为4.74%和7.63%。本研究定位的不结球白菜Vc性状的QTL是首次报道,这将为不结球白菜Vc性状分子标记辅助选择育种奠定基础。
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