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番木瓜是一种典型的呼吸跃变型果实,对其进行成熟的调控及机理的研究具有重要的理论和实践意义。Expansin是一类存在于植物细胞壁上,并能快速缓冲张力,使植物细胞壁松驰的蛋白质。众多的研究资料表明,其在果实的成熟过程中起着重要的作用。近年来,关于果实中的expansin基因的研究越来越多,如香蕉、芒果和荔枝,但尚未见番木瓜expansin的研究报道。本研究提取成熟番木瓜果实的RNA,反转录合成cDNA,以cDNA为模板,根据已报道的expansin氨基酸保守序列设计简并引物进行RT-PCR,得到的扩增产物纯化后与pMD19-T载体连接,转化大肠杆菌,挑选阳性克隆进行序列测定,得到一个大小为531bp的基因片段,命名为Cp-EXP1,并登录Genbank,登录号为:DQ321829。经分析其编码177个氨基酸,具有expansin保守结构。通过与Genbank中其他expansin基因序列同源性比较发现,番木瓜Cp-EXP1与甜樱桃Exp1和酸樱桃Exp2的序列同源性最高,均为85.66%,与苹果Md-Exp1同源性为84.67%,与黄瓜Cs-EXP1同源性为79.92%。根据得到的Cp-EXP1基因保守片段设计引物,提取成熟番木瓜果实的RNA进行3’RACE,得到了长为673bp的Cp-EXP1基因3’端,与RT-PCR得到的保守片段拼接得到长度为710bp的序列,经Genscan分析后发现,得到的Cp-EXP1 3’端序列含有一个完整的阅读框,编码206个氨基酸。提取番木瓜不同组织的RNA,分别以expansin简并引物和管家基因引物进行RT-PCR,结果发现该基因在番木瓜的根、茎、叶、花、果实中均有表达。为了准确分析该基因在番木瓜果实中的作用,以不同成熟阶段的番木瓜果实总RNA为模板,进行荧光定量PCR。实验结果表明,Cp-EXP1基因在不同成熟阶段的番木瓜果实中的表达是有差异的,其表达水平受乙烯调控。首次在番木瓜中克隆expansin基因并进行表达分析,对expansin基因与乙烯的生成、果实成熟机理间关系的研究具有一定的理论指导意义,也为研究番木瓜果实的生长发育以及其品种的改良等打下了良好的基础。