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肺癌是全球范围内因癌症导致死亡最重要的原因,在我国,肺癌的发生率和死亡率都呈明显上升的趋势,其5年生存率只有20%左右。其主要原因是大多数肺癌患者在确诊时癌细胞已经发生转移。microRNAs(miRNAs)是一类存在于真核生物中,内源性的,长度约为22nt的小分子RNA,通过靶向mRNA的3’UTR结合序列,降解mRNA或抑制其翻译。miRNA通过参与基因转录后水平调控,在个体发育,细胞增殖,分化及凋亡等生命过程中起重要作用。越来越多的证据表明,1miRNA的表达和功能失调与肿瘤的发生,发展密切相关,在肿瘤中发挥着类似于癌基因或抑癌基因的功能。MicroRNA-449a (miR-449a)的表达下调常见于多种肿瘤中,但在肺癌中的生物学功能尚未明确。在本论文中,我们通过一系列的细胞和分子生物学实验技术,研究了miR-449a在肺癌中的表达及生理,病理学作用。首先我们利用qRT-PCR的方法检测了miR-449a在156例肺癌组织(主要是腺癌)以及肺癌细胞系中的表达,结果发现miR-449a在肺癌组织及肺癌细胞系中表达明显下调。同时我们采用x2分析miR-449a的表达水平与患者的性别,年龄,吸烟史,病理类型,复发情况,死亡情况等临床特征的相关性,结果显示miR-449a的表达与肺癌病人的性别,复发和死亡情况密切相关。为了进一步明确miR-449a的诊断价值,我们分析了miR-449a的表达和预后的关系,Kaplan-Meier生存分析显示,miR-449a低表达组病人生存时间要明显比高表达组病人短(p=0.019, log-rank test)。在体外miR-449a能明显降低肺癌细胞系的生长活力,抑制细胞的增殖,促进细胞的衰老和凋亡,而且能明显抑制肺癌细胞在小鼠体内成瘤的能力。双荧光报告基因系统,qRT-PCR和western blot实验表明,过表达lniR-449a能够降低E2F33’UTR报告载体的荧光素酶活性,抑制E2F3mRNA和蛋白水平的表达,并且miR-449a能明显降低E2F3基因的转录激活活性,证明E2F3是miR-449a的一个直接的作用靶点。在肺癌细胞中利用si-RNA沉默E2F3的表达可产生和过表达miR-449a类似的细胞周期阻滞和细胞衰老现象,而过表达E2F3,则可以恢复由过表达miR-449a所引起的细胞活力的下降。此外,miR-449a也显著抑制了CCND1,CDK6蛋白的表达。本论文的研究结果揭示了miR-449a在肺癌发生过程中和细胞周期调控中的重要作用,提示miR-449a可以作为肺癌诊断和预后的一个重要的标志物,并且在肺癌的治疗中具有潜在的应用价值。