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本研究通过分子活性定点识别技术,即通过HPLC技术与抗氧化活性或抗肿瘤活性筛选联用技术,初步定向测定海洋真菌浸膏活性部分的极性区域,从而为海洋真菌代谢产物的分离过程提供了一定的指导作用,在此基础上对海洋真菌的次级代谢产物进行系统的分离纯化工作,最后得到了具有生物活性的海洋真菌代谢产物,以此作为筛选海洋真菌代谢产物中的活性成分的指导方法。本实验得出以下几点主要结论:(1)实验菌种MNP801是由实验室从东海北纬31.3622度,东经122.6896度海域40 m深处海水样品,通过多次稀释涂布法分离得到多株的海洋真菌中,选取两株MNP801海洋真菌,其中一株通过18sDNA鉴定为链格孢属Alternaria sp.MNP801,将其大规模培养,分离菌体和发酵液,提取物菌体浸膏。另一株通过初步生化和形态学鉴定为海洋毛霉属真菌Mucor sp.MNP801,用其进行特定天然产物生物转化研究。(2)首次通过HPLC技术与抗氧化活性或抗肿瘤活性筛选联用技术建立海洋真菌Alternaria sp.MNP801的定点活性谱图。在抗氧化模型中,主要通过测定DPPH自由基清除活性来评估每个极性区段的化合物的抗氧化活性。在抗肿瘤定点活性模型的建立中,分别测定了对PC-12、H460、A549和3T3等4株肿瘤细胞的抑制活性,经过筛选发现其对肿瘤细胞H460和3T3的抑制活性相对显著,最后将抑制H460和3T3细胞株活性结合作为分离抗肿瘤活性化合物的依据。(3)基于已建立的抗氧化和抗肿瘤分子定点识别谱图,通过确定的最佳HPLC条件,采用中压制备仪直接进行菌体浸膏中目标微量分子的定点分离,最终从菌体浸膏中分离到化合物1-3,分别为5α,8 a-表二氧麦角甾-6,22-二烯-3 β醇(1)、氧杂蒽酮(2)、硬脂酸(3)。化合物1为首次从海洋链格孢属真菌中分离得到的化合物,经过测定化合物1对肿瘤细胞H460和3T3显示了较好的抑制活性,其IC50值分别为51.26±0.21μg·mL-1和41.26±0.18μg·mL-1。(4)首次通过海洋真菌Mucor sp.MNP801转化柳叶腊梅中分离的天然产物6,7-二甲氧基香豆素,采用GC-MS等仪器分析转化组与对照组发酵液中的可挥发性成分,发现转化组中出现对照组没有且异于加入底物的新产物2-乙酰-4-乙酰氨基-5-硝基苯酚,并非此海洋真菌本身所产生的次级代谢产物,为通过海洋真菌得到新的活性物质的研究提供了一种可以借鉴的方法。