miRNA-185-5p/HMGA2/Wnt/β-catenin轴标识分子在结直肠癌患者中临床意义的研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:scxs866
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目的:验证mi RNA-185-5p与HMGA2、Wnt/β-catenin信号通路之间的关系,通过研究mi RNA-185-5p/HMGA2/Wnt/β-catenin轴中各个组分的标识分子在结直肠癌患者癌组织和癌旁组织中的表达程度,了解其表达程度与患者临床病理学参数以及预后之间的关系。探讨mi RNA-185-5p/HMGA2/Wnt/β-catenin轴中标识分子:mi RNA-185-5p、HMGA2、CTNNB1(为Wnt/β-catenin信号通路中核心分子β-catenin的编码基因)的表达程度是否可作为结直肠癌患者评估疾病发展程度和评估预后的潜在指标。方法:收集2017年7月到2018年4月间行结直肠癌手术治疗的共30例患者,收集切除的癌组织和癌旁组织,癌旁组织距肿瘤>2厘米。患者的临床病理学参数如下:男性11例,女性19例;年龄在32~86岁之间,中位年龄67岁,年龄≥60岁25例,年龄<60岁5例;肿瘤位于升结肠6例,降结肠3例,乙状结肠17例,直肠4例;肿瘤直径≥5cm 9例,肿瘤直径<5cm 21例;肿瘤侵及肌层3例,侵及浆膜层19例,侵透脏层腹膜8例;溃疡型25例,隆起型5例;高分化癌1例,中分化癌25例,低分化癌4例;无淋巴结转移者14例,有淋巴结转移者16例,其中有1~3枚淋巴结转移者14例,大于等于4枚转移者2例;TNM分期I期2例,II期12例,III期16例;住院时间为3~38天,中位住院时间20天;术后随访:随访时间距手术时间为22~55个月,其中死亡8例,存活22例。利用Target Scan网站预测mi RNA-185-5p与HMGA2、Wnt/β-catenin之间的靶向结合位点,三者的靶向调节关系通过荧光素酶报告实验进一步验证,使用q RT-PCR技术对30例结直肠癌病人癌组织和癌旁组织标本中的mi RNA-185-5p、HMGA2 m RNA和CTNNB1m RNA的相对表达量进行分析,对比各标识分子在癌组织和癌旁组织中相对表达量的差异,和相对表达量临床病理学参数之间的关系,以及与患者预后之间的关系。探讨mi RNA-185-5p/HMGA2/Wnt/β-catenin轴与结直肠癌发生发展的关系,及其对预测结直肠癌发生发展和评估预后的作用。数据应用IBM SPSS 20.0、Graph Pad Prism 7.0统计软件进行统计学分析,相对表达量采用配对t检验进行分析,服从正态分布的计量资料采用独立样本t检验和单因素方差分析,不服从正态分布的计量资料采用非参数检验,生存分析采用Kaplan-Meier法,P<0.05有统计学意义。结果:Target Scan网站预测结果显示mi RNA-185-5p与HMGA2、Wnt/β-catenin信号通路间存在可能的靶向作用位点,荧光素酶报告实验结果提示mi RNA-185-5p与HMGA2、Wnt/β-catenin信号通路间可能存在靶向调节关系。标志分子mi RNA-185-5p在结直肠癌组织中的相对表达量较癌旁组织中的低,HMGA2 m RNA、CTNNB1m RNA在结直肠癌组织中的相对表达量较癌旁组织中的高,结果具有统计学差异(P<0.05)。mi RNA-185-5p在结直肠癌组织中的表达程度与肿瘤的TNM分期、是否存在淋巴结转移、肿瘤的位置有关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤直径、肿瘤类型、肿瘤分化程度、住院天数间的差异无统计学意义(均P>0.05);CTNNB1 m RNA、HMGA2 m RNA在结直肠癌组织中的表达与肿瘤的TNM分期、是否存在淋巴结转移、肿瘤分化程度有关(P<0.05),与其他临床病理资料无关(均P>0.05)。患者的Kaplan-Meier生存曲线显示在癌组织中mi RNA-185-5p较低的表达预示更短的生存时间短,更差的预后;癌组织中CTNNB1 m RNA与HMGA2 m RNA较高的表达量预示着较短的生存时间和较差的预后(均P<0.05)。结论:1.mi RNA-185-5p与HMGA2、Wnt/β-catenin信号通路间存在可能的靶向结合位点,mi RNA-185-5p/HMGA2/Wnt/β-catenin轴可能作为整体共同参与结直肠癌的发生发展过程;2.mi RNA-185-5p在结直肠癌组织中的相对表达量较癌旁组织更低,HMGA2 m RNA与CTNNB1 m RNA在结直肠癌组织中的相对表达量较癌旁组织更高;3.各标志分子:mi RNA-185-5p、HMGA2 m RNA和CTNNB1 m RNA在结肠癌患者结肠癌组织中的相对表达量与肿瘤发展程度和预后相关,较低的mi RNA-185-5p表达、较高的HMGA2 m RNA和CTNNB1 m RNA表达提示更高的恶性程度和更差的预后。各标志分子可作为结直肠癌患者评估疾病严重程度和预测预后的潜在指标,可能成为结直肠癌潜在的治疗靶点。
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