【摘 要】
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背景生殖道菌群（Vaginal Microbiome）是女性生殖道微生态的关键组成部分,与众多生殖疾病的发生和进展息息相关。其中,乳杆菌（Lactobacillus）在维持生殖健康中发挥重要的作用,其可通过生成乳酸,分泌抗菌肽、过氧化氢等生物活性物质,使局部维持以高丰度乳杆菌为优势菌、低生物多样性的弱酸性生态特征。在妊娠期,生殖道乳杆菌丰度下降可使部分微生物穿过宫颈上行至宫腔内,引起包括宫内感染、
【基金项目】
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国家自然科学基金委杰出青年基金（NSFC81925026）；
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背景生殖道菌群（Vaginal Microbiome）是女性生殖道微生态的关键组成部分,与众多生殖疾病的发生和进展息息相关。其中,乳杆菌（Lactobacillus）在维持生殖健康中发挥重要的作用,其可通过生成乳酸,分泌抗菌肽、过氧化氢等生物活性物质,使局部维持以高丰度乳杆菌为优势菌、低生物多样性的弱酸性生态特征。在妊娠期,生殖道乳杆菌丰度下降可使部分微生物穿过宫颈上行至宫腔内,引起包括宫内感染、早产、胎膜早破、新生儿败血症等疾病的发生。近年研究提示,利用生殖道菌群可对妊娠结局进行早期预测。然而,受地域、人群本底及研究样本量等因素影响,各研究间结果不一,甚至相互矛盾。目的:本文通过一项前瞻性临床研究对列,探究本地化人群妊娠期生殖道菌群与早产等关键不良妊娠事件的相关性;并进一步探索菌群对疾病发生的预测作用。方法:研究通过临床招募方式采集受试者人口学特征、疾病资料及妊娠结局信息,同时采集阴道分泌物利用16S rRNA菌群测序方法,从菌群结构、菌型、多样性、差异细菌等参数,结合逻辑回归、Fisher’s Exact Test、Spearman等统计方法进行研究。结果:1.菌群结构:85.98%样本呈现高丰度乳杆菌及低α多样性的菌群特征;种水平上,以卷曲乳杆菌（Lactobacillus crispatus）和惰性乳杆菌（Lactobacillus iners）富集最常见（39.98%,35.98%）。2.L.crispatus与大多数BV（Bacterial vaginosis）相关细菌呈负相关（p＜0.001）。L.iners与巨球菌（Megaspharea spp.）、气球菌（Aerococcus spp.）呈正相关;与加德纳菌（Gardnerella spp.）、阴道陌生菌（Atopobium vaginae）等呈负相关（p＜0.001）。3.阴道分泌物白细胞数量与L.iners相对丰度显著正相关（p＜0.001）,白细胞数量＞15/Hp的病人,其L.iners丰度显著高于正常组。高唾液酸苷酶组菌群α多样性显著高于对照组（p＜0.001）,且Gardnerella spp.等多种厌氧菌明显富集（p＜0.001）;使用逻辑回归对唾液酸苷酶用于评价菌群紊乱的特异性达99.01%,但灵敏性仅为14.08%。4.菌群与妊娠事件的相关性:孕前高体质指数（Body Mass Index,BMI）妇女的子代出生体重显著高于对照组（p＜0.001）,且发生妊娠糖尿病（Gestational Diabetes Mellitus,GDM）的风险显著升高（p＜0.001）。GDM孕妇的生殖道菌群存在明显乳杆菌缺失（p＜0.01）;且与毛螺菌科（Lachnospiraceae）微单胞菌属（Parvimonas）细菌富集明显相关。5.在早产、胎膜早破、绒毛膜羊膜炎等疾病均未发现与菌群相关（p＞0.05）。结论1.本研究表明本地女性妊娠期生殖道呈现高丰度乳杆菌及低α多样性的健康菌群特征,以L.crispatus和L.iners为最常见的优势乳杆菌。2.L.crispatus与绝大多数的生殖道细菌呈负相关关系,可能在生殖道中起保护作用。而L.iners的相对丰度与生殖道炎症显著相关,且呈现与Megaspharea spp.、Aerococcus spp.具有协同作用;此外,L.iners与Gardnerella等多种厌氧菌负相关,提示对于L.iners在健康中发挥的作用,可能受到环境及其他细菌的影响,其因果关系有待深入探索;本研究同时观察到Gardnerella spp.、Atopobium vaginae等多种厌氧菌存在明显的协同关系,提示对于细菌-细菌的互作机制是生殖道道菌群与疾病相关性研究关键因素。3.唾液酸苷酶活性对评估生殖道菌群紊乱有较好的特异性,但灵敏性较低,提示该指标对疾病筛查作用需要更多的临床研究。4.早产、胎膜早破、绒毛膜羊膜炎等不良妊娠结局疾病均未观察到明显的菌群相关特征。而GDM孕妇生殖道中乳杆菌缺失、Lachnospiraceae、Parvimonas明显富集,提示GDM与生殖道菌群存在相关性,其两者间因果关系需要进一步探究。
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