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目的:通过尾静脉注射ConA建立小鼠免疫性肝纤维化模型,造模成功后行脾切除术,研究脾切除对ConA诱导的免疫性肝纤维化小鼠的治疗作用;进一步探讨脾切除能否增强免疫抑制剂对ConA诱导的免疫性肝纤维化小鼠的治疗作用。研究脾切除对髓系抑制细胞(Myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)极化、NF-κB信号通路活化及巨噬细胞分型的相关细胞因子表达的影响,初步探讨脾切除对ConA诱导的免疫性肝纤维化小鼠的治疗机制。方法:1、将Balb/c小鼠分为空白组和实验组,实验组通过尾静脉注射刀豆蛋白建立ConA诱导的免疫性肝纤维化模型,剂量为12.5mg/kg,每周一次,连续5周;造模成功后,将实验组小鼠分为ConA造模组、脾切除干预组、假手术组、激素治疗组及脾切除联合激素组,经尾静脉继续注射ConA至第7周。2、分别于造模成功后、ConA注射第7周后,取各组小鼠外周血检测血清丙氨酸转氨酶(Alanine transaminase,ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST);通过HE染色评价小鼠肝脏组织炎症程度,Masson染色评估肝脏纤维化程度,免疫组化检测小鼠肝脏组织中平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的表达水平。3、ConA注射第7周后,取外周血进行流式分析,检测MDSCs极化分型及单核细胞的比例;应用Western blot(WB)方法检测小鼠肝脏NF-κB p50和NF-κB p65转录因子的表达水平;通过免疫荧光方法检测各组小鼠肝脏组织中巨噬细胞的极化分型,应用Real-time PCR方法检测小鼠肝脏组织中M2型巨噬细胞细胞因子及相关炎症因子Arg-1、IL-4及IL-10的表达水平。结果:1、与空白对照组小鼠相比,造模组小鼠血清ALT、AST水平显著升高(p<0.05),小鼠肝脏汇管区有较多的炎症细胞浸润,肝脏组织中α-SMA表达水平显著升高(p<0.05),伴有轻度肝纤维化。2、ConA连续注射7周后,与ConA造模组相比,激素治疗组、脾切除干预组及脾切除联合激素组小鼠血清ALT、AST水平显著降低(p<0.05),肝脏汇管区炎症程度减轻,肝脏组织中α-SMA表达水平显著降低(p<0.05),肝脏纤维化程度减轻。与激素治疗组小鼠相比,脾切除联合激素组小鼠肝脏纤维化程度改善更显著(p<0.05)。3、与ConA造模组相比,脾切除干预组、激素治疗组及脾切除联合激素组小鼠外周血中CD11b+Ly6ChighMDSCs比例显著增加(P<0.05);而脾切除干预组、激素治疗组及脾切除联合激素组小鼠外周血中单核细胞比例较ConA造模组显著减少(P<0.05),F4/80+CD206+单核细胞数量有增加趋势。4、脾切除干预组、激素治疗组及脾切除联合激素组小鼠肝脏组织中NF-κB p65转录因子表达量较ConA造模组显著减少(P<0.05),而NF-κB p50转录因子表达量较ConA造模组显著增加(P<0.05)。5、脾切除干预组、激素治疗组及脾切除联合激素组小鼠肝脏组织中的F4/80+巨噬细胞和F4/80~+iNOS~+M1型巨噬细胞比例较ConA造模组显著减少(P<0.05)。而脾切除干预组、激素治疗组及脾切除联合激素组小鼠肝脏组织中ARG-1、IL-4及IL-10的表达量较ConA造模组小鼠显著增加(P<0.05)。结论:1、经尾静脉注射ConA 5周可建立Balb/c小鼠免疫性肝纤维化模型。2、脾切除能够改善ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠肝脏组织炎症程度,抑制肝星状细胞的活化,延缓肝脏纤维化的进展;脾切除联合激素治疗小鼠免疫性肝纤维化时,两者可能存在协同作用。3、脾切除能够促进外周血中CD11b+Ly6ChighMDSCs的分化,抑制外周血中单核细胞的增殖,并促进F4/80+CD206+单核细胞分化,从而延缓ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠肝纤维化的进展。4、脾切除可能通过下调NF-κB p65转录因子表达,同时上调NF-κB p50转录因子表达,从而减轻ConA诱导的小鼠免疫性肝纤维化。5、脾切除能够明显降低肝脏组织中F4/80+巨噬细胞和F4/80~+iNOS~+M1型巨噬细胞的比例,并诱导M2型巨噬细胞相关细胞因子及炎症因子的表达,从而减轻ConA诱导的免疫性肝损伤小鼠的肝脏纤维化。6、脾切除可能通过抑制NF-κB信号通路活化,促进MDSCs转化为M2型巨噬细胞,从而减轻ConA诱导的肝损伤,延缓肝纤维化的进展。