【摘 要】
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目的:探究硫酸胍丁胺通过抗炎作用增加胆红素脑病仔鼠海马区域抗炎细胞因子IL-10的表达和下调炎症因子IL-1β的表达、减轻胆红素脑病神经炎症致脑损伤的作用机制。方法:将足月健康的7日龄SD仔鼠177只按照随机数字表法分为对照组(NS组)52只和实验组(T组)125只。7日龄T组仔鼠腹腔注射浓度为10 mg/m L的胆红素,剂量为150 mg/kg,NS组注射等量生理盐水15 m L/kg,其余条件
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目的:探究硫酸胍丁胺通过抗炎作用增加胆红素脑病仔鼠海马区域抗炎细胞因子IL-10的表达和下调炎症因子IL-1β的表达、减轻胆红素脑病神经炎症致脑损伤的作用机制。方法:将足月健康的7日龄SD仔鼠177只按照随机数字表法分为对照组(NS组)52只和实验组(T组)125只。7日龄T组仔鼠腹腔注射浓度为10 mg/m L的胆红素,剂量为150 mg/kg,NS组注射等量生理盐水15 m L/kg,其余条件相同。T组仔鼠腹腔注射胆红素12 h后,各组进行一般状况检查和神经系统表现评分,各组分别随机选取25只仔鼠进行脑组织HE染色、TUNEL、Western Blot及ELISA检测后,剩余各组仔鼠中,将T组随机分为T1组65只、T2组35只。NS组和T1组进行常规饲养,T2组进行硫酸胍丁胺干预治疗,其余条件相同。22日龄NS组存活27只,T1组存活26只,T2组存活28只,于该日龄对NS组、T1组、T2组分别随机选取26只仔鼠进行脑组织HE染色、TUNEL、Western Blot及ELISA检测。结果:1.神经系统表现评分:7日龄造模12 h后,T组评分显著提高(P<0.001),T1组与T2组评分比较无统计学差异(P>0.05)。2.体质量:7日龄造模前各组仔鼠体质量比较无统计学差异(P>0.05)。22日龄T1组、T2组体质量均显著降低(P<0.001),硫酸胍丁胺干预后T2组体质量显著增加(P<0.001)。3.各组于22日龄神经行为学检测结果:(1)改良网屏试验:T1组、T2组抓握时间均显著减少(P<0.001),硫酸胍丁胺干预后T2组抓握时间显著增加(P<0.001)。(2)斜坡试验:T1组调整时间显著增加(P<0.001),T2组调整时间显著增加(P<0.05),硫酸胍丁胺干预后T2组调整时间显著减少(P<0.001)。(3)平衡木测验:T1组、T2组评分均显著降低(P<0.05),硫酸胍丁胺干预后T2组评分显著提高(P<0.05)。4.HE染色病理检测结果:与NS组相比,7日龄T组仔鼠海马区神经元数量明显减少,结构排列紊乱,核固缩、裂解。与NS组相比,22日龄T1组海马区神经元排列疏松散乱,部分胞核固缩、坏死;硫酸胍丁胺干预后T2组海马区神经元排列较为疏松,未见肿胀、核固缩等病理改变。5.TUNEL检测结果:7日龄造模12 h后,T组仔鼠海马区神经细胞凋亡率显著增加(P<0.001)。与NS组相比,22日龄T1组、T2组凋亡率均显著增加(P<0.001),硫酸胍丁胺干预后T2组凋亡率显著降低(P<0.001)。6.Western Blot检测结果:7日龄造模12 h后,T组与NS组仔鼠海马组织IL-10相对表达量比较、IL-1β相对表达量比较均无统计学差异(P>0.05)。与NS组相比,22日龄T1组IL-10表达显著降低(P<0.001),T2组IL-10表达显著降低(P<0.05),硫酸胍丁胺干预后T2组IL-10表达显著增加(P<0.05)。与NS组相比,22日龄T1组IL-1β表达显著增加(P<0.001),T2组IL-1β表达显著增加(P<0.05),硫酸胍丁胺干预后T2组IL-1β表达显著降低(P<0.001)。7.ELISA法检测结果:7日龄造模12 h后,T组仔鼠海马组织IL-1β含量显著增加、IL-10含量显著降低(P<0.001)。与NS组相比,22日龄T1组、T2组IL-1β含量显著增加(P<0.001),硫酸胍丁胺干预后T2组IL-1β含量显著降低(P<0.001)。与NS组相比,22日龄T1组、T2组IL-10含量显著降低(P<0.001),硫酸胍丁胺干预后T2组IL-10含量显著增加(P<0.001)。结论:7日龄仔鼠腹腔注射胆红素可成功制备胆红素脑病模型;硫酸胍丁胺干预可有效降低胆红素脑病仔鼠海马区神经细胞凋亡率;有效减少胆红素脑病仔鼠海马组织促炎细胞因子IL-1β的表达,上调抗炎细胞因子IL-10的表达;有效改善胆红素脑病仔鼠的异常神经行为学表现。
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