【摘 要】
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目的:探究人参皂苷Rg1的干预对孤独症模型鼠异常行为和NOX2/ROS通路的影响。方法:选取清洁级Wistar大鼠,雄性10只,雌性20只。参照Schneider等人的孤独症模型制备方法,在母鼠孕12.5天时腹腔注射600 mg/kg丙戊酸钠（Sodium Valproate,VPA）,正常组孕鼠在相同时间点腹腔注射等量的生理盐水。通过对孤独症模型仔鼠进行发育学、行为学测试来鉴定模型是否制备成功。
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目的:探究人参皂苷Rg1的干预对孤独症模型鼠异常行为和NOX2/ROS通路的影响。方法:选取清洁级Wistar大鼠,雄性10只,雌性20只。参照Schneider等人的孤独症模型制备方法,在母鼠孕12.5天时腹腔注射600 mg/kg丙戊酸钠（Sodium Valproate,VPA）,正常组孕鼠在相同时间点腹腔注射等量的生理盐水。通过对孤独症模型仔鼠进行发育学、行为学测试来鉴定模型是否制备成功。发育学检测方法:通过检测体重、脑重、方向趋向性、睁眼时间;行为学检测方法有三箱实验、社会交流实验、重复刻板行为实验。随机地选取正常组（NS组）、模型组（VPA组）、药物组（Rg1组）仔鼠各50只,Rg1组从第7天起每日腹腔注射人参皂苷Rg1（40 mg/kg,ip）,连续3周,NS组、VPA组每日注射同等剂量的生理盐水。采用Morris水迷宫测试学习记忆能力,其他发育行为学检测方法同上;通过HE染色法进行形态学检测,观测海马区CA1、CA3、DG区病理变化;采用免疫荧光染色法,检测活性氧（Reactiveoxygen Species,ROS）数量;试剂盒检测丙二醛（Malonic Dialdehyde,MDA）表达水平;Western blot检测NOX2氧化酶组成蛋白NOX2、p-P47phox表达水平。结果:1.孤独症鼠模型鉴定:孤独症模型鼠不同时间节点的体重和脑重均明显低于NS组,睁眼时间延迟,前庭和运动发育落后（P＜0.05）。本实验于P28采用三箱实验、社会交流实验和重复刻板行为实验来检测模型鼠孤独症样核心症状。结果表明:孤独症模型鼠重复刻板行为累计时间增加,嗅觉分辨能力下降,对社会性气味偏好降低,社会交往能力和社会新奇性能力障碍（P＜0.05）。2.人参皂苷Rg1对孤独症模型鼠发育和行为学的影响:结果显示,与VPA组相比,Rg1组仔鼠P28时体重明显重于VPA组,刻板动作的累计时间减少,嗅闻社交性气味的时间增加,学习和记忆能力显著改善（P＜0.05）。3.人参皂苷Rg1对孤独症模型鼠海马区形态学及氧化应激的影响:HE染色显示,VPA组仔鼠海马组织CA1、CA3和DG区神经细胞排列疏松、杂乱无序,细胞肿胀。人参皂苷Rg1的干预减轻了上述的病理改变。免疫荧光和试剂盒结果显示:于P7、P28日龄时VPA组仔鼠ROS、MDA产生较高（P＜0.05）,在经过人参皂苷Rg1干预后,海马区ROS、MDA的水平下调（P＜0.05）。Western blot检测结果显示:VPA组仔鼠海马区NOX2、p-P47phox蛋白表达水平于P7、P28日龄时均高于NS组（P＜0.05）。与VPA组相比,Rg1组仔鼠海马区NOX2、p-P47phox表达水平均有所下调,但是NOX2表达水平下降不明显（P＞0.05）,而p-P47phox表达水平显著下降（P＜0.05）。结论:1.孤独症模型鼠海马组织ROS、MDA产生增加,NOX2、p-P47phox蛋白表达水平升高;2.人参皂苷Rg1可以明显减少孤独症模型鼠海马区ROS、MDA的生成,抑制p-P47phox蛋白表达,发挥神经保护作用;3.人参皂苷Rg1能够改善孤独症模型鼠的学习记忆等方面能力,可能与抑制NOX2/ROS通路减少ROS的生成有关。
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