【摘 要】
：
目的:探讨存活素基因的特异性短发卡核糖核酸-结肠腺瘤性息肉病基因（Survivin sh RNA-APC双基因）对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织中内质网应激PERK-AFT4-CHOP凋亡通路表达的影响。方法:选择无特定病原体级的健康裸鼠30只,并通过随机数表法将其按照6只/组,分组为Survivin sh RNA-APC双基因组、Survivin sh RNA单基因组、APC单基因组、空
论文部分内容阅读
目的:探讨存活素基因的特异性短发卡核糖核酸-结肠腺瘤性息肉病基因（Survivin sh RNA-APC双基因）对HT-29结肠癌细胞裸鼠皮下移植瘤组织中内质网应激PERK-AFT4-CHOP凋亡通路表达的影响。方法:选择无特定病原体级的健康裸鼠30只,并通过随机数表法将其按照6只/组,分组为Survivin sh RNA-APC双基因组、Survivin sh RNA单基因组、APC单基因组、空载体组及空白组（阴性肿瘤对照组）共五组。将本实验组中,前期构建并验证可稳定表达的稳转株细胞悬液（Survivin sh RNA-APC双基因稳定细胞株、Survivin sh RNA稳定细胞株、APC稳定细胞株、空载体稳定细胞株、HT-29结肠癌细胞）,依次注入于实验各组裸鼠的右前腋下,保持生长环境不变继续喂养并观察各组裸鼠的成瘤情况,6周后将所有成瘤裸鼠脊髓脱位法处死,分离瘤体组织,使用石蜡固定以制作组织玻片,并利用免疫组化技术及image pro plus6.0图像解析软件测定实验各组裸鼠皮下移植瘤组织中PERK、e IF-2α、GRP78、ATF4、CHOP、Caspase-12蛋白表达及Mean of IOD值,通过DNA断裂原位末端标记实验观察各组移植瘤的细胞凋亡程度,并比较各组凋亡指数。结果:观察各组裸鼠皮下移植瘤的生长情况,比较各观察时间节点移植瘤的平均瘤体积、剥离瘤组织后的平均瘤重、计算瘤重抑制率。将各组移植瘤组织中PERK、e IF-2α、GRP78、ATF4、CHOP、Caspase-12蛋白表达结果及结肠癌细胞凋亡指数进行统计分析。（1）与空白组、空载组比较,APC单基因组、Survivin sh RNA单基因组和Survivin sh RNA-APC双基因组中的平均肿瘤体积和瘤重都有显著缩小（P﹤0.05）;双基因组较单基因组中的平均肿瘤体积和瘤重下降更为明显（P﹤0.05）;空白组与空载组相比,平均肿瘤体积（P=0.660）和平均瘤重（P=0.151）差异均无统计学意义。（2）双基因组的瘤重抑制率（62.688%）较APC单基因组（37.153%）、Survivin sh RNA单基因组（40.632%）提高更显著（P﹤0.05）。（3）各组移植瘤组织中PERK、e IF-2α、GRP78、ATF4、CHOP、Caspase-12蛋白免疫组化定量分析:Survivin sh RNA-APC双基因组、APC组、Survivin sh RNA组中蛋白均有不同程度的表达,Mean of IOD均增加（蛋白表达含量均增加）,双基因组中Mean of IOD的增加,较单基因组更显著（P﹤0.05）;空载组与阴性对照组相比,差异不具有统计学意义（P﹥0.05）。（4）各组结肠癌细胞凋亡结果比较:Survivin sh RNA-APC双基因组（56.327±3.208）、APC单基因（32.333±2.513）、Survivin sh RNA单基因（34.245±2.774）的结肠癌细胞凋亡指数显著增高。双基因组与单基因组比较结肠癌细胞凋亡指数大幅上升（P﹤0.05）。空载组（10.162±0.577）与阴性对照组（9.928±0.297）相比较,差异不具有统计学意义（P=0.857）。结论:存活素基因的特异性短发卡核糖核酸-结肠腺瘤性息肉病基因（Survivin sh RNA-APC双基因）对HT-29结肠癌细胞产生显著的诱导细胞凋亡效果,该过程伴随ERS的参与,可能通过上调结肠癌细胞中内质网应激PERK-ATF4-CHOP信号通路相关蛋白的表达,从而起到协同诱导结肠癌细胞凋亡的作用,而双基因组相较于单基因组的调控能力可能更强。
其他文献
目的:本实验通过锥体束定向注射无水乙醇建立痉挛型脑瘫模型鼠,探究孕酮联合早期干预对痉挛型脑瘫模型鼠的神经行为学及细胞凋亡的影响,以期为临床治疗提供依据。方法:选取清洁级足月新生7日龄Sprague-Dawley（SD）大鼠150只依据随机数字表法分成两组:正常对照组（NS组,n=30）和模型组（T组,n=120）。T组于7日龄左侧锥体束定向注射无水乙醇（1μL/g）,NS组7日龄左侧锥体束定向注射
目的:本研究旨在获取我国赫哲族健康成人肺功能检测值并比较其与汉族健康成人是否存在差异,分析肺功能主要参数与肺功能相关影响因素的关系。方法:本研究随机选取佳木斯市及其周边地区健康成人308名作为研究对象,赫哲族男性63名、赫哲族女性91名,汉族男性63名、汉族女性91名共四组。采用德国JEAGER公司生产的Master Screen Pneumo型便携式肺功能仪对用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气
目的:通过观察针灸针针刺松解神经治疗类风湿性关节炎（RA）膝关节疼痛的疗效,评价针灸针针刺松解神经镇痛的有效性,并探讨针灸针针刺松解神经的镇痛机制,为今后治疗类风湿性关节炎膝关节的疼痛提供新的一种治疗方法,以做参考和借鉴。方法:对60例符合类风湿性关节炎诊断标准的膝关节疼痛患者进行临床研究,并对其治疗。均给予抗风湿疾病药物:来氟米特20mg,每日1次、甲氨蝶呤片每次10mg,每周1次;叶酸片每次5
目的通过研究不同分期的2型糖尿病肾病患者血清I型前胶原氨基端肽（PINP）、I型胶原交联羧基末端肽（β-CTX）、同型半胱氨酸（HCY）的表达,分析I型前胶原氨基端肽（PINP）、I型胶原交联羧基末端肽（β-CTX）、同型半胱氨酸（HCY）水平变化的意义,及其与DN的骨质疏松发生、发展的相关性。方法选择2020年12月-2021年12月在佳木斯大学附属第一医院肾内科住院并确诊为2型糖尿病肾病的患者
目的:通过制备新生SD大鼠痉挛型脑瘫模型,探讨乙酰左旋肉碱联合康复训练对痉挛型脑瘫模型鼠的运动功能以及炎症反应的影响。方法:选取足月7日龄新生SD大鼠150只,采用随机数字表法分为正常对照组（NS组,n=30）和模型组（M组,n=120）。于7日龄对M组仔鼠左侧颅内锥体束定向注射无水乙醇（1μL/g）,NS组于左侧颅内锥体束定向注射等量生理盐水。各组大鼠均在注射24 h后（8日龄）,采用改良李晓捷
目的:探讨血清瘦素（Leptin,LEP）、脂质运载蛋白2（Lipocalin 2,LCN2）以及临床及实验室指标在女性膝骨关节炎（Knee osteoarthritis,KOA）患者及健康女性之间的差异性,分析它们之间的相关性,同时分析血清LEP、LCN2与膝关节X线分级（K-L分级）的相关性,探讨它们在KOA中的作用。方法:2020年12月-2021年12月期间,选取在佳木斯大学附属第一医院风
目的:近年来,较多研究显示多种脂肪因子在房颤的发生、发展过程中发挥重要作用。血清趋化素（Chemerin）是新近发现的一种可在脂肪细胞中高度表达的细胞因子,可调节机体代谢,同时参与机体炎症反应。本文旨在探究血清趋化素水平在非瓣膜房颤中的变化,并探讨在房颤合并心衰中的诊断价值。方法:选择2020年12月-2021年12月期间在我院门诊和住院的非瓣膜性房颤患者120例作为研究对象（房颤组）,其中房颤无
目的探讨心房钠尿肽前体A（NPPA）基因T2238C位点多态性对氨氯地平降压疗效的影响。方法随机选取2020年10月-2021年10月于佳木斯大学附属第一医院高血压门诊就诊或住院的119例轻、中度EH（收缩压140-179 mm Hg和/或舒张压90-109mm Hg）患者为研究对象。所有原发性高血压（EH）患者的诊断符合《中国高血压防治指南2018年修订版》,均签署知情同意书。所有纳入的EH患者
目的:本研究旨在观察C型凝集素样受体2（type C lectin-like receptor 2,CLEC-2）、脂蛋白相关磷脂酶A2（lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2）及超敏C反应蛋白（high sensitivity C-reactive protein,hs-CRP）在急性冠脉综合征（acute coronary syndrom
目的:通过检测血清沉默信息调节因子2相关酶1（silent mating-type information regulation 2 homolog 1,SIRT1）、小而密低密度脂蛋白（small dense Low density lipoprotein cholesterol,sd LDL-C）在急性冠脉综合征患者外周血中的表达水平,探讨二者与ACS的关系。再经Gensini评分对ACS组进