犬眼小梁切除术效果评价及TGF-β1的表达与瘢痕形成的关系

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目的:评价犬眼小梁切除术的术后效果,探索犬眼小梁切除术后滤过区组织中TGF-β1的表达与瘢痕形成的关系。方法:(1)对48只犬眼行小梁切除术,术后观察记录不同时间点滤过泡形态及相应眼压,用SPSS软件进行数据统计分析,评价手术效果。(2)选取体质大致相同的田园犬22只,在相同的饲养情况下喂养。随机分为两组,第一组为试验组20只犬,均于左眼进行小梁切除术,建立犬眼小梁切除术模型。术后每天用眼压计测量眼压并用裂隙灯观察滤过泡形态及瘢痕形成的情况。并于术后第3天,第7天,第14天,第21天,第28天随机选取四只犬进行术眼摘除,取其完整眼球,剪取滤过区组织。第二组为空白对照组2只犬,不进行小梁切除术,直接摘取左眼眼球剪取小梁网附近组织。各组剪下来的组织一部分用来做成病理组织切片,另一部分冷冻保存,采用RT-PCR法检测TGF-β1分子表达水平。记录各时间点的检测数据,最后用SPSS软件进行数据分析。试验结果:(1)犬眼小梁切除术后第3天有89.58%的术眼形成功能型滤过泡,10.42%的术眼形成瘢痕。但是推着时间的推移,非功能型滤过泡的百分比逐步上升,在术后第21天开始非功能型滤过泡的所占比率超过两成(20.84%)。术后第3天与术前眼压相比眼压差值为4.59±0.412mmHg。术后第7天的差值为4.19±0.497mmHg。术后第14天的差值为3.11±0.526mmHg,术后第21天的差值为1.65±0.567 mmHg,术后第21天的差值为0.99±0.736mmHg。从术后第3天到术后第28天,眼压差逐渐减小,术后第3天、术后第7天与术后第14天、术后第21天、术后第28天之间眼压差值差异极显著,术后第14天与术后第21天、术后第28天之间眼压差值差异极显著。(2)在术后第3天、7天、14天、21天、28天用裂隙灯观察滤过泡的形态。从术后第14天起90%以上的术眼滤过区都开始形成肉眼可观察到的瘢痕。且从术后第14天开始眼压无显著性降低。(4)显微镜下病理组织切片观察结果显示:健康组样本中结膜下组织致密,有少量成纤维细胞、炎性粒细胞、胶原等。巩膜组织中有大量整齐的胶原纤维,少量的成纤维细胞。试验组样本中术后第3天,结膜下组织疏松,巩膜组织及结膜下组织中成纤维细胞及炎性细胞开始增多。术后第7天,巩膜组织及结膜下组织中成纤维细胞数量继续增多,体积增大,呈梭形或多角形,炎性细胞数量也有增加。术后第14天,结膜下组织致密,巩膜组织及结膜下组织中成纤维细胞和炎性细胞数量略有下降。术后第21天,结膜下组织致密,巩膜组织及结膜下组织中成纤维细胞和炎性细胞数量下降明显。术后第28天,结膜下组织致密,成纤维细胞和炎性细胞较术后21天没有明显变化,但成纤维细胞多变为长梭形。(5)RT-PCR法检测TGF-β1表达水平结果显示TGF-β1表达量在术后3d为空白对照组的4.08倍,术后7d为空白对照组的5.26倍,此时的表达量为整个检测时间点中的最高水平。TGF-β1表达量在术后7d以后呈现递减的趋势,术后14天为空白对照组的4.03倍,术后21天为空白对照组的1.60倍,术后28天为空白对照组的1.31倍。术后第3、7、14天TGF-β1的表达水平与空白对照组、术后第21、28天的表达水平差异性显著。结论:在犬眼上施行小梁切除术可以达到降低眼压的效果,但术后瘢痕的形成率高,使得手术的长期效果不理想。在术后瘢痕形成的过程中TGF-β1发挥着非常重要的作用。术后对滤过区组织中TGF-β1表达水平的检测结果表明犬眼小梁切除术后的第3、7、14天TGF-β1都处于一个相对高的表达量,而瘢痕是集中于术后14天形成。由此我们认为正是因为TGF-β1在这一段时间内的高度表达促进了成纤维细胞的生长,导致瘢痕的形成。犬眼小梁切除术后滤过区组织中TGF-β1的表达水平与瘢痕的形成是一个正相关的关系。建议在这段时间里要对术眼进行严格的观察和眼压测量,及时给予抗瘢痕药物来维持滤过通道的通畅。
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