脂质代谢紊乱与炎症密切相关,可导致动脉粥样硬化、糖尿病和非酒精性脂肪肝（NAFLD）等疾病。3-硫酸-25-羟化胆固醇（25HC3S）是目前在细胞核内鉴定出的唯一一个具有生物学活性的氧化固醇（Oxysterol）。类固醇硫酸酯酶（STS）催化非活性类固醇的局部脱硫基,在生物活性类固醇形成中发挥关键作用。在Shunlin Ren教授实验室的前期研究基础上,本研究构建了人肝癌细胞Hep G2的STS基因沉默模型,初步探讨了STS基因沉默对25HC3S调节胆固醇脂质代谢及细胞增殖的影响。采用逆转录PCR（RT-PCR）和蛋白质印迹（Western blot）技术确定了最佳沉默效率的si RNA浓度及转染时间。研究结果显示,沉默STS基因的si RNA的浓度为100 n M,转染时间为72 h,STS基因的m RNA相对转录水平为5%,STS蛋白的相对表达量为31%,与无STS基因沉默组相比,分别下降了95%和69%,表明Hep G2细胞的STS基因表达被有效沉默。基于上述STS基因沉默模型,采用RT-PCR和CCK-8方法,分析了STS基因沉默后,25HC3S对脂质代谢关键蛋白表达及细胞活力的影响。研究结果显示:与无STS基因沉默组相比,加入25HC3S（25μM）显著降低了STS基因沉默组Hep G2细胞的脂肪酸合成酶（FAS）、乙酰基辅酶A羧化酶1（ACC1）、3-羟基-3甲基辅酶A还原酶（HMGR）、甾醇调控元件结合蛋白1（SREBP-1）、甾醇调控元件结合蛋白2（SREBP-2）和低密度脂蛋白受体（LDLR）基因的m RNA水平（p＜0.05）;且STS基因沉默组具有较高的细胞活力（p＜0.05）。本研究还优化了THP-1巨噬细胞炎症反应模型,初步探讨了25HC3S抑制脂多糖（LPS）诱导的炎症反应。研究结果显示,与对照组相比,LPS诱导炎症模型组的炎症反应因子白介素-1α（IL-1α）、白介素1β（IL-1β）和白介素-6（IL-6）基因的m RNA水平显著升高（p＜0.05）。提前加入再造模或造模后加入25HC3S（25μM）均能显著抑制LPS诱导升高的IL-1α、IL-1β和IL-6 m RNA水平（p＜0.05）。与造模后加入25HC3S相比,提前加入25HC3S再造模更能显著抑制炎症反应因子基因的转录（p＜0.05）。此外,与LPS炎症模型组相比,干预组的DNA甲基化水平无明显改变（p＞0.05）,提示25HC3S抑制THP-1细胞的炎症反应或许存在其它非DNA甲基化修饰的途径。综上,本文的初步研究结果为深入探究25HC3S调节胆固醇脂质代谢及抑制炎症反应的机制提供了数据参考。