本研究将扩增得到的PPV SC-1株VP2基因产物克隆到pMD18-T Simple载体上，得到了重组质粒pMD-VP2。再将扩增得到的PCV2 SC株ORF2基因插入PPV SC-1株VP2基因的HindⅢ和SacⅠ两个特异限制酶切位点处（分别位于PPV VPLs的N端1／3和C端1／3处），得到重组质粒pPVP2-ORF2．H和pPVP2-ORF2．S。经插入方向鉴定正确后，KpnI、BamHI和ApaLI三酶切质粒pPVP2-ORF2．H和pPVP2-ORF2．S，回收含VP2基因和ORF2基因的目的片段并将重组基因分别连接到含绿色荧光蛋白基因的真核表达载体（pEGFP-C1），得到重组质粒pEGFP．VO．H和pEGFP．VO．S。脂质体转染系统转染Cos7细胞，倒置荧光显微镜观察重组基因表达情况。再将绿色荧光明显的Cos7细胞制备电镜样品。将pEGFP．VO．H和pEGFP．VO．SDNA免疫健康小白鼠，并设立pEGFP-VP2 DNA、pEGFP-ORF2 DNA、pEGFP-C1DNA、猪细小病毒普通疫苗、猪圆环病毒弱毒及生理盐水空白等6个对照组。断尾采血并检测血中T淋巴细胞的动态变化，以及血清中PPV、PCV2抗体变化。结果显示：真核重组表达质粒pEGFP．VO．H和pEGFP．VO．S构建成功：两个重组质粒均能在Cos7细胞中表达出大量荧光；电镜切片中，转染有重组质粒pEGFP．VO．H的样品中观察到了病毒样颗粒，而转染有重组质粒pEGFP．VO．S的样品中没有观察到病毒样颗粒；重组质粒pEGFP．VO．H DNA免疫小白鼠后，CD₃⁺T淋巴细胞在外周血淋巴细胞中的比率均有一定程度的升高，而CD₄⁺、CD₈⁺T淋巴细胞在免疫后7-14d时有所下降之后再升高，而重组质粒pEGFP．VO．S DNA免疫小白鼠后，CD₃⁺T淋巴细胞在外周血淋巴细胞中的比率均也有有所升高，CD₄⁺淋巴细胞在免疫后7-14d时有所下降之后再升高，CD₈⁺T淋巴细胞则没有升高；同时从血清中检测出较高水平的PPV、PCV2特异性抗体。研究结果表明：在PPV VPLs的N端1／3处插入PCV ORF2抗原多肽并不影响其正确形成病毒样颗粒的能力，且能同时诱导产生高水平的抗PPV和PCV2特异性抗体；而VPLs的C端1／3处则不适合抗原表位的插入。