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目的 通过以下两方面初步探讨EBI3的功能：①构建人EBI3的四个缺失突变体确定EBI3蛋白与Sedlin之间相互作用的区域；②探讨EBI3在小鼠脐带血管及胎盘的表达。 方法 ①pACT2-EBI3是我们以Sedlin基因作为诱饵筛选人类胎盘cDNA文库获得的一个克隆。该质粒编码EBI3蛋白氨基酸54～229，而这部分氨基酸的编码序列存在NcoI和BamHI各1个酶切位点。将pACT2-EBI3转化入大肠杆菌TG1中扩增，提取质粒并利用上述两种限制性酶其中之一分别切割，均可得到大小不一的两个片段，每个片段分别回收纯化。大片段在T4DNA连接酶作用下自连，分别形成缺失突变体pEBI3 m1和pEBI3 m2。小片段分别插入pACT2的NcoI和BamHI酶切位点，则得到缺失突变体pEBI3 m3和pEBI3 m4。4个缺失突变体分别转化入大肠杆菌TG1中扩增，提取质粒并进行限制性内切酶酶切鉴定。将以上构建的4个缺失突变体分别与pAS-Sedlin共转化入酵母菌Y190，再进行滤膜印迹实验测定β-半乳糖苷酶活性，即呈蓝色的克隆才是两种蛋白可能相互作用的阳性克隆。②昆明小鼠交配后，以观察到阴道栓计为妊娠第0.5d来确定胚龄，再按照准确的胚龄分别取12.5d、13.5d、14.5d、15.5d、16.5d、17.5d、18.5d的小鼠胎盘及脐带。③使用EBI3多克隆抗体通过免疫组织化学SABC法检测EBI3蛋白的存在，然后通过HE染色和维多利亚蓝-丽春红染色（P／VB双重组合染色）了解脐带组织结构，以便初步确定阳性细胞类型。 结果 ①限制性内切酶酶切鉴定证明所构建质粒为以上4个EBI3突变体重组质粒，β-半乳糖苷酶活性测试表明这4个克隆均为阳性。②12.5～18.5d小鼠胎盘中均未见EBI3表达。③结合脐带血管组织结构观察，12.5～18.5d小鼠脐动、静脉平滑肌细胞呈EBI3免疫阳性反应。随着胚龄改变，免疫反应强度未见明显变化。