【摘 要】
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背景:近年来随着对边缘革蜱种群出没规律研究的提升,发现其种群数量在持续增多、分部泛滥、染蜱率持续增加,其传播的疾病也在持续上升。通过抗蜱疫苗接种的方式“预防”,不仅能控制蜱虫的种群数量和疾病传播,还会降低使用驱虫药的“药物残留”。铁蛋白（Ferritin1Fer1/Ferritin2 Fer2）是蜱体内重要的功能蛋白,也是很具有潜力的抗蜱疫苗候选抗原。目的:分析掌握边缘革蜱铁蛋白基因的序列信息、相
【基金项目】
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新疆维吾尔自治区高校科研计划项目“新疆牛绵羊无浆体和牛环形泰勒虫ELISA试剂盒的建立及应用”（项目编号:XJEDU2020I008）课题主持人:郭庆勇教授（新疆农业大学动物医学学院）；
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背景:近年来随着对边缘革蜱种群出没规律研究的提升,发现其种群数量在持续增多、分部泛滥、染蜱率持续增加,其传播的疾病也在持续上升。通过抗蜱疫苗接种的方式“预防”,不仅能控制蜱虫的种群数量和疾病传播,还会降低使用驱虫药的“药物残留”。铁蛋白（Ferritin1Fer1/Ferritin2 Fer2）是蜱体内重要的功能蛋白,也是很具有潜力的抗蜱疫苗候选抗原。目的:分析掌握边缘革蜱铁蛋白基因的序列信息、相对表达量及其重组蛋白作为抗蜱疫苗候选抗原的潜力。方法:通过克隆、测序等,得到了边缘革蜱fer1/fer2基因完整编码区,分析了fer1/fer2基因的遗传进化关系,其编码氨基酸的同源性、理化性质;通过“饲蜱试验”,顺利完成边缘革蜱完整生活史的饲养并取各发育龄期、吸血期及不同组织器官,借助Q-PCR技术,测定边缘革蜱fer1/fer2基因的相对表达量并构建表达质粒p ET-28a（+）-fer1/fer2,表达、纯化及验证重组Fer1蛋白（r Fer1）/Fer2蛋白（r Fer2）;以r Fer2作为候选抗原,进行体外攻蜱实验,并观察研究其抗蜱效果。结果:成功得到了边缘革蜱fer1/fer2基因完整编码区序列信息,该基因在系统进化关系上与革蜱属最近,该基因编码氨基酸与其他蜱种该蛋白序列间差异很小,具有较强的抗原性,无过敏性;fer1/fer2基因的相对表达量与该蜱虫吸血程度相关,卵及雄蜱中fer1/fer2基因表达很低,fer1基因在半饱血卵巢和马氏管中未表达,fer2基因在刚孵化雄蜱及饱血卵巢中未表达,除此以外均有不同程度的表达;r Fer1/r Fer2大小为25 ku/28 ku,均具有反应原性;r Fer2能够诱导实验兔产生较高滴度的免疫抗体,接蜱实验结果表明,r Fer2免疫实验兔对边缘革蜱成蜱的抗蜱效果为85.5%,主要影响蜱虫卵的形成和发育。结论:本试验成功得到了边缘革蜱fer1/fer2基因的序列信息,该蛋白能引起特异性免疫反应且相对安全;相对表达量的变化与蜱的发育及血餐消化等方面息息相关;Fer1/Fer2蛋白能被原核表达系统高效表达,且r Fer1/r Fer2均具反应原性,r Fer2作为抗原时形成的特异性抗体能与蜱虫体内的该天然蛋白反应而对蜱虫的饱血、产卵及卵的孵化产生巨大的影响,r Fer2是一种具有很好抗蜱效果的抗蜱疫苗候选抗原。
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