【摘 要】
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目的:基于Dectin-1/TLR2相关通路探讨丹皮酚（Paeonol,Pae）缓解白念珠菌（Candida albicans）加重的酒精性肝病（Alcohol liver disease,ALD）炎症损伤的作用机制。方法:本研究采用Lieber-De Carli酒精液体饲料自由饮食的方法建立ALD小鼠模型,探究Pae干预后缓解C.albicans加重的ALD炎症损伤的作用机制。造模周期共计16天
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目的:基于Dectin-1/TLR2相关通路探讨丹皮酚（Paeonol,Pae）缓解白念珠菌（Candida albicans）加重的酒精性肝病（Alcohol liver disease,ALD）炎症损伤的作用机制。方法:本研究采用Lieber-De Carli酒精液体饲料自由饮食的方法建立ALD小鼠模型,探究Pae干预后缓解C.albicans加重的ALD炎症损伤的作用机制。造模周期共计16天,第1-5天,酒精热量摄入为0%,第6-15天,酒精热量摄入为36%。造模完成后,取小鼠血清、结肠和肝脏样本。观察小鼠肝脏形态,通过血清丙氨酸氨基转移酶（Alanine aminotransferase,ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（Aspartate aminotransferase,AST）、甘油三酯（Triglyceride,TG）和总胆固醇（Total cholesterol,T-CHO）水平检测肝脏损伤情况,HE染色观察肝脏与结肠病理学变化,油红O染色观察肝脏脂肪变性情况,PAS染色观察肝脏中C.albicans侵袭情况,稀释涂布法检测肝脏中真菌载量,肝脏免疫荧光检测巨噬细胞F4/80表达,Western blot检测肝脏Dectin-1、TLR2蛋白表达以及q RT-PCR检测dectin-1、tlr2、nlrp3、nf-кb和tnf-α基因表达。另外我们还建立体外C.albicans/酵母多糖（Zymosan,Zym）诱导RAW264.7巨噬细胞炎症模型进一步验证Pae抗ALD炎症损伤的作用机制。采用MTT法检测Pae预处理后细胞活性,稀释涂布法检测念珠菌载量,免疫荧光检测巨噬细胞表面标记物F4/80的表达,Western blot检测巨噬细胞Dectin-1、TLR2蛋白表达以及q RT-PCR检测nlrp3、nf-кb和tnf-α基因表达。结果:经Pae干预后,小鼠血清ALT、AST、TG和T-CHO水平明显降低,肝脏脂肪变性明显减轻且受损的肠粘膜得以修复,肝脏中真菌载量减少,巨噬细胞F4/80表达明显减少,Dectin-1、TLR2蛋白表达及dectin-1、tlr2、nlrp3、nf-кb、tnf-α基因表达也明显下调。体外实验中,RAW264.7细胞经Pae预处理后,念珠菌量减少,巨噬细胞F4/80表达减少,Dectin-1、TLR2蛋白表达与nlrp3、nf-кb、tnf-α基因表达也明显下调。结论:Pae可明显缓解由C.albicans定植下加重的酒精性肝病炎症损伤,其机制与抑制Dectin-1/TLR2相关信号通路有关。
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