金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus,S.aureus）作为一种在食品工业中普遍存的食源性致病菌,能够产生肠毒素从而引发食物中毒。在食品加工过程中,S.aureus极易附着在食品设备的接触面中如有机玻璃（PMMA）、聚氯乙烯（PVC）等,在其表面具有相当强的生物被膜形成能力,通过交叉污染可导致严重的公共卫生问题。因此,本研究选用一种新型安全高效的杀菌技术—光动力杀菌技术,以叶绿素镁钠盐作为光敏剂,来探究叶绿素镁钠盐介导的光动力技术对S.aureus的杀菌作用及其对生物被膜的清除能力。本研究以S.aureus ATCC27661和S.aureus R11为研究对象,首先,探究了不同光敏剂浓度、不同光照时间以及不同处理温度条件下的对S.aureus的灭活效果,通过流式细胞仪、扫描电镜、透射电镜、SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳,进一步探索光动力技术杀菌机制;在此研究的基础上,将该技术应用到生菜中,探究了对生菜的杀菌效果,通过失重率、颜色、叶绿素含量和维生素C含量等指标来表征光动力处理后对生菜的保鲜效果;此外,还探究了光动力技术对非生物表面生物被膜的清除效果,以有机玻璃（PMMA）和聚氯乙烯（PVC）作为附着表面,通过结晶紫染色法观察对生物被膜的清除效果。本研究为灭活S.aureus及清除其生物被膜提供了一个新的方法,其灭活机理也为后续对S.aureus的控制提供了理论基础。本文主要研究内容及研究结果如下:1.叶绿素镁钠盐介导的光动力技术对S.aureus的灭活效果及其杀菌机制的研究。该研究以蓝光发光二极管（LED）作为光源,以叶绿素镁钠盐作为光敏剂,探究了光动力技术对S.aureus的作用效果,通过平板计数法对活菌进行计数。结果表明,光动力技术对S.aureus的杀菌效果表现出显著的光敏剂浓度和光照剂量的依赖性,特别是细菌经过5.0μmol/L叶绿素镁钠盐和光照10 min（1.14J/cm2）处理后,细菌几乎完全被灭活。冷藏（4℃）条件下对S.aureus的灭活效果要显著小于37℃。通过流式细胞仪和扫描电镜发现光动力技术会对S.aureus的细胞膜造成一定的损伤,特别是9.0μmol/L叶绿素镁钠盐和光照5 min处理会导致细菌一定程度的裂解;透射电镜结果发现,光动力技术作用后会导致细胞质紊乱,此外,还发现光动力技术通过攻击S.aureus的DNA和蛋白质,使其降解,从而实现对S.aureus的灭活。2.叶绿素镁钠盐介导的光动力技术在生菜上的应用研究。光动力技术在生菜上表现出快速的杀菌能力。当叶绿素镁钠盐的浓度达到50μmol/L（6.84 J/cm2）时,降低约2.86 log CFU/m L的S.aureus,增加浓度到100μmol/L时,S.aureus被完全灭活（~8.31 log CFU/m L）。总体来说,所有经过光动力技术处理和未经处理的生菜的失重率和色差值显著升高,叶绿素a、叶绿素b以及维生素C的含量显著下降。存储7天后,100μmol/L叶绿素镁钠盐和6.84 J/cm2光照处理组的所有指标与阴性对照组并无显著差异;25℃存储条件下,100μmol/L叶绿素镁钠盐介导的光动力处理组叶绿素a损失22.89%,叶绿素b损失37.84%,维生素C损失60.64%,与阳性对照组差异显著;4℃下存储7天后,各样品的颜色变化差异并不显著,叶绿素a、叶绿素b和维生素C含量与阳性对照组相比存在显著性差异。上述结果表明光动力杀菌技术在灭活生菜上的S.aureus方面具有潜力。3.叶绿素镁钠盐介导的光动力技术对不同附着材料上S.aureus生物被膜的清除作用研究。本次实验以有机玻璃（PMMA）和聚氯乙烯（PVC）为附着载体,探索了叶绿素镁钠盐介导的光动力技术对S.aureus生物被膜的清除效果,采用结晶紫染色法测定生物膜形成量,并运用扫描电镜（SEM）对生物被膜结构进行观察,另外通过对胞外多糖和胞外蛋白的检测,比较分析了不同光敏剂浓度和不同光照时间对生物被膜的清除作用。结果表明PVC表面比PMMA表面更易附着S.aureus生物被膜,当叶绿素镁钠盐浓度为150μmol/L,光照30 min时,PMMA表面被膜残留量为0.72,PVC表面被膜残留量为0.92;延长光照时间至75 min,此时PMMA表面被膜量显著降低88.31%;继续增加光敏剂浓度至175μmol/L,当光照30 min时,PVC表面被膜残留量为0.66,延长光照时间至75 min,此时PVC表面被膜残留量显著降低了87.59%;光动力技术处理后,胞外多糖和胞外蛋白也显著降低。上述结果表明光动力技术对S.aureus生物被膜的清除效果呈光敏剂浓度和光照时间依赖性,证明了叶绿素镁钠盐介导的光动力技术在生物被膜清除方面具有潜力。