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本研究以乳腺上皮细胞系(EpH4-Ev、MAC-T)、大肠杆菌NJ0501(Escherchia coli NJ0501,丑.coli NJ0501)及金黄色葡萄球菌 WX0801(Staphylococcus aureus WX0801,S.aureus WX0801)为研究对象,通过E.coliNJ0501或S.aureus WX0801与乳腺上皮细胞共孵育,探讨大肠杆菌或金黄色葡萄球菌感染引起乳腺的天然免疫反应;并在此基础上,揭示牛磺酸对此天然免疫反应的调节作用及机制。结果如下:1小鼠乳腺上皮细胞EpH4-Ev与牛乳腺上皮细胞MAC-T应对细菌感染能力的比较为探讨EpH4-Ev细胞是否能够用来代替MAC-T细胞作为乳腺炎模型细胞。本研究以EpH4-Ev细胞和MAC-T细胞为研究对象,检测了乳腺炎致病菌(E.coli NJ0501和S.aureus WX0801)与乳腺上皮细胞(EpH4-Ev或MAC-T)共孵育后细胞上清液中 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acety1-β-D-glucosaminidase,NAGase)活性和细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量的变化。研究发现:乳腺炎致病菌能够感染上述两种乳腺上皮细胞并引起相关的炎症反应,而牛磺酸处理则对致病菌在这两种细胞上引起的炎症反应都有一定的缓解作用。乳腺炎致病菌感染EpH4-Ev细胞2h后细胞上清液中NAGase的活性和细胞中ROS的含量都显著升高(P<0.05),这一结果与致病菌感染MAC-T细胞得到的结果一致。结果表明:EpH4-Ev细胞可以用来代替MAC-T细胞作为乳腺炎模型细胞。2大肠杆菌感染乳腺上皮细胞引起的天然免疫及牛磺酸的调节作用为探讨大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)引起的乳腺上皮细胞的天然免疫反应及牛磺酸对其调理作用,本研究以乳腺上皮细胞和E.coliNJ0501为研究对象,首先检测E.coli NJ0501与乳腺上皮细胞共孵育后细胞产生的炎性变化;在此基础上探究牛磺酸对E.coli感染乳腺上皮细胞引起的天然免疫应答的影响。研究发现:E.coli NJ0501能够感染乳腺上皮细胞并引起炎症反应,牛磺酸处理对其引起的炎症反应有一定的减缓作用。E.coluNJ0501感染乳腺上皮细胞2 h后Toll样受体(toll-like receptor,TLR)2、TLR4、髓样分化因子(myeloiddifferentiationfactor88,MyD88)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)mRNA 表达水平(P<0.05)和TLR2、TLR4、MyD88蛋白表达水平及细胞上清液中NAGase活性、细胞中ROS含量、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量显著提高(P<0.05);超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)的水平的显著下降(P<0.05);牛磺酸预处理细胞能显著降低TLR2、TLR4、MyD88、iNOS、TNF-α、IL-1β 的 mRNA 和 TLR2、TLR4、MyD88 蛋白表达水平(P<0.05),显著降低细胞培养液上清中NAGase的活性和细胞中ROS与MDA的含量(P<0.05),显著提高SOD活性和T-AOC的水平(P<0.05)。研究结果表明:牛磺酸可以减弱因E.coe.NJ0501感染而引起的乳腺上皮细胞的炎性变化。3金黄色葡萄球菌感染乳腺上皮细胞引起的天然免疫及牛磺酸的调节作用为探讨金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,S.aureus,aaureus)感染乳腺上皮细胞后引起的天然免疫反应及牛磺酸对其的调理作用,本研究以乳腺上皮细胞和S.aureus WX0801为研究对象,首先检测S.aaureusWX0801与乳腺上皮细胞共孵育后细胞产生的炎性变化;在此基础上探究牛磺酸对S.aureus感染乳腺上皮细胞引起的天然免疫应答的影响。研究发现:S.aureus WX0801能够感染乳腺上皮细胞并引起炎症反应,牛磺酸处理对其引起的炎症反应有一定的降低作用。S.aureus WX0801感染细胞2h后TLR2、TLR4、MyD88、iNOS、TNF-αmRNA、TLR2 蛋白表达水平(P<0.05)及细胞上清液中NAGase活性、细胞中ROS与MDA的含量显著提高(P<0.05);SOD活性、T-AOC活性显著下降(P<0.05);而牛磺酸预处理细胞则能显著降低TLR2、TLR4、MyD88、iNOS、TNF-α的mRNA和TLR2蛋白的表达水平(P<0.05),显著降低细胞培养液上清中NAGase的活性和细胞中ROS与MDA的含量(P<0.05),显著提高SOD和T-AOC的活性(P<0.05)。研究结果表明:牛磺酸可以减弱因S.aureus WX0801感染而引起的乳腺上皮细胞的炎性变化。