XMU-MP-1通过Hippo信号通路对胆管癌细胞作用及其机制的研究

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目的:胆管癌是世界常见消化道恶性肿瘤之一,发病率逐年升高。大部分临床胆管癌患者发现时已到达中晚期,治疗效果不佳。Hippo信号通路在各哺乳动物细胞内作用较为稳定,其核心组分在各种细胞中均发挥着调控细胞生长的重要作用。本研究借探索XMU-MP-1通过Hippo信号通路对胆管癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响,通过检测下游蛋白表达水平探究其作用机制。期望能对未来胆管癌的靶向治疗提供更多参考依据。方法:1、选用CCK-8实验,依相关文献及试剂说明,调整完全培养基中XMUMP-1浓度(0、0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.60、3.20μM),共分为8组,于24h、48h、72h检测其对胆管癌细胞增殖活性的影响;2、依CCK-8实验结果选用适宜XMU-MP-1浓度。依据培养基不同分2组,实验组(含XMU-MP-1和胎牛血清)、对照组(胎牛血清),分别培养胆管癌细胞;3、Transwell侵袭实验检测XMU-MP-1对胆管癌细胞体外侵袭能力的影响;4、细胞划痕实验检测XMU-MP-1对胆管癌细胞体外迁移能力的影响;5、Western Blot检测2组中XMU-MP-1作用位点下游Hippo信号通路中相关因子LATS1、LATS2、YAP、TAZ蛋白表达情况。结果:1、CCK-8实验发现,本次实验浓度范围内,胆管癌细胞增殖活性随XMUMP-1培养浓度及培养时间的增加而增加;2、Transwell侵袭实验发现,XMU-MP-1可有效提升胆管癌细胞的侵袭能力;3、细胞划痕实验发现,XMU-MP-1可有效提升胆管癌细胞的迁移能力;4、Western Blot实验结果表明,XMU-MP-1处理后,胆管癌细胞中LATS1、LATS2蛋白表达降低,YAP、TAZ蛋白表达升高。结论:1、XMU-MP-1可有效增强胆管癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力;2、XMUMP-1可通过抑制Hippo通路,下调LATS1、LATS2蛋白表达以及上调YAP、TAZ蛋白表达,来实现对胆管癌细胞增殖、侵袭、迁移的促进作用。
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