产气荚膜梭菌（Clostridium perfringens,C.perfringen）感染导致的畜禽坏死性肠炎（Necrotic Enteritis,NE）是广泛流行的重要疾病之一,每年都会造成巨大的经济损失,严重威胁养殖业的发展。目前,抗菌药物或饲料添加剂仍是防治NE的首选,但抗菌药物长期大量和不规范使用导致的日益严重的细菌耐药性问题,再加上肉鸡饲养休药期内抗生素使用的局限性,这就给NE的防治提出了巨大挑战。针对全世界广泛流行的细菌耐药性问题,不同国家和地区正在采取相应对抗措施,在我国农业农村部倡导“禁抗”、“限抗”和“减抗”政策背景下,为了进一步迎合绿色、健康和生态养殖需求,开发防治C.perfringen感染肉鸡NE的替代抗生素策略或新型药物迫在眉睫。A型和C型C.perfringen是导致NE的主要血清型致病菌,菌体借助于四型菌毛系统（Type IV Pili,TFP）功能直接黏附于宿主肠道细胞上,在致病过程发挥关键作用。研究表明,TFP敲除或缺失后,C.perfringen的致病力显著下降甚至丧失,但菌体的正常生长未受影响。通过以细菌非生命必需成分为靶标,靶向C.perfringen TFP进行替代抗生素药物筛选和新兽药研发成为一种理想的解决策略。中药是中华民族的瑰宝,其有效性已然经历过临床用药长久的检验,并且在近些年来世界卫生安全事件中多次发挥重大积极作用。相比于传统抗生素,来源于天然植物的中药活性成分,具有药理活性多、来源明确、低诱导耐药性等优点,具有十分广阔的研究价值与应用前景。本实验室前期研究表明,通过建立的TFP抑制剂筛选平台,经过大量筛选发现来自中药活性成分根皮素能够显著抑制TFP介导的黏附功能,在体外具有良好的抗菌活性,对C.Perfringen感染引发的肉鸡NE具有良好的治疗效果。在前期研究基础之上,根据中药活性成分逆溯中药材,发现根皮素在大多数天然植物中保有量小,难以提取和有效利用。经查阅文献和初步筛选发现,多穗石柯的主要成分为根皮苷,且含量相对丰富,易于提取,根皮苷在肠道内经酶解后会完全转化为根皮素。因此,本研究拟选择成药性良好的多穗石柯,通过处方工艺研究制备防治NE和适宜养鸡业群体给药方式的中药口服液制剂。首先,以根皮苷含量为指标筛选多穗石柯的药材产地,采用正交试验确定最佳提取工艺;根据根皮苷的理化性质及口服液剂型特点进行辅料筛选,确定口服液处方;经实验室小试及中试生产试验,确定的多穗石柯口服液处方组分及制备工艺如下:多穗石柯药材加入投药量25倍体积纯化水预先浸泡过夜,加热回流提取2次,每次2 h,将提取液过滤除去药渣,合并滤液,解压浓缩至相对密度＞1.04,按照处方量加入无水亚硫酸钠,调节p H值为7.0,加水补至全量后进行灌装灭菌。其次,通过高效液相色谱法检测多穗石柯口服液中根皮苷的含量并进行方法学验证,通过加速试验和长期试验考察,检测了多穗石柯口服液的稳定性,制订了多穗石柯口服液的有效期,初步建立了多穗石柯口服液的质量标准。接下来,通过生物被膜、滑动运动和细胞黏附等体外表型鉴定试验验证多穗石柯口服液对TFP功能的抑制作用。最后,通过建立人工感染肉鸡坏死性肠炎模型,考察多穗石柯口服液对鸡坏死性肠炎的预防作用,检测料肉比、免疫器官指数、回肠组织病理切片及回肠菌落定植数等指标,发现多穗石柯口服液对C.Perfringen感染鸡NE具有良好的预防效果。综上,本研究成功制备出含量稳定、疗效确实的多穗石柯口服液;它能够显著抑制C.Perfringen的滑动运动、生物被膜形成和细胞黏附作用,进而抑制TFP的功能;对C.Perfringen感染导致的肉鸡NE具有良好的预防效果。本研究将为兽医临床上耐药菌的感染与防控提供一种新的药物研发策略,也为C.Perfringen感染导致的NE提供了一种有效的中药制剂。