鸡毒霉形体不同菌株的药敏实验及耐药机制的研究

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鸡毒霉形体感染是当前影响禽类生产的常见疾病之一。近年来由于长期使用或滥用抗菌类药物,使得霉形体耐药菌株不断增加,给临床治疗和用药带来困难,同时由于用药增加及药物在禽产品中的残留,也给公共卫生安全带来了隐患。了解鸡毒霉形体国内分离株的耐药情况,探讨耐药性形成机制,对鸡毒霉形体感染的综合性防治及其保障禽类产品的公共卫生安全均具有重要意义。本研究采用微量稀释法测定了20余株鸡毒霉形体对六种抗生素的最低抑菌浓度,从中筛选出耐药性菌株;用四环素诱导耐药性产生;以PCR法扩增tetM和gyrA基因,并对gyrA基因进行序列测定和比对,探讨了gyrA基因的变异与耐药性生成的关系。结果表明,鸡毒霉形体国内分离株对抗菌药物的敏感性有一定的地区性特点,来自同一地区的分离株对药物的敏感程度较接近,这可能与抗生素使用的频度有关。gyrA基因测序结果表明,部分菌株的gyrA基因在QRDR区发生碱基突变,部分为沉默突变,没有导致氨基酸发生改变。但是有些碱基突变,导致了与耐药性有关的氨基酸突变,在碱基第249位发生了G→T突变,引起第83位氨基酸由丝氨酸变为异亮氨酸;在碱基第270位发生了T→G突变,引起第90位氨基酸由缬氨酸变为甘氨酸,其他部分菌株也有不同形式的氨基酸突变,结果表明,由于在染色体DNA旋转酶gyrA基因中存在着点突变,造成了大多数霉形体菌株对喹诺酮类药物不同程度的耐药。
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