选题依据:抑郁症是一种情绪低落的精神疾病,其发病机理尚不清楚。最近的研究发现,肠道菌群的失调与抑郁症的发生发展有很大的关系。中药通常通过临床口服给药,中药有效成分在抵达胃肠道后,必然会与肠道菌群接触,一方面,中药活性成分可以调节肠道菌群的结构和代谢,另一方面,肠道菌群可以将药物的活性成分转化成相应的药理或毒理成分而发挥作用。逍遥散作为抗抑郁名方,前期以血清药物化学为指导,发现其君药柴胡多炔类成分容易入血,在体外单胺递质再摄取中表现出较强活性。随后对柴胡石油醚部位抗抑郁作用研究,发现具有显着的抗抑郁作用。然而,基于肠道菌群作用的柴胡石油醚部位药效物质基础及作用机制尚未阐明。目的:本文通过柴胡石油醚部位与CUMS模型大鼠肠道菌群的相互作用研究,为揭示基于肠道菌群作用的柴胡石油醚部位药效物质基础及作用机制提供实验依据。方法:1、采用LC-MS技术对柴胡石油醚部位化学成分进行全面表征,为进一步阐明柴胡石油醚部位抗抑郁作用的物质基础提供了依据。2、建立慢性温和不可预知应激(CUMS)模型大鼠,将柴胡石油醚部位分别与正常及CUMS模型大鼠肠道菌群恒温厌氧培养,采用LC-MS技术鉴定可能的代谢物。3、采用16S rRNA基因测序技术,探究柴胡石油醚部位对CUMS模型大鼠肠道菌群结构的影响。4、采用LC-MS代谢组学技术,探究柴胡石油醚部位对CUMS模型大鼠肠道菌群功能的影响。结果:1、采用LC-MS方法首次对柴胡石油醚部位化学成分进行定性分析,在正负离子模式下共鉴定出58种化学成分,包括16种柴胡皂苷、10种香豆素、8种柴胡多炔、8种木脂素、8种脂肪酸、4种黄酮、2种色原酮、1种尿嘧啶、1种木糖醇,该结果基本阐明柴胡石油醚部位的物质基础。2、正常大鼠肠道菌群可将柴胡石油醚部位活性成分转化成双氧化甲基化代谢产物、氧化硝基共轭产物、脱水精氨酸结合产物、水合还原产物、精氨酸结合产物、水合氧化产物等;CUMS模型大鼠肠道菌群对柴胡石油醚部位活性成分代谢的产物与正常大鼠肠道菌群的代谢物基本一致,可能是由于正常大鼠肠道菌群与CUMS模型大鼠肠道菌群的主要菌群构成相同。但是正常大鼠肠道菌群与CUMS模型大鼠肠道菌群对柴胡石油醚部位的代谢能力存在较大差异,柴胡石油醚部位活性成分在CUMS模型大鼠代谢速率显著高于正常大鼠,这可能是由于抑郁导致的肠道菌群失衡所引起的。3、柴胡石油醚部位给药可以增加CUMS模型大鼠微生物群的多样性,回调CUMS模型大鼠肠道微生物中罗斯氏菌属、毛形杆菌属、苍白杆菌属、普雷沃氏菌属、贪铜菌属的相对丰度,涉及的机制可能与免疫、炎症、维生素D缺乏及短链脂肪酸有关。4、盲肠内容物中鉴定出与抑郁症相关的20种生物标志物,柴胡石油醚部位干预后可回调16种,涉及的途径包括初级胆汁酸生物合成、牛磺酸和亚牛磺酸代谢、精氨酸和脯氨酸代谢、柠檬酸盐循环(TCA循环)、乙醛酸和二羧酸代谢等代谢通路。结论:柴胡石油醚部位的肠道菌群代谢与治疗抑郁症密切相关。一方面大鼠肠道菌群对柴胡石油醚部位活性成分具有生物转化功能。另一方面柴胡石油醚部位能通过调节紊乱的肠道菌群结构和功能发挥抗抑郁疗效。