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目的:
通过研究食管癌（esophagealcancer，ECA）患者体内髓源性抑制细胞(myeloid-derivedsuppressorcells，MDSCs)、替代途径活化的巨噬细胞(alternativelyactivatedmacrophages，M2)和Th2细胞的变化，探讨其在ECA致病机制中发挥的作用。
方法:
1.采用流式细胞术（flowcytometry，FCM）检测并比较ECA患者和健康对照者外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)中MDSCs的比率。
2.通过实时荧光定量PCR（quantitativereal-timePCR，qRT-PCR）检测ECA患者和健康对照者外周血精氨酸酶1（arginase1，Arg1）mRNA相对表达量;采用酶联免疫吸附试验(enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)检测血浆Arg1蛋白表达水平。分析ECA患者外周血Arg1表达水平与MDSCs之间的相关性。
3.收集ECA患者癌组织和癌旁组织，石蜡包埋并切片，通过苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosinstaining，HE)和免疫组织化学染色(immunohistochemistry，IHC)观察巨噬细胞的浸润情况。
4.采用qRT-PCR检测ECA患者和健康对照者PBMC中Th1、Th2细胞相关细胞因子和转录因子（IFN-γ、T-bet、IL-4、GATA3、IL-10、IL-12）的mRNA表达水平;采用ELISA法检测ECA患者和健康对照者血浆IFN-γ、IL-4、IL-6、IL-13等浓度。分析ECA患者外周血中所测得的细胞因子间的相关性。
结果:
1.检测了外周循环中MDSCs的表型即HLA-DR-CD14-CD33+CD11b+细胞;ECA组与健康对照组相比，MDSCs的比率明显上调（P＜0.001）。而且，进展期癌患者MDSCs的比率高于早期癌患者(P＜0.05)，有淋巴结转移的患者MDSCs比率高于无淋巴结转移的患者（P＜0.001）。
2.与健康对照组相比，ECA组患者外周血Arg1mRNA表达水平和血浆蛋白水平均显著升高（P＜0.01;P＜0.001），且分别与循环中的MDSCs比率呈现正相关(r=0.74，P＜0.001;r=0.49，P＜0.01)。
3.在ECA患者肿瘤组织局部观察到CD68+、CD163+巨噬细胞的大量存在，且数量显著高于癌旁对照组织，且ECA患者CD163+细胞的表达与MDSCs比率密切相关。
4.ECA组患者PBMC中IL-4和GATA3mRNA相对表达量均显著高于健康对照组（P=0.0174;P=0.0376），而IFN-γ、IL-10、IL-12mRNA水平均显著低于健康对照组（P＜0.05）。但两试验组T-betmRNA的相对表达量无显著性差异，与健康对照组相比，ECA组患者血浆IL-13显著升高（P=0.0003），IL-6浓度变化相似（P=0.0312）。此外，ECA患者Arg1浓度与IL-13、IL-4mRNA表达水平均呈正相关（r=0.455，P=0.017;r=0.510，P=0.009），与IFN-γmRNA表达水平呈负相关(r=-0.381，P=0.038)。而且，血浆IL-13浓度与IL-4mRNA表达水平也呈正相关(r=0.484，P=0.016)。
结论:
1.在ECA患者外周血中观察到了MDSCs(HLA-DR-CD14-CD33+CD11b+细胞)的上调，且与肿瘤临床病理分期及淋巴结转移有关。MDSCs功能性产物Arg1表达也上调，且与MDSCs比率正相关，说明MDSCs及其功能性产物Arg1可能参与到ECA的致病过程中，并有可能反映ECA的病情严重程度。
2.在ECA患者肿瘤局部组织中，CD68+、CD163+细胞大量浸润，且CD163+细胞的表达与MDSCs比率密切相关，推测其可能也参与到ECA的致病过程中。
3.ECA患者外周血中IL-4、GATA3mRNA相对表达量升高，血浆IL-13和IL-6浓度升高，而IFN-γmRNA表达水平降低，推测ECA患者体内Th2细胞占优势。相关性结果提示，IL-4、IL-13以及Arg1是调节MDSCs和M2型巨噬细胞的重要因子，且与Th2细胞极化状态密切相关。