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背景化疗药物一般通过诱导肿瘤细胞发生凋亡而发挥抗肿瘤活性，但也经常导致肿瘤患者各种不良副反应的发生。2017年，邵峰院士在Nature发表文章指出，肿瘤患者化疗过程中的毒副作用主要是化疗药物通过Caspase-3/GSDME途径介导正常细胞发生焦亡实现的；而我们课题组的前期研究提示苦参碱可能能够抑制正常细胞的焦亡减少化疗的副反应。
目的研究化疗药诱导结直肠癌细胞发生凋亡和正常肠上皮细胞发生焦亡的差异，探讨苦参碱通过Caspase-3/GSDME途径抑制细胞焦亡的分子机制，临床上观察复方苦参注射液对结直肠癌患者FOLFOX6化疗副反应的影响。
方法使用FOLFOX6方案化疗药处理结直肠癌细胞和正常肠上皮细胞，通过光学显微镜观察两组细胞死亡形态的差异，通过ATP细胞活力检测试剂盒及乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒检测两组细胞在化疗药处理前后ATP活性的变化和LDH释放水平的变化，通过蛋白免疫印迹法检测两组细胞在化疗药处理前后Caspase-3和GSDME的剪切激活情况，从而确定化疗药诱导结直肠癌细胞发生凋亡和正常肠上皮细胞发生焦亡的差异。通过MTT实验考察苦参碱对结直肠癌细胞及正常肠上皮细胞的毒性；使用化疗药加苦参碱处理两组细胞，通过光学显微镜观察、ATP活力检测、LDH释放水平检测等方法检测苦参碱对正常肠上皮细胞焦亡的抑制作用。临床上将来自天津市人民医院消化科、肛肠科门诊及住院病房60例符合纳入标准的术后病理证实Ⅱ期、Ⅲ期的结直肠癌患者随机分为FOLFOX6化疗方案＋复方苦参注射液的治疗组和单纯FOLFOX6化疗方案对照组，每组各30例，观察分析两组患者治疗前后的肿瘤标志物、外周血象数值、疼痛情况及其消化道不良反应。
结果显微镜下观察发现FOLFOX6方案化疗药能够诱导结直肠癌细胞HCT106细胞皱缩，但有完好的细胞膜；而HCoEpiC细胞的细胞膜被穿孔损坏；加入化疗药后HCT106细胞和HCoEpiC细胞的ATP活性均显著下降；HCT106细胞的LDH释放量轻微增加，而HCoEpiC细胞LDH释放量显著增加。通过蛋白免疫印迹法发现化疗药处理后HCoEpiC细胞能够检测到被激活的Cleaved-Caspase-3和被剪切过的GSDME，但在HCT106细胞中能够检测到被激活的Cleaved-Caspase-3，但检测不到被剪切过的GSDME。MTT法检测发现苦参碱加化疗药物处理的HCoEpiC细胞IC50值显著高于HCT106细胞；苦参碱加化疗药处理HCT106细胞和HCoEpiC细胞后，通过光学显微镜观察发现苦参碱加化疗药处理能够诱导HCT106细胞皱缩，但有完好的细胞膜；而HCoEpiC细胞的大多细胞膜没有被穿孔损坏，细胞死亡现象出现较少，ATP法检测发现加入苦参碱后HCT106细胞的活性仍然下降，而HCoEpiC细胞的活性显著升高，LDH检测发现加入苦参碱后HCT106细胞的LDH释放量轻微增加，HCoEpiC细胞的LDH释放量明显下降。
临床上两组的年龄、性别、病理分期经统计学分析，差异无统计学意义，说明组间具有可比性。两组治疗后血清CEA、血清CA19-9、血清CA-724值差异比较无统计学意义(P＞0.05)，提示复方苦参注射液不影响化疗抑制肿瘤标记物的效果。两组治疗后白细胞值、血小板值较治疗前均有显著下降(P＜0.01)，两组治疗后白细胞值比较有显著差异(P＜0.01)，治疗组优于对照组；两组治疗后血小板值比较无统计学意义(P＞0.05)，提示复方苦参注射液能够减轻结直肠癌化疗后白细胞计数下降的程度，不能减轻结直肠癌化疗后血小板计数下降的程度。两组在治疗后VAS疼痛程度评分上有显著差异(P＜0.01)，治疗组优于对照组，提示复方苦参注射液能够减轻结直肠癌化疗后疼痛程度。两组在治疗后恶心呕吐情况比较有统计学意义(P＜0.05)，治疗组优于对照组；在腹泻反应比较无统计学意义(P＞0.05)，提示复方苦参注射液能够减轻结直肠癌化疗后恶心呕吐程度，不能够减轻化疗后腹泻反应程度。
结论苦参碱能够显著抑制正常肠上皮细胞HCoEpiC细胞的焦亡，但基本不影响结直肠癌细胞HCT106细胞的凋亡，提示临床上可以使用苦参碱减轻化疗的不良反应。临床上复方苦参注射液联合化疗方案治疗结直肠癌Ⅱ期、Ⅲ期术后患者，能够有效减轻结直肠癌化疗后白细胞计数下降的程度，缓解疼痛，减轻化疗后恶心呕吐反应。
目的研究化疗药诱导结直肠癌细胞发生凋亡和正常肠上皮细胞发生焦亡的差异，探讨苦参碱通过Caspase-3/GSDME途径抑制细胞焦亡的分子机制，临床上观察复方苦参注射液对结直肠癌患者FOLFOX6化疗副反应的影响。
方法使用FOLFOX6方案化疗药处理结直肠癌细胞和正常肠上皮细胞，通过光学显微镜观察两组细胞死亡形态的差异，通过ATP细胞活力检测试剂盒及乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒检测两组细胞在化疗药处理前后ATP活性的变化和LDH释放水平的变化，通过蛋白免疫印迹法检测两组细胞在化疗药处理前后Caspase-3和GSDME的剪切激活情况，从而确定化疗药诱导结直肠癌细胞发生凋亡和正常肠上皮细胞发生焦亡的差异。通过MTT实验考察苦参碱对结直肠癌细胞及正常肠上皮细胞的毒性；使用化疗药加苦参碱处理两组细胞，通过光学显微镜观察、ATP活力检测、LDH释放水平检测等方法检测苦参碱对正常肠上皮细胞焦亡的抑制作用。临床上将来自天津市人民医院消化科、肛肠科门诊及住院病房60例符合纳入标准的术后病理证实Ⅱ期、Ⅲ期的结直肠癌患者随机分为FOLFOX6化疗方案＋复方苦参注射液的治疗组和单纯FOLFOX6化疗方案对照组，每组各30例，观察分析两组患者治疗前后的肿瘤标志物、外周血象数值、疼痛情况及其消化道不良反应。
结果显微镜下观察发现FOLFOX6方案化疗药能够诱导结直肠癌细胞HCT106细胞皱缩，但有完好的细胞膜；而HCoEpiC细胞的细胞膜被穿孔损坏；加入化疗药后HCT106细胞和HCoEpiC细胞的ATP活性均显著下降；HCT106细胞的LDH释放量轻微增加，而HCoEpiC细胞LDH释放量显著增加。通过蛋白免疫印迹法发现化疗药处理后HCoEpiC细胞能够检测到被激活的Cleaved-Caspase-3和被剪切过的GSDME，但在HCT106细胞中能够检测到被激活的Cleaved-Caspase-3，但检测不到被剪切过的GSDME。MTT法检测发现苦参碱加化疗药物处理的HCoEpiC细胞IC50值显著高于HCT106细胞；苦参碱加化疗药处理HCT106细胞和HCoEpiC细胞后，通过光学显微镜观察发现苦参碱加化疗药处理能够诱导HCT106细胞皱缩，但有完好的细胞膜；而HCoEpiC细胞的大多细胞膜没有被穿孔损坏，细胞死亡现象出现较少，ATP法检测发现加入苦参碱后HCT106细胞的活性仍然下降，而HCoEpiC细胞的活性显著升高，LDH检测发现加入苦参碱后HCT106细胞的LDH释放量轻微增加，HCoEpiC细胞的LDH释放量明显下降。
临床上两组的年龄、性别、病理分期经统计学分析，差异无统计学意义，说明组间具有可比性。两组治疗后血清CEA、血清CA19-9、血清CA-724值差异比较无统计学意义(P＞0.05)，提示复方苦参注射液不影响化疗抑制肿瘤标记物的效果。两组治疗后白细胞值、血小板值较治疗前均有显著下降(P＜0.01)，两组治疗后白细胞值比较有显著差异(P＜0.01)，治疗组优于对照组；两组治疗后血小板值比较无统计学意义(P＞0.05)，提示复方苦参注射液能够减轻结直肠癌化疗后白细胞计数下降的程度，不能减轻结直肠癌化疗后血小板计数下降的程度。两组在治疗后VAS疼痛程度评分上有显著差异(P＜0.01)，治疗组优于对照组，提示复方苦参注射液能够减轻结直肠癌化疗后疼痛程度。两组在治疗后恶心呕吐情况比较有统计学意义(P＜0.05)，治疗组优于对照组；在腹泻反应比较无统计学意义(P＞0.05)，提示复方苦参注射液能够减轻结直肠癌化疗后恶心呕吐程度，不能够减轻化疗后腹泻反应程度。
结论苦参碱能够显著抑制正常肠上皮细胞HCoEpiC细胞的焦亡，但基本不影响结直肠癌细胞HCT106细胞的凋亡，提示临床上可以使用苦参碱减轻化疗的不良反应。临床上复方苦参注射液联合化疗方案治疗结直肠癌Ⅱ期、Ⅲ期术后患者，能够有效减轻结直肠癌化疗后白细胞计数下降的程度，缓解疼痛，减轻化疗后恶心呕吐反应。