【摘 要】
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目的从噬菌体表面显示随机肽库中筛选日本血吸虫辐照尾蚴抗原模拟表位。方法用Sepharose4B亲和层析法,从日本血吸虫辐照尾蚴免疫鼠血清中纯化抗体,经正常血吸虫尾蚴抗原吸收
【机 构】
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南京医科大学病原生物学系,安徽省寄生虫病防治研究所,南京医科大学病原生物学系,安徽省寄生虫病防治研究所,安徽省寄生虫病防治研究所,安徽省寄生虫病防治研究所,安徽省寄生虫病防治研究所,
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目的从噬菌体表面显示随机肽库中筛选日本血吸虫辐照尾蚴抗原模拟表位。方法用Sepharose4B亲和层析法,从日本血吸虫辐照尾蚴免疫鼠血清中纯化抗体,经正常血吸虫尾蚴抗原吸收后,用于12肽噬菌体随机肽库的免疫筛选。经三轮筛选,随机挑取20个噬菌体克隆,经DNA序列分析后,对各独立表位进行免疫学鉴定。结果DNA序列分析,获得4个有序列重复的噬菌体克隆;Dot-ELISA分析显示,4个克隆均能被辐照尾蚴免疫血清中IgM型抗体识别,反应强度有一定差别;P1和P2克隆还能被IgG型抗体识别。结论从噬菌体随机肽库中成功筛选到日本血吸虫辐照尾蚴抗原模拟表位。
Objective To screen the mimic epitope of cercaria antigen irradiated by Schistosoma japonicum from random peptide library displayed on phage surface. Methods Antibodies were purified from Sera of mice immunized with Schistosoma japonicum by Sepharose 4B affinity chromatography and purified by Sepharose 4B antigen immunization. After three rounds of screening, 20 phage clones were randomly selected and identified by DNA sequence analysis. Results DNA sequence analysis showed that 4 phage clones with sequence repeats were obtained. Dot-ELISA analysis showed that all 4 clones could be recognized by IgM antibody in irradiated cercaria immune serum, and the reaction intensities were different. P1 and P2 clones were also able Recognized by IgG type antibodies. Conclusion The mimic epitopes of cercaria antigen irradiated by Schistosoma japonicum were successfully screened from phage random peptide library.
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