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【中图分类号】R446.6 【文献标识码】A 【文章编号】1550-1868（2015）03
调节性T细胞（CD4+CD25+regulatory T cell， Treg）是近年来发现的一种新型的具有免疫负性调节作用的T淋巴细胞亚群，本研究通过流式细胞术检测AP患者外周血单个核细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg及血清IL-2、TGF-β1水平的表达，探讨其与急性胰腺炎（AP）的相关性。
1.对象和方法
1.1研究对象
选择2013年1月至2014年5月本院住院的急性胰腺炎患者47例（男21例，女26例），平均（49.27±8.19）岁。选取同期健康体检者20名作为健康对照组，均来源于门诊体检人员或志愿者，平均（32.33±7.26）岁。两组研究对象的年龄及性别构成比较均无显著性意义（P>0.05）。
1.2 观察指标及方法
所有受试者均禁食8小时以上，于入院24小时内抽取清晨空腹采肘静脉血5毫升 （肝素抗凝），用于下列指标的测定。
1.2.1 CD4+CD25+Foxp3+Treg的测定：采用流式细胞术检测，记录CD4+CD25+，CD4+Foxp3+，CD4+CD25+Foxp3+占CD4+T细胞的百分比，并以此作为评价外周血中Treg的表达状态。
1.2.2血清IL-2、TGF-β1水平：采用ELISA双抗体夹心法测定IL-2、TGF-β1水平。
1.3统计学处理
采用SPSS 11.5软件进行统计，所有数据行描述性分析﹑正态性检验及方差齐性检验，在描述性分析中，对于正态分布的数据， 以均数±标准差（x±s）表示，正态分布数据经方差齐性检验后采用独立样本的t检验，相关性分析采用sperman检验，P<0.05表示差异有统计学意义。
2.结果
2.1 两组PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg表达情况
2.2 两组血清IL-2、TGF-β1水平情况
2.3 相关性分析
相关性分析表明：CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与血清IL-2水平呈明显正相关（r分别为 0.711、0.834，P<0.01）；CD4+CD25+Foxp3+ Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与血清TGF-β1水平亦呈明显负相关（r分别为- 0.421、-0.749，P<0.01）。
3.讨论
CD4+CD25+Treg细胞可通过分泌TGF-β1、IL-2、IL-4等抑制性细胞因子，抑制T细胞增殖，发挥免疫抑制作用。TGF-β具有广泛生物学功能，能够调节细胞的生长、分化、炎症反应及免疫功能，TGF-β1是TGF-β的主要亚型。已有研究证实，TGF-β1通路在急性胰腺炎的发生发展中发挥重要作用[1]。目前，CD4+CD25+Foxp3+ Treg在SP中作用的研究报道相对较少。其是否通过TGF-β1发挥作用仍不清楚。本研究以CD4+CD25+Foxp3+作为Treg指标，采用流式细胞术检测SP患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+ Treg表达情况，结果显示，SP患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg数目及其与CD4+ T细胞比值均明显低于正常组，提示SP患者存在明显的免疫调节功能紊乱，CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平的下调可能是AP发生发展的重要机制。
Treg作用机制之一是通过分泌至细胞外或表达于细胞表面的多种细胞因子发挥免疫抑制作用，包括IL-2和TGF-β1。IL-2是T细胞产生的一种细胞免疫调节因子，是机体免疫调节网络中的核心物质，其水平高低可作为机体细胞免疫功能的重要指标[2]。IL-2以自分泌、旁分泌和內分泌形式作用于T淋巴细胞，被认为是T淋巴细胞增殖的必要条件，能正反馈增加CD25表达。CD4+CD25+Treg能通过调节TGF-β1抑制多种细胞因子的释放，从而抑制炎症反应[3]。而TGF-β1可通过直接或间接影响IL-2发挥“负调节”为主的免疫平衡作用。本研究显示，AP患者血清IL-2水平明显低于正常组，而血清TGF-β1水平较正常组明显升高，提示IL-2、TGF-β1可能也参与AP的发生和（或）发展，可能是AP的发生和（或）发展过程中的一种炎性细胞因子。本研究还显示，CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+
Treg绝对数均与血清IL-2水平呈明显正相关，与血清TGF-β1水平亦呈明显负相关，提示AP患者可能通过调节IL-2及TGF-β1水平发挥作用。
参考文献
[1]荣忠厚，吴河水，杨智勇，等.重症急性胰腺炎患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞的动态变化研究.中华普通外科杂志，2010，25：992-994.
[2]Annunziato F，Cosmi L，Santarlasci V，et a1.Phenotypic and functional features of human Thl7 cells[J].J Exp Med.2007，204（8）：1849-1861.
[3]Shen LS， Wang J， Shen DF，et al.CD4（+）CD25（+）CD127 （low/-） regulatory T cells express Foxp3 and suppress effector T cell proliferation and contribute to gastric cancers progression [J].Clin Immunol，2009，131（1）：109-118.
调节性T细胞（CD4+CD25+regulatory T cell， Treg）是近年来发现的一种新型的具有免疫负性调节作用的T淋巴细胞亚群，本研究通过流式细胞术检测AP患者外周血单个核细胞CD4+CD25+Foxp3+Treg及血清IL-2、TGF-β1水平的表达，探讨其与急性胰腺炎（AP）的相关性。
1.对象和方法
1.1研究对象
选择2013年1月至2014年5月本院住院的急性胰腺炎患者47例（男21例，女26例），平均（49.27±8.19）岁。选取同期健康体检者20名作为健康对照组，均来源于门诊体检人员或志愿者，平均（32.33±7.26）岁。两组研究对象的年龄及性别构成比较均无显著性意义（P>0.05）。
1.2 观察指标及方法
所有受试者均禁食8小时以上，于入院24小时内抽取清晨空腹采肘静脉血5毫升 （肝素抗凝），用于下列指标的测定。
1.2.1 CD4+CD25+Foxp3+Treg的测定：采用流式细胞术检测，记录CD4+CD25+，CD4+Foxp3+，CD4+CD25+Foxp3+占CD4+T细胞的百分比，并以此作为评价外周血中Treg的表达状态。
1.2.2血清IL-2、TGF-β1水平：采用ELISA双抗体夹心法测定IL-2、TGF-β1水平。
1.3统计学处理
采用SPSS 11.5软件进行统计，所有数据行描述性分析﹑正态性检验及方差齐性检验，在描述性分析中，对于正态分布的数据， 以均数±标准差（x±s）表示，正态分布数据经方差齐性检验后采用独立样本的t检验，相关性分析采用sperman检验，P<0.05表示差异有统计学意义。
2.结果
2.1 两组PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg表达情况
2.2 两组血清IL-2、TGF-β1水平情况
2.3 相关性分析
相关性分析表明：CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与血清IL-2水平呈明显正相关（r分别为 0.711、0.834，P<0.01）；CD4+CD25+Foxp3+ Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+Treg绝对数均与血清TGF-β1水平亦呈明显负相关（r分别为- 0.421、-0.749，P<0.01）。
3.讨论
CD4+CD25+Treg细胞可通过分泌TGF-β1、IL-2、IL-4等抑制性细胞因子，抑制T细胞增殖，发挥免疫抑制作用。TGF-β具有广泛生物学功能，能够调节细胞的生长、分化、炎症反应及免疫功能，TGF-β1是TGF-β的主要亚型。已有研究证实，TGF-β1通路在急性胰腺炎的发生发展中发挥重要作用[1]。目前，CD4+CD25+Foxp3+ Treg在SP中作用的研究报道相对较少。其是否通过TGF-β1发挥作用仍不清楚。本研究以CD4+CD25+Foxp3+作为Treg指标，采用流式细胞术检测SP患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+ Treg表达情况，结果显示，SP患者PBMC CD4+CD25+Foxp3+Treg数目及其与CD4+ T细胞比值均明显低于正常组，提示SP患者存在明显的免疫调节功能紊乱，CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞水平的下调可能是AP发生发展的重要机制。
Treg作用机制之一是通过分泌至细胞外或表达于细胞表面的多种细胞因子发挥免疫抑制作用，包括IL-2和TGF-β1。IL-2是T细胞产生的一种细胞免疫调节因子，是机体免疫调节网络中的核心物质，其水平高低可作为机体细胞免疫功能的重要指标[2]。IL-2以自分泌、旁分泌和內分泌形式作用于T淋巴细胞，被认为是T淋巴细胞增殖的必要条件，能正反馈增加CD25表达。CD4+CD25+Treg能通过调节TGF-β1抑制多种细胞因子的释放，从而抑制炎症反应[3]。而TGF-β1可通过直接或间接影响IL-2发挥“负调节”为主的免疫平衡作用。本研究显示，AP患者血清IL-2水平明显低于正常组，而血清TGF-β1水平较正常组明显升高，提示IL-2、TGF-β1可能也参与AP的发生和（或）发展，可能是AP的发生和（或）发展过程中的一种炎性细胞因子。本研究还显示，CD4+CD25+Foxp3+Treg/CD4+T及CD4+CD25+Foxp3+
Treg绝对数均与血清IL-2水平呈明显正相关，与血清TGF-β1水平亦呈明显负相关，提示AP患者可能通过调节IL-2及TGF-β1水平发挥作用。
参考文献
[1]荣忠厚，吴河水，杨智勇，等.重症急性胰腺炎患者外周血CD4+CD25high调节性T细胞的动态变化研究.中华普通外科杂志，2010，25：992-994.
[2]Annunziato F，Cosmi L，Santarlasci V，et a1.Phenotypic and functional features of human Thl7 cells[J].J Exp Med.2007，204（8）：1849-1861.
[3]Shen LS， Wang J， Shen DF，et al.CD4（+）CD25（+）CD127 （low/-） regulatory T cells express Foxp3 and suppress effector T cell proliferation and contribute to gastric cancers progression [J].Clin Immunol，2009，131（1）：109-118.