4Aβ15基因在毕赤氏酵母中的分泌表达及初步纯化

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【摘要】

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以pQE4Aβ15为模板,PCR扩增4Aβ15基因,并克隆到pMD18T载体中.以之进一步构建了酵母表达载体pPICZα4Aβ15.通过电转化,重组质粒pPICZα4Aβ15被整合到毕赤氏酵母GS115基因组

【作者】

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谭琳谭昕周鹏姚志彬

【机构】

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中山大学中山医学院,海南大学农学院,中国热带农业科学院热带生物技术研究所

【出处】

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生命科学研究

【发表日期】

：

2010年4期

【关键词】

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4Aβ15基因毕赤氏酵母表达质谱分析饱和硫酸铵沉淀 4Aβ15 gene Picha pastoris expression mass spectru

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目（30400512）

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以pQE4Aβ15为模板,PCR扩增4Aβ15基因,并克隆到pMD18T载体中.以之进一步构建了酵母表达载体pPICZα4Aβ15.通过电转化,重组质粒pPICZα4Aβ15被整合到毕赤氏酵母GS115基因组中.甲醇诱导GS115/pPICZα4Aβ15表达,得到重组蛋白.SDS-PAGE显示重组蛋白的分子质量为18 kD,而4Aβ15的分子质量理论值为8 kD,经Western blot和质谱分析证实重组蛋白为4Aβ15.毕赤氏酵母GS115/pPICZα4Aβ15工程菌发酵上清经60%饱和硫酸铵沉淀初

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