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摘要：利用经典的细胞生物学染色法显示细胞内的DNA 和RNA，在实际教学过程中染色效果往往很差，经对染色方法进行多次改进并进行比较实验，获得了较为理想的实验结果。该实验结果将为高中生物教学奠定基础，同时加深学生对DNA和RNA 分布理解，为遗传学的研究奠定细胞学基础。
关键词：DNA RNA 染色方法
An inprmoving Mothod for DNA and RNA Staining
Abstract : There is a big difference between the result and theory for traditional staining,
The method has been improved to get the ideal tesult The expenmental result will ofer a good way for medical cell biology expermental teacheng to increase the understanding of the distrbution of DNA and RNA/
Key words : DNA and RNA THE Staining method
中圖分类号：R446 文献标识码：B 文章编号：1004-7484（2011）18-0015-02
甲基绿-派咯宁染色法原理：甲基绿与派咯宁与核酸发生竞争性结合，甲基绿与DNA双螺旋外侧的磷酸基团结合力强，结合后阻止派咯宁从碱基之间插入，甲基绿与DNA结合产物为绿色。派咯宁与RNA结合力强，RNA结构松散，派咯宁可以插入，从而中和磷酸基团，阻止甲基绿染色，派咯宁与RNA结合物呈红色。根据显色反应不同可以定位细胞内DNA和RNA。[2]该试验的目的是调动学生的动手能力，进一步理解DNA和RNA在细胞中的定位。实验操作的可行性及实验结果的显效性是实验成败的关键。由于甲基绿染料的纯度和批次都会影响染色的效果，故本实验采用进口的甲基绿吡咯红染色剂和国产药品分染法来增加染色的效果。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物：高等动物。
1.1.2 实验药品：两种类型：①甲基绿吡咯红美国进口（液体）；②国产药品：甲基绿吡咯红购自上海生物工程有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 取口腔上皮细胞制片：①在洁净的载玻片上，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。②用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻刮几下，把牙签上附有碎屑的一端，放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下。③点燃酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。
1.2.2 水解：①在小烧杯中加入30ml质量分数为8％的盐酸，将烘干的载玻片放入小烧杯中。②在大烧杯中加入30℃温水。③将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。
1.2.3 冲洗涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s。
1.2.4 染色：第一种染色方法：①用吸水纸吸去载玻片上的水分。②将国产药品吡罗红染色剂，滴2滴在载玻片上，染色1～2min。③吸去多余染色剂，盖上盖玻片。④复染：滴加数滴甲基绿染液，染色10min。⑤染色后冲洗晾干镜检。第二种染色法：用进口的吡咯红甲基绿染色液，染色10min；染色后冲洗晾干镜检。
2 实验结果
通过对染料的配制，染色时间及染料使用顺序进行比较，染色结果如下：
图一：采用国产药品染色法细胞核绿色不显著，细胞质紫色。
图二：采用进口药品染色法细胞核蓝绿色，细胞质紫色。
3 讨论
观察DNA和RNA在细胞内分布的实验通常采用经典的甲基绿吡咯红分染法，但是这种方法常常难以取得满意的效果，原因在于甲基绿和吡咯红同核酸发生竞争性结合，吡咯红通常将细胞质被染成紫色，而细胞核却不着色，覆盖甲基绿的颜色。用分染的方法可以使细胞内的DNA着色，但是由于甲基绿的染色时间把握的不是很好，所以染色效果比较差。而且不同批次的甲基绿的结合力不同，所以实验的成功率比较低。但是采用进口药品甲基绿吡咯红混合染色液，经过稀释后可以直接进行染色。实验可以收到良好的效果。
参考文献
[1] 梁强.观察DNA和RNA在细胞内的分布实验[J].生物学通报.
[2] 何斌.关于DNA和RNA在细胞内的分布实验的改进建议[J].生物学通报.
[3] 谭云.观察DNA和RNA在细胞内的分布实验及其“用高倍镜观察线粒体和叶绿体的实验教学[J].生物学通报.
关键词：DNA RNA 染色方法
An inprmoving Mothod for DNA and RNA Staining
Abstract : There is a big difference between the result and theory for traditional staining,
The method has been improved to get the ideal tesult The expenmental result will ofer a good way for medical cell biology expermental teacheng to increase the understanding of the distrbution of DNA and RNA/
Key words : DNA and RNA THE Staining method
中圖分类号：R446 文献标识码：B 文章编号：1004-7484（2011）18-0015-02
甲基绿-派咯宁染色法原理：甲基绿与派咯宁与核酸发生竞争性结合，甲基绿与DNA双螺旋外侧的磷酸基团结合力强，结合后阻止派咯宁从碱基之间插入，甲基绿与DNA结合产物为绿色。派咯宁与RNA结合力强，RNA结构松散，派咯宁可以插入，从而中和磷酸基团，阻止甲基绿染色，派咯宁与RNA结合物呈红色。根据显色反应不同可以定位细胞内DNA和RNA。[2]该试验的目的是调动学生的动手能力，进一步理解DNA和RNA在细胞中的定位。实验操作的可行性及实验结果的显效性是实验成败的关键。由于甲基绿染料的纯度和批次都会影响染色的效果，故本实验采用进口的甲基绿吡咯红染色剂和国产药品分染法来增加染色的效果。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物：高等动物。
1.1.2 实验药品：两种类型：①甲基绿吡咯红美国进口（液体）；②国产药品：甲基绿吡咯红购自上海生物工程有限公司。
1.2 实验方法
1.2.1 取口腔上皮细胞制片：①在洁净的载玻片上，滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液。②用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻刮几下，把牙签上附有碎屑的一端，放在上述载玻片上的液滴中涂抹几下。③点燃酒精灯，将涂有口腔上皮细胞的载玻片烘干。
1.2.2 水解：①在小烧杯中加入30ml质量分数为8％的盐酸，将烘干的载玻片放入小烧杯中。②在大烧杯中加入30℃温水。③将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在大烧杯中保温5min。
1.2.3 冲洗涂片：用蒸馏水的缓水流冲洗载玻片10s。
1.2.4 染色：第一种染色方法：①用吸水纸吸去载玻片上的水分。②将国产药品吡罗红染色剂，滴2滴在载玻片上，染色1～2min。③吸去多余染色剂，盖上盖玻片。④复染：滴加数滴甲基绿染液，染色10min。⑤染色后冲洗晾干镜检。第二种染色法：用进口的吡咯红甲基绿染色液，染色10min；染色后冲洗晾干镜检。
2 实验结果
通过对染料的配制，染色时间及染料使用顺序进行比较，染色结果如下：
图一：采用国产药品染色法细胞核绿色不显著，细胞质紫色。
图二：采用进口药品染色法细胞核蓝绿色，细胞质紫色。
3 讨论
观察DNA和RNA在细胞内分布的实验通常采用经典的甲基绿吡咯红分染法，但是这种方法常常难以取得满意的效果，原因在于甲基绿和吡咯红同核酸发生竞争性结合，吡咯红通常将细胞质被染成紫色，而细胞核却不着色，覆盖甲基绿的颜色。用分染的方法可以使细胞内的DNA着色，但是由于甲基绿的染色时间把握的不是很好，所以染色效果比较差。而且不同批次的甲基绿的结合力不同，所以实验的成功率比较低。但是采用进口药品甲基绿吡咯红混合染色液，经过稀释后可以直接进行染色。实验可以收到良好的效果。
参考文献
[1] 梁强.观察DNA和RNA在细胞内的分布实验[J].生物学通报.
[2] 何斌.关于DNA和RNA在细胞内的分布实验的改进建议[J].生物学通报.
[3] 谭云.观察DNA和RNA在细胞内的分布实验及其“用高倍镜观察线粒体和叶绿体的实验教学[J].生物学通报.