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以兰州百合新鲜鳞茎为外植体,选择MS和1/2 MS培养基为基本培养基,采用正交设计研究不同消毒剂组合对外植体存活率、不同植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导率和发芽率的影响;并用响应面法优化不同激素组合对生根率的影响.结果表明:(1)最佳消毒剂组合为75％乙醇消毒20 s+2％次氯酸钠溶液浸泡10 min,外植体成活率可达96.30％.(2)愈伤组织诱导最佳培养基配方为MS+0.3 mg·L-1 NAA+3 mg·L-16-BA,诱导率可达96.33％.(3)促进发芽的最佳培养基配方为MS+0.3 mg·L-1 NAA+3 mg·L-16-BA,发芽率可达98.00％.(4)促进生根的最佳培养基配方为1/2 MS+0.5 mg·L-1 NAA+3 mg·L-16-BA+2 mg·L-1活性炭,生根率可达94.00％.本研究建立的组培快繁体系可用于兰州百合的快速大量繁殖,可为兰州百合组培苗的工厂化生产提供参考.